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利用基因突变的方法研究青蒿倍半萜合酶催化特异性决定区域

摘要第5-6页
Abstract第6页
第1章 绪论第9-18页
    1.1 萜类合酶研究进展第9-13页
        1.1.1 萜类合酶简介第9-10页
        1.1.2 萜类合酶催化机制第10-11页
        1.1.3 萜类合酶的特异性决定位点的研究第11-13页
    1.2 青蒿倍半萜合酶研究进展第13-15页
        1.2.1 紫穗槐二烯合酶( amorpha-4 , 11-diene synthase)第13页
        1.2.2 柏木脑合酶(epi-cedrol synthase)第13-14页
        1.2.3 大根香叶烯 A 合酶( germacrene A synthase)第14-15页
        1.2.4 其他倍半萜合酶第15页
    1.3 PCR 介导的基因突变技术第15-18页
        1.3.1 重叠延伸 PCR第15-16页
        1.3.2 快速定点突变第16-18页
第2章 青蒿紫穗槐二烯合酶与柏木脑合酶片段互换研究第18-29页
    2.1 实验材料与方法第18-24页
        2.1.1 材料第18页
        2.1.2 试剂与仪器第18-21页
        2.1.3 方法第21-24页
    2.2 结果第24-27页
        2.2.1 重叠延伸 PCR 法构建融合基因 AE第24页
        2.2.2 AE 表达载体重组质粒的构建第24-26页
        2.2.3 AE 的诱导表达第26页
        2.2.4 AE 的功能鉴定第26-27页
    2.3 讨论第27-29页
第3章 青蒿紫穗槐二烯合酶定点突变研究第29-36页
    3.1 实验材料与方法第29-31页
        3.1.1 材料第29页
        3.1.2 试剂与仪器第29页
        3.1.3 方法第29-31页
    3.2 结果第31-33页
        3.2.1 quickchange 法点突变 ADS 基因第31页
        3.2.2 pETADS439 的诱导表达第31-32页
        3.2.3 ADS 突变的功能鉴定第32-33页
    3.3 讨论第33-36页
第4章 青蒿移码突变 GermacreneA 合酶的功能鉴定第36-44页
    4.1 实验材料与方法第36-38页
        4.1.1 材料第36页
        4.1.2 试剂与仪器第36页
        4.1.3 方法第36-38页
    4.2 结果第38-42页
        4.2.1 青蒿 germacrene 合酶移码突变的 cDNA 的克隆及重组质粒构建第38-40页
        4.2.2 pETG 的表达与纯化第40-41页
        4.2.3 germacrene 的功能鉴定第41-42页
    4.3 讨论第42-44页
结语第44-45页
参考文献第45-48页
致谢第48页

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