摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 萜类合酶研究进展 | 第9-13页 |
1.1.1 萜类合酶简介 | 第9-10页 |
1.1.2 萜类合酶催化机制 | 第10-11页 |
1.1.3 萜类合酶的特异性决定位点的研究 | 第11-13页 |
1.2 青蒿倍半萜合酶研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 紫穗槐二烯合酶( amorpha-4 , 11-diene synthase) | 第13页 |
1.2.2 柏木脑合酶(epi-cedrol synthase) | 第13-14页 |
1.2.3 大根香叶烯 A 合酶( germacrene A synthase) | 第14-15页 |
1.2.4 其他倍半萜合酶 | 第15页 |
1.3 PCR 介导的基因突变技术 | 第15-18页 |
1.3.1 重叠延伸 PCR | 第15-16页 |
1.3.2 快速定点突变 | 第16-18页 |
第2章 青蒿紫穗槐二烯合酶与柏木脑合酶片段互换研究 | 第18-29页 |
2.1 实验材料与方法 | 第18-24页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第18-21页 |
2.1.3 方法 | 第21-24页 |
2.2 结果 | 第24-27页 |
2.2.1 重叠延伸 PCR 法构建融合基因 AE | 第24页 |
2.2.2 AE 表达载体重组质粒的构建 | 第24-26页 |
2.2.3 AE 的诱导表达 | 第26页 |
2.2.4 AE 的功能鉴定 | 第26-27页 |
2.3 讨论 | 第27-29页 |
第3章 青蒿紫穗槐二烯合酶定点突变研究 | 第29-36页 |
3.1 实验材料与方法 | 第29-31页 |
3.1.1 材料 | 第29页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第29页 |
3.1.3 方法 | 第29-31页 |
3.2 结果 | 第31-33页 |
3.2.1 quickchange 法点突变 ADS 基因 | 第31页 |
3.2.2 pETADS439 的诱导表达 | 第31-32页 |
3.2.3 ADS 突变的功能鉴定 | 第32-33页 |
3.3 讨论 | 第33-36页 |
第4章 青蒿移码突变 GermacreneA 合酶的功能鉴定 | 第36-44页 |
4.1 实验材料与方法 | 第36-38页 |
4.1.1 材料 | 第36页 |
4.1.2 试剂与仪器 | 第36页 |
4.1.3 方法 | 第36-38页 |
4.2 结果 | 第38-42页 |
4.2.1 青蒿 germacrene 合酶移码突变的 cDNA 的克隆及重组质粒构建 | 第38-40页 |
4.2.2 pETG 的表达与纯化 | 第40-41页 |
4.2.3 germacrene 的功能鉴定 | 第41-42页 |
4.3 讨论 | 第42-44页 |
结语 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
致谢 | 第48页 |