| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 PRRSV | 第9-12页 |
| 1.1.1 PRRS 概述 | 第9页 |
| 1.1.2 PRRSV 的形态结构及基因组结构 | 第9-10页 |
| 1.1.3 PRRSV 囊膜蛋白 E | 第10-11页 |
| 1.1.4 PRRSV 的发病机制 | 第11-12页 |
| 1.2 炎性体 | 第12-15页 |
| 1.2.1 炎性体概述 | 第12页 |
| 1.2.2 NALP1 炎性体 | 第12-13页 |
| 1.2.3 NALP3 炎性体 | 第13-15页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 实验一 PRRSV 可激活巨噬细胞的炎性体 | 第16-25页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 细胞和毒株 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第16页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.5 实验所用溶液及其配置 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 猪肺泡巨噬细胞的分离 | 第18页 |
| 2.2.2. 细胞的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.3 PRRSV 的再生 | 第19页 |
| 2.2.4 PRRSV 的扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.5 PRRSV 病毒滴度的测定 | 第20页 |
| 2.2.6 PRRSV 刺激猪肺泡巨噬细胞实验 | 第20-21页 |
| 2.2.7 猪 IL-1β、IL-18 的测定 | 第21-22页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第22-23页 |
| 2.3.1 PRRSV 的再生及病毒滴度的测定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 PRRSV 可以激活肺泡巨噬细胞炎性体 | 第23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 3 实验二 PRRSV 囊膜蛋白 E 真核表达载体的构建 | 第25-40页 |
| 3.1 材料 | 第25-29页 |
| 3.1.1 质粒、菌株和细胞系 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.4 实验所用溶液及其配置 | 第26-29页 |
| 3.2 方法 | 第29-36页 |
| 3.2.1 PRRSV 囊膜蛋白 E 基因的扩增 | 第29-31页 |
| 3.2.2 囊膜蛋白 E 真核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| 3.2.3 重组囊膜蛋白 E mRNA 的体外合成 | 第33-34页 |
| 3.2.4 重组囊膜蛋白 E 表达与鉴定 | 第34-36页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第36-38页 |
| 3.3.1 PRRSV 囊膜蛋白 E 真核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2 囊膜蛋白 E 基因在肺泡巨噬细胞中的表达 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 4 实验三 PRRSV 囊膜蛋白 E 激活猪肺泡巨噬细胞炎性体 | 第40-43页 |
| 4.1 材料 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-41页 |
| 4.2.1 囊膜蛋白 E mRNA 转染肺泡巨噬细胞 | 第40-41页 |
| 4.2.2 猪 IL-1β含量的测定 | 第41页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第41-42页 |
| 4.3.1 转染囊膜蛋白 E mRNA 可以激活 LPS 刺激的猪巨噬细胞炎性体 | 第41-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
