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基于磁球信号放大技术的超灵敏DNA检测方法及其在测定基因表达中的应用

中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
符号说明第14-15页
第一章 绪论第15-43页
    1.1 DNA简介及其检测的意义第15-16页
    1.2 目前的DNA检测技术第16-26页
        1.2.1 标记型第16-24页
            1.2.1.1 荧光分析法第17-18页
            1.2.1.2 电化学方法第18-20页
            1.2.1.3 化学发光法第20-21页
            1.2.1.4 电化学发光法第21-23页
            1.2.1.5 其他检测方法第23-24页
        1.2.2 无标记型第24-26页
    1.3 检测DNA中的放大技术第26-34页
        1.3.1 核酸体外扩增技术第26-29页
            1.3.1.1 聚合酶链式反应(PCR)第26-27页
            1.3.1.2 链替代扩增技术(SDA)第27页
            1.3.1.3 连接酶链式反应(LCR)第27页
            1.3.1.4 核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)第27-28页
            1.3.1.5 Qβ复制酶技术第28页
            1.3.1.6 转录介导的扩增(TMA)第28-29页
            1.3.1.7 滚环复制(RCA)第29页
        1.3.2 检测物信号放大技术第29-34页
            1.3.2.1 基于酶反应的信号放大技术第29-30页
            1.3.2.2 基于纳米粒子的信号放大技术第30-31页
            1.3.2.3 基于微磁球的信号放大检测第31-34页
    1.4 展望第34页
    1.5 参考文献第34-43页
第二章 基于磁球放大技术的电化学发光法检测细胞中mRNA第43-59页
    2.1 前言第43-44页
    2.2 实验部分第44-49页
        2.2.1 材料与试剂第44-46页
        2.2.2 实验仪器第46-47页
        2.2.3 三联吡啶钌N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成第47页
        2.2.4 荧光检测MBs上的Ru(bpy)_3~(2+)-NHS第47-48页
        2.2.5 链霉亲和素修饰的96孔板包被DNA复合物第48页
        2.2.6 SA-MBs结合至基底上的B-DNAp,释放并标记上Ru(bpy)_3~(2+)-NHS;用CNTs包被Ru(bpy)_3~(2+)-NHS-MBs第48页
        2.2.7 ECL和ECL光谱检测第48-49页
        2.2.8 检测细胞中β2M的基因表达第49页
    2.3 结果与讨论第49-55页
        2.3.1 ECL光谱法检测人乳腺癌细胞中β2M mRNA含量第49-51页
        2.3.2 基于CNTs包裹MBs ECL方法检测细胞中β2M的基因表达水平第51-55页
    2.4 结论第55页
    2.5 参考文献第55-59页
第三章 基于磁球表面DNA杂交-去杂交信号放大荧光检测DNA第59-71页
    3.1 前言第59-61页
    3.2 实验部分第61-64页
        3.2.1 材料与试剂第61页
        3.2.2 实验仪器第61-62页
        3.2.3 制备DNAp修饰的MBs第62页
        3.2.4 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应第62-63页
        3.2.5 t-DNA与B-DNAc和DNAp-MBs的结合第63页
        3.2.6 DNAp-MBs的释放及其杂交-去杂交反应第63页
        3.2.7 Cy5-DNAd-DNAp-MBs落射荧光成像第63-64页
        3.2.8 定量细胞中RPLP2 mRNA第64页
    3.3 结果与讨论第64-67页
        3.3.1 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应第64-65页
        3.3.2 定量检测t-DNA第65-66页
        3.3.3 人乳腺癌细胞中RPLP2 mRNA的测定第66-67页
    3.4 结论第67-68页
    3.5 参考文献第68-71页
第四章 基于多色编码微珠单分子检测多种DNA技术及其应用第71-90页
    4.1 前言第71-72页
    4.2 实验部分第72-78页
        4.2.1 材料与试剂第72-76页
        4.2.2 实验仪器第76页
        4.2.3 多色磁球的制备第76-77页
        4.2.4 编码磁球的荧光成像第77页
        4.2.5 降解mRNA得到单链cDNAs第77-78页
        4.2.6 多编码MBs定量检测cDNAs第78页
    4.3 结果与讨论第78-86页
        4.3.1 多色编码微珠单分子检测细胞中多种DNA及其多基因表达第78-86页
    4.4 结论第86页
    4.5 参考文献第86-90页
致谢第90-91页
攻读学位期间发表学术论文第91-92页
学位论文评阅及答辩情况表第92页

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