| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 中英文缩略词表 | 第15-17页 |
| 第1章 引言 | 第17-26页 |
| 1.1 概述 | 第17-18页 |
| 1.2 肿瘤干细胞 | 第18页 |
| 1.3 EMT | 第18-19页 |
| 1.4 转化生长因子 β（TGF-β） | 第19-20页 |
| 1.5 Bmi-1 | 第20-21页 |
| 1.6 抑制TGF-β 信号转导和Bmi-1 表达 | 第21-22页 |
| 1.7 AMPK的抑癌功能 | 第22-24页 |
| 1.8 研究思路 | 第24-26页 |
| 第2章 LKB1/AMPK对TGF-β 信号转导及EMT的抑制 | 第26-46页 |
| 2.1 背景 | 第26-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第28页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第29-30页 |
| 2.2.5 AMPKα1 活化突变体腺病毒的制备 | 第30页 |
| 2.2.6 敲除LKB1表达细胞株的构建 | 第30页 |
| 2.2.7 构建AMPK DN细胞株 | 第30-31页 |
| 2.2.8 稳定表达LKB细胞株的构建 | 第31页 |
| 2.2.9 Western blot | 第31-32页 |
| 2.2.10 荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 2.2.11 细胞划痕实验 | 第33页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第33页 |
| 2.3 结果 | 第33-44页 |
| 2.3.1 LKB1在二甲双胍抑制Smad2/3 磷酸化中的作用 | 第33-35页 |
| 2.3.2 AMPK抑制TGF-β 诱导的Smad2/3 磷酸化 | 第35-37页 |
| 2.3.3 AMPK抑制TGF-β 信号调节的靶基因表达 | 第37-38页 |
| 2.3.4 AMPK抑制TGF-β 诱导的细胞迁移 | 第38-41页 |
| 2.3.5 AMPK抑制TGF-β 诱导的EMT | 第41-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 结论 | 第45-46页 |
| 第3章 LKB1/AMPK对乳腺癌细胞中TGF-β1 表达及TGF-β 信号转导的抑制作用 | 第46-60页 |
| 3.1 背景 | 第46-47页 |
| 3.2 材料与方法 | 第47-50页 |
| 3.2.1 血清标本 | 第47页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 3.2.3 动物实验 | 第48页 |
| 3.2.4 细胞培养 | 第48页 |
| 3.2.5 病毒包装与稳定细胞株构建 | 第48-49页 |
| 3.2.6 免疫荧光细胞化学染色 | 第49页 |
| 3.2.7 荧光定量PCR | 第49页 |
| 3.2.8 细胞划痕实验 | 第49页 |
| 3.2.9 Transwell assay | 第49页 |
| 3.2.10 统计学方法 | 第49-50页 |
| 3.3 结果 | 第50-58页 |
| 3.3.1 AMPK失活导致乳腺上皮细胞特点丧失 | 第50页 |
| 3.3.2 LKB1/AMPK抑制TGF-β 诱导的Smad磷酸化 | 第50-53页 |
| 3.3.3 AMPK对Smad转录活性的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.4 二甲双胍对TGF-β1 表达的抑制作用 | 第54-55页 |
| 3.3.5 二甲双胍抑制TGF-β1 诱导的EMT | 第55-57页 |
| 3.3.6 二甲双胍抑制TGF-β1 诱导的细胞迁移 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-59页 |
| 3.5 结论 | 第59-60页 |
| 第4章 AMPK对胃癌细胞中TGF-β 信号和EMT标志物的抑制 | 第60-69页 |
| 4.1 前言 | 第60-61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-62页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第61页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 4.2.3 细胞培养 | 第62页 |
| 4.2.4 细胞划痕实验 | 第62页 |
| 4.2.5 Western Blot | 第62页 |
| 4.2.6 统计学分析 | 第62页 |
| 4.3 结果 | 第62-67页 |
| 4.3.1 AMPK抑制TGF-β 诱导的细胞迁移 | 第62-63页 |
| 4.3.2 AMPK抑制TGF-β 诱导的EMT标志物表达 | 第63-64页 |
| 4.3.3 AMPK抑制TGF-β 的表达 | 第64-66页 |
| 4.3.4 AMPK抑制TGF-β 的表达 | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-68页 |
| 4.5 结论 | 第68-69页 |
| 第5章 AMPK抑制Bmi-1 的表达 | 第69-79页 |
| 5.1 背景 | 第69-70页 |
| 5.2 材料与方法 | 第70-73页 |
| 5.2.1 材料 | 第70-71页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第71页 |
| 5.2.3 病毒包装与稳定细胞株构建 | 第71页 |
| 5.2.4 Western blot | 第71-72页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR | 第72-73页 |
| 5.2.6 miR转染细胞 | 第73页 |
| 5.2.7 统计学处理 | 第73页 |
| 5.3 结果 | 第73-77页 |
| 5.3.1 LKB1/AMPK下调Bmi-1 的表达 | 第73-74页 |
| 5.3.2 AMPK上调LITAF的同时下调Bmi-1 | 第74-75页 |
| 5.3.3 AMPK上调miR-15a/mi R-128/miR-192/ miR-194表达 | 第75-76页 |
| 5.3.4 miRNAs在LITAF调节bmi-1 中的作用 | 第76-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-78页 |
| 5.5 结论 | 第78-79页 |
| 第6章 结论与展望 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第91-92页 |
| 综述 | 第92-127页 |
| AMPK 在能量代谢和抑癌中的作用 | 第92-113页 |
| References | 第104-113页 |
| miR-128, a key regulator of oncogenic properties | 第113-127页 |
| References | 第124-127页 |
