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抗甲型流感病毒卵黄抗体的制备、活性评价及其应用研究

摘要第4-7页
Abstract第7-11页
缩略词表(Abbreviations)第21-24页
第一章 绪论第24-56页
    1.1 流感的危害及其流行病学第24-26页
    1.2 甲型流感病毒概述第26-40页
        1.2.1 流感病毒的分类和命名第26-27页
        1.2.2 甲型流感病毒的形态及基因组成第27-31页
        1.2.3 甲型流感病毒主要抗原及其特点第31-33页
        1.2.4 甲型流感病毒遗传变异规律第33-34页
        1.2.5 甲型流感病毒的增殖周期第34-35页
        1.2.6 甲型H1N1流感病毒第35-37页
        1.2.7 甲型流感病毒的检测第37-38页
        1.2.8 甲型流感病毒预防与治疗研究进展第38-40页
    1.3 卵黄抗体研究进展第40-53页
        1.3.1 IgY的结构特点及其生物学特性第41-43页
        1.3.2 IgY的稳定性研究第43-44页
        1.3.3 IgY的提取与分离纯化第44-46页
        1.3.4 IgY的应用第46-53页
    1.4 研究意义和主要工作第53-56页
第二章 抗甲型流感病毒卵黄抗体的制备第56-79页
    2.1 前言第56-57页
    2.2 材料与试剂第57页
    2.3 实验仪器第57-58页
    2.4 实验动物第58-59页
    2.5 实验方法第59-68页
        2.5.1 实验溶液配制第59-60页
        2.5.2 甲型H1N1流感病毒的培养与鉴定第60-61页
        2.5.3 抗原制备及动物免疫第61-62页
        2.5.4 IgY提取与纯化第62-63页
        2.5.5 SDS-PAGE第63-65页
        2.5.6 IgY蛋白含量测定第65-66页
        2.5.7 抗体效价检测第66-67页
        2.5.8 IgY特异性检测第67-68页
        2.5.9 数据处理及统计分析第68页
    2.6 结果与分析第68-76页
        2.6.1 病毒的培养与鉴定第68-69页
        2.6.2 IgY产率第69页
        2.6.3 分离纯化各部分纯度分析第69-70页
        2.6.4 IgY蛋白含量测定第70-71页
        2.6.5 抗体效价随时间的变化第71-73页
        2.6.6 IgY特异性检测结果第73-76页
    2.7 讨论第76-77页
        2.7.1 IgY特点及其与血清抗体之间的关系第76页
        2.7.2 IgY的分离纯化第76-77页
    2.8 本章小结第77-79页
第三章 抗甲型H1N1流感病毒卵黄抗体的活性评价第79-99页
    3.1 前言第79-80页
    3.2 试剂与仪器第80-81页
        3.2.1 材料与试剂第80-81页
        3.2.2 实验仪器第81页
    3.3 实验方法第81-88页
        3.3.1 琼脂扩散试验第81-82页
        3.3.2 免疫荧光实验第82页
        3.3.3 免疫印迹试验第82页
        3.3.4 血凝抑制试验第82-83页
        3.3.5 抗H732 IgY对MDCK细胞毒性测定第83-84页
        3.3.6 抗H732 IgY体外细胞水平的抗病毒活性评价第84-87页
        3.3.7 抗H732 IgY稳定性试验第87-88页
    3.4 结果与分析第88-96页
        3.4.1 抗H732 IgY对病毒的免疫沉淀作用第88页
        3.4.2 抗H732 IgY免疫荧光检测第88-89页
        3.4.3 抗H732 IgY对病毒膜蛋白的特异性结合作用第89-90页
        3.4.4 抗H732 IgY的血凝抑制作用第90-91页
        3.4.5 对MDCK细胞最大无毒浓度第91页
        3.4.6 不同添加方式的空斑减数率第91-93页
        3.4.7 抗H732 IgY稳定性试验结果第93-96页
    3.5 讨论第96-97页
    3.6 本章小结第97-99页
第四章 抗甲型H1N1流感病毒卵黄抗体小鼠体内的抗病毒活性研究第99-122页
    4.1 前言第99页
    4.2 试剂与仪器第99-100页
        4.2.1 材料与试剂第99-100页
        4.2.2 实验仪器第100页
    4.3 实验方法第100-106页
        4.3.1 H732病毒感染BALB/C小鼠半数致死量测定(LD50)第100-101页
        4.3.2 抗H732 IgY对H732感染小鼠的死亡保护作用第101-103页
        4.3.3 抗H732 IgY对H732感染小鼠肺损伤及病毒增殖的影响第103-106页
    4.4 结果与讨论第106-119页
        4.4.1 H732病毒毒力的测定第106页
        4.4.2 抗H732 IgY对H732感染小鼠的死亡保护作用第106-112页
        4.4.3 抗H732 IgY对H732感染小鼠肺损伤及病毒增殖的影响第112-119页
    4.5 讨论第119-120页
    4.6 小结第120-122页
第五章 甲型H1N1流感病毒表面增强拉曼光谱免疫分析方法的建立与应用第122-137页
    5.1 前言第122-126页
        5.1.1 拉曼光谱和表面增强拉曼光谱简介第122页
        5.1.2 表面增强拉曼光谱技术应用于标记免疫分析的原理第122-125页
        5.1.3 本章技术路线第125-126页
    5.2 试剂第126-127页
    5.3 仪器设备第127-128页
    5.4 实验方法第128-130页
        5.4.1 溶液的配制及保存第128页
        5.4.2 金溶胶的制备第128-129页
        5.4.3 4,4’-联吡啶标记免疫金溶胶的制备第129页
        5.4.4 用烷基化(APES)处理,醛基化(GA)修饰的固相基底的制备第129-130页
        5.4.5 基于H1N1流感病毒的“三明治”结构的组装及SERS检测第130页
    5.5 结果及分析第130-135页
        5.5.1 金溶胶溶液中金颗粒的电镜检测结果第130-131页
        5.5.2 紫外光谱表征金溶胶及标记金溶胶特性第131-132页
        5.5.3 SERS光谱表征4,4’-联吡啶标记量的影响第132-133页
        5.5.4 抗H732 IgY标记免疫金溶胶的SERS光谱第133-134页
        5.5.5 SERS标记免疫检测H732流感病毒第134-135页
    5.6 本章小结第135-137页
结论第137-138页
参考文献第138-152页
博士期间发表论文第152-154页
致谢第154页

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