| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第16-33页 |
| 第一节 无脊椎动物免疫系统 | 第16-25页 |
| 1.1 引言 | 第16-18页 |
| 1.2 细胞免疫 | 第18-21页 |
| 1.3 体液免疫 | 第21-25页 |
| 第二节 无脊椎动物免疫的分子机制 | 第25-28页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 基因表达调控 | 第25-26页 |
| 2.3 Toll信号通路 | 第26页 |
| 2.4 Imd信号通路 | 第26-27页 |
| 2.5 Toll通路和Imd通路之间的相互作用 | 第27-28页 |
| 2.6 MAPK信号通路 | 第28页 |
| 第三节 研究意义及实验方案 | 第28-33页 |
| 3.1 研究意义 | 第28-31页 |
| 3.2 研究方案 | 第31-33页 |
| 第二章 具有免疫活性的中华绒螯蟹血细胞原代培养技术的建立 | 第33-49页 |
| 第一节 前言 | 第33-34页 |
| 第二节 材料与方法 | 第34-38页 |
| 2.1 实验动物及样品收集 | 第34页 |
| 2.2 血淋巴收集及血细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.3 PAMP及细菌免疫刺激及样品收集 | 第35-36页 |
| 2.4 总RNA提取和cDNA一链合成 | 第36页 |
| 2.5 荧光定量PCR检测 | 第36-37页 |
| 2.6 Western blot检测 | 第37-38页 |
| 2.7 数据分析 | 第38页 |
| 第三节 结果 | 第38-44页 |
| 3.1 中华绒螯蟹血细胞培养及FBS的影响 | 第38-39页 |
| 3.2 免疫刺激后EsDWD1、EsLecG和EsToll2基因的时间表达 | 第39-43页 |
| 3.3 培养的血细胞在免疫刺激后的黑化反应 | 第43-44页 |
| 3.4 免疫刺激后的JNK、ERK和p38磷酸化 | 第44页 |
| 第四节 讨论 | 第44-49页 |
| 第三章 基于iTRAQ的中华绒螯蟹血细胞差异免疫诱导分析 | 第49-66页 |
| 第一节 前言 | 第49-50页 |
| 第二节 材料与方法 | 第50-55页 |
| 2.1 实验动物及血细胞培养 | 第50-51页 |
| 2.2 细菌准备及免疫刺激 | 第51页 |
| 2.3 蛋白准备及SDS-PAGE电泳 | 第51页 |
| 2.4 酶解和肽段定量 | 第51-52页 |
| 2.5 肽段标记及SCX分级 | 第52页 |
| 2.6 LC-MS/MS质谱检测 | 第52-53页 |
| 2.7 质谱数据分析 | 第53-55页 |
| 第三节 结果 | 第55-63页 |
| 3.1 总蛋白定量 | 第55页 |
| 3.2 SDS-PAGE电泳 | 第55-56页 |
| 3.3 肽段离子得分分布 | 第56-57页 |
| 3.4 蛋白质相对分子质量分布 | 第57-58页 |
| 3.5 肽段序列长度分布 | 第58页 |
| 3.6 蛋白质丰度比 | 第58-59页 |
| 3.7 蛋白质丰度比分布 | 第59页 |
| 3.8 蛋白质鉴定及蛋白注释 | 第59-61页 |
| 3.9 差异免疫诱导的蛋白质鉴定及分析 | 第61-63页 |
| 第四节 讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 转谷氨酰胺酶的免疫调控功能研究 | 第66-90页 |
| 第一节 前言 | 第66-68页 |
| 第二节 材料与方法 | 第68-74页 |
| 2.1 实验动物及样品收集 | 第68页 |
| 2.2 总RNA提取和cDNA一链合成 | 第68-69页 |
| 2.3 EsTGase cDNA全长克隆 | 第69-70页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第70-71页 |
| 2.5 EsTGase的组织表达分析 | 第71页 |
| 2.6 细菌免疫刺激后血细胞中EsTGase的表达谱分析 | 第71-72页 |
| 2.7 EsTGase的活性分析 | 第72页 |
| 2.8 EsTGase的体外干扰 | 第72-73页 |
| 2.9 EsTGase干扰后免疫基因的表达分析 | 第73-74页 |
| 2.10 EsTGase干扰后的细菌计数 | 第74页 |
| 2.11 统计学数据分析 | 第74页 |
| 第三节 结果 | 第74-87页 |
| 3.1 EsTGase的克隆及鉴定 | 第74-79页 |
| 3.2 EsTGase的系统进化分析 | 第79-80页 |
| 3.3 EsTGase的组织表达分析 | 第80-81页 |
| 3.4 血细胞免疫刺激后EsTGase的表达谱分析 | 第81页 |
| 3.5 血细胞免疫刺激后EsTGase的蛋白活性分析 | 第81-83页 |
| 3.6 EsTGase干扰后对免疫相关基因的影响 | 第83-86页 |
| 3.7 EsTGase干扰后对细菌增殖的影响 | 第86-87页 |
| 第四节 讨论 | 第87-90页 |
| 第五章 C型凝集素家族分子EsLecH的免疫功能研究 | 第90-114页 |
| 第一节 前言 | 第90-91页 |
| 第二节 材料与方法 | 第91-96页 |
| 2.1 实验动物及样品收集 | 第91-92页 |
| 2.2 总RNA提取以及一链cDNA合成 | 第92页 |
| 2.3 EsLecH cDNA全长的克隆 | 第92页 |
| 2.4 EsLecH的组织表达分析 | 第92页 |
| 2.5 免疫刺激后血细胞中EsLecH的表达谱分析 | 第92页 |
| 2.6 EsLecH重组蛋白表达载体的构建 | 第92-93页 |
| 2.7 重组蛋白的纯化与获得 | 第93页 |
| 2.8 细菌结合试验 | 第93-94页 |
| 2.9 细菌生长抑制试验 | 第94页 |
| 2.10 体外RNA干扰 | 第94页 |
| 2.11 抗菌肽的表达和JNK磷酸化检测 | 第94-96页 |
| 2.12 生物信息学分析 | 第96页 |
| 2.13 数据分析 | 第96页 |
| 第三节 结果 | 第96-110页 |
| 3.1 EsLecH cDNA全长的克隆及鉴定 | 第96页 |
| 3.2 EsLecH的组织表达分析 | 第96-101页 |
| 3.3 免疫刺激后EsLecH在血细胞中的表达分析 | 第101页 |
| 3.4 EsLecH重组蛋白(rEsLecH)的表达与纯化 | 第101-103页 |
| 3.5 EsLecH的微生物结合能力 | 第103-105页 |
| 3.6 EsLecH的抑菌活性 | 第105页 |
| 3.7 EsLecH和JNK磷酸化对抗菌肽表达的调控 | 第105-108页 |
| 3.8 EsLecH通过JNK调控抗菌肽的表达 | 第108-110页 |
| 第四节 讨论 | 第110-114页 |
| 研究结论 | 第114-116页 |
| 研究特色及创新点 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-136页 |
| 附录 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
