| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 第一章 昆虫免疫及相关功能基因研究进展 | 第13-22页 |
| 1.1 昆虫的免疫 | 第13-18页 |
| 1.1.1 昆虫的细胞免疫 | 第14页 |
| 1.1.2 昆虫的体液免疫 | 第14-15页 |
| 1.1.3 昆虫的模式识别受体 | 第15-17页 |
| 1.1.4 JAK/STAT途径 | 第17-18页 |
| 1.1.5 Toll途径和Imd途径 | 第18页 |
| 1.2 昆虫脂肪酶及其基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 HSP70蛋白的概述 | 第20-21页 |
| 1.3.1 热休克蛋白的分类 | 第20页 |
| 1.3.2 热休克蛋白HSP70的生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.4 本课题研究的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 柞蚕脂肪酶基因的克隆与序列分析 | 第22-35页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 柞蚕总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.2 柞蚕cDNA第一条链的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.3 柞蚕脂肪酶基因PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.4 PCR产物目的条带的回收与纯化 | 第26页 |
| 2.2.5 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 2.2.6 PCR产物的链接转化 | 第26-27页 |
| 2.2.7 序列分析 | 第27页 |
| 2.2.8 系统进化的分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 柞蚕幼虫RNA提取和RNA质量的检测 | 第27-28页 |
| 2.3.2 克隆产物的检测 | 第28-29页 |
| 2.3.3 柞蚕脂肪酶基因的序列分析 | 第29-33页 |
| 2.3.4 柞蚕脂肪酶基因Aplipase基因进化分析 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 柞蚕感染外源物后脂肪酶基因的表达谱分析 | 第35-44页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 病原物诱导后柞蚕各龄期及组织的cDNA制备 | 第35页 |
| 3.1.3 试验仪器设备 | 第35-36页 |
| 3.2 试验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 柞蚕不同发育时期和组织cDNA的制备 | 第36页 |
| 3.2.2 外源病原物对4龄3天柞蚕幼虫的诱导 | 第36-37页 |
| 3.2.3 柞蚕各龄期、组织以及柞蚕幼虫受不同病原物诱导后中肠组织的cDNA制备 | 第37页 |
| 3.2.4 半定量RT-PCR方法检测柞蚕脂肪酶基因Aplipase的表达谱分析 | 第37页 |
| 3.2.5 外源病原物诱导后柞蚕中肠Aplipase基因的实时定量PCR检测分析 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 柞蚕脂肪酶基因Aplipase组织表达谱分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 Real-time PCR引物特异性分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 外源病原物诱导后柞蚕中肠脂肪酶基因的Real-time PCR检测 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 柞蚕热休克蛋白基因HSP70克隆及序列分析 | 第44-52页 |
| 4.1 材料 | 第44页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第44页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
| 4.2 试验方法 | 第44-45页 |
| 4.2.1 柞蚕蛹总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第44页 |
| 4.2.3 柞蚕热休克蛋白HSP70基因的PCR扩增 | 第44-45页 |
| 4.2.4 PCR产物胶回收和连接转化 | 第45页 |
| 4.2.5 目的基因序列分析与蛋白质结构预测 | 第45页 |
| 4.2.6 系统进化分析 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-50页 |
| 4.3.1 柞蚕蛹总RNA的电泳检测 | 第45-46页 |
| 4.3.2 柞蚕热休克蛋白基因的序列分析 | 第46-48页 |
| 4.3.3 ApHSP70和ApHSC70蛋白的序列比对及系统进化分析 | 第48-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 热激处理后热休克蛋白基因的半定量和实时荧光定量检测 | 第52-57页 |
| 5.1 试验材料 | 第52页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第52页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第52页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第52页 |
| 5.2 试验方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 热激处理柞蚕蛹各组织的RNA提取 | 第52页 |
| 5.2.2 半定量RT-PCR方法检测热激条件下柞蚕蛹各组织中热休克蛋白基因HSP70表达变化 | 第52-53页 |
| 5.2.3 实时定量PCR检测热激处理后柞蚕蛹脂肪体组织中HSP70基因的表达量变化 | 第53-54页 |
| 5.3 结果分析 | 第54-55页 |
| 5.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第57-59页 |
| 6.1 讨论 | 第57-58页 |
| 6.2 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第66页 |
