| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·细胞色素P450及其在药物代谢研究中的作用 | 第12-16页 |
| ·CYP450命名与分布 | 第12-13页 |
| ·CYP450结构特征及催化机制 | 第13-15页 |
| ·CYP450的多样性 | 第15-16页 |
| ·CYP2C9基因多态性及其对药物代谢影响 | 第16-23页 |
| ·CYP2C9基因结构及上游调控区域 | 第16-17页 |
| ·CYP2C9基因多态性及其突变频率分布 | 第17-19页 |
| ·CYP2C9基因多态性与药物代谢的关系 | 第19-20页 |
| ·CYP2C9与药物相互作用 | 第20-21页 |
| ·CYP2C9基因多态性与个体化用药 | 第21-22页 |
| ·CYP2C9基因多态性分析 | 第22-23页 |
| ·药物代谢研究方法 | 第23-24页 |
| ·论文研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 CYP2C9*13基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 | 第26-43页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·培养基及常用溶液配制 | 第27-29页 |
| ·方法 | 第29-37页 |
| ·CYP2C9*13引物设计 | 第29-30页 |
| ·CYP2C9*13 cDNA的获得 | 第30-32页 |
| ·CYP2C9*13突变载体的构建 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌TOP10感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒在酵母系统中的表达及鉴定 | 第34-36页 |
| ·酵母微粒体的制备和检测 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·CYP2C9*13 cDNA的扩增 | 第37-38页 |
| ·CYP2C9*13重组质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·Western-Blotting分析目的蛋白表达 | 第40页 |
| ·微粒体蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
| ·CYP2C9酶的CO定量 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 CYP2C9基因多态性的体外酶促反应动力学分析和药物抑制试验 | 第43-57页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·酵母微粒体 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·主要溶液 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·CYP2C9野生型和突变体代谢双氯芬酸酶促反应动力学分析 | 第44-45页 |
| ·预测CYP2C9*3和CYP2C9*13代谢双氯芬酸的口服清除率 | 第45-46页 |
| ·药物抑制试验 | 第46-47页 |
| ·统计学分析 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-53页 |
| ·酶促反应条件的确定 | 第47-50页 |
| ·Diclofenac 4’-hydroxylation标准曲线的建立及回收率测定 | 第50页 |
| ·CYP2C9.1、CYP2C9.3和CYP2C9.13酶促反应动力学分析 | 第50-51页 |
| ·预测CYP2C9基因多态性对双氯芬酸口服清除率的影响 | 第51-52页 |
| ·CYP2C9基因多态性对药物药物相互作用的影响 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-57页 |
| ·CYP2C9.1、CYP2C9.3和CYP2C9.13酶促反应动力学分析 | 第54-55页 |
| ·预测CYP2C9基因多态性对双氯芬酸口服清除率的影响 | 第55页 |
| ·CYP2C9基因多态性对药物药物相互作用的影响 | 第55-57页 |
| 第四章 PCR-RFLP法进行CYP2C9*3基因分型 | 第57-65页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·实验对象 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57-58页 |
| ·仪器 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·DNA的提取 | 第58页 |
| ·CYP2C9基因扩增的引物设计 | 第58页 |
| ·CYP2C9基因扩增 | 第58-59页 |
| ·PCR扩增产物分析 | 第59-60页 |
| ·测序验证基因分型结果的可靠性 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-62页 |
| ·74名中国人CYP2C9*3基因型分析 | 第60-61页 |
| ·测序结果 | 第61-62页 |
| ·74名中国人CYP2C9*3等位基因频率 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·CYP2C9*3等位基因频率 | 第62-63页 |
| ·PCR反应条件的优化 | 第63页 |
| ·酶切反应条件的优化 | 第63页 |
| ·阴性和阳性对照实验 | 第63页 |
| ·基因突变检测方法的比较 | 第63-65页 |
| 全文小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 硕士学位期间主要成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
