摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-27页 |
1.1 凡纳滨对虾养殖及病原菌研究概述 | 第13-19页 |
1.1.1 凡纳滨对虾的养殖现状 | 第13页 |
1.1.2 弧菌研究概述 | 第13-19页 |
1.2 副溶血弧菌的研究进展 | 第19-25页 |
1.2.1 副溶血弧菌的流行情况 | 第19-20页 |
1.2.2 副溶血弧菌的毒力因子 | 第20-25页 |
1.3 选题的研究意义与目的 | 第25-27页 |
第二章 凡纳滨对虾源副溶血弧菌的分离鉴定及药敏试验 | 第27-50页 |
2.1 材料与试剂 | 第27-28页 |
2.1.1 病样来源 | 第27页 |
2.1.2 健康小白鼠来源 | 第27页 |
2.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
2.1.4 主要仪器 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-33页 |
2.2.1 细菌的分离 | 第28-29页 |
2.2.2 细菌的鉴定 | 第29-31页 |
2.2.3 嗜盐性试验 | 第31-32页 |
2.2.4 神奈川试验 | 第32页 |
2.2.5 细菌的药物敏感性试验 | 第32-33页 |
2.2.6 菌株对小鼠的致病性试验 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-39页 |
2.3.1 凡纳滨对虾源弧菌的分离 | 第33-34页 |
2.3.2 凡纳滨对虾源副溶血弧菌的API生化鉴定 | 第34页 |
2.3.3 凡纳滨对虾源副溶血弧菌的分子鉴定 | 第34-35页 |
2.3.4 67株副溶血弧菌的分布情况 | 第35-36页 |
2.3.5 嗜盐性试验以及神奈川试验 | 第36页 |
2.3.6 药物敏感性 | 第36-38页 |
2.3.7 菌株对小鼠的致病性 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-50页 |
2.4.1 关于副溶血弧菌的鉴定 | 第39-41页 |
2.4.2 关于副溶血弧菌的16S rRNA基因和遗传变异 | 第41-42页 |
2.4.3 关于副溶血弧菌的耐药特性 | 第42-43页 |
2.4.4 关于副溶血弧菌的致病性与检出率 | 第43-50页 |
第三章 凡纳滨对虾源副溶血弧菌tdh、trh和tlh 3种毒力基因的检测 | 第50-56页 |
3.1 材料与试剂 | 第50页 |
3.1.1 试验菌株 | 第50页 |
3.1.2 主要试剂 | 第50页 |
3.1.3 主要仪器 | 第50页 |
3.2 方法 | 第50-51页 |
3.2.1 细菌基因组DNA的抽提 | 第50页 |
3.2.2 PCR检测 | 第50页 |
3.2.3 PCR产物的凝胶电泳、回收纯化与测序 | 第50-51页 |
3.3 结果与分析 | 第51-53页 |
3.3.1 tdh基因的检测结果 | 第51页 |
3.3.2 trh基因的检测结果 | 第51-52页 |
3.3.3 tlh基因的检测结果 | 第52-53页 |
3.4 讨论 | 第53-56页 |
第四章 副溶血弧菌tlh毒力基因的克隆与表达 | 第56-68页 |
4.1 材料与试剂 | 第56-57页 |
4.1.1 试验菌株 | 第56页 |
4.1.2 主要试剂 | 第56页 |
4.1.3 主要溶液配制 | 第56-57页 |
4.1.4 主要仪器 | 第57页 |
4.2 方法 | 第57-61页 |
4.2.1 副溶血弧菌tlh基因的克隆 | 第57-58页 |
4.2.2 tlh表达载体的构建及鉴定 | 第58-59页 |
4.2.3 tlh基因表达产物SDS-PAGE电泳和Western bloting鉴定 | 第59-61页 |
4.3 结果与分析 | 第61-64页 |
4.3.1 tlh基因的克隆 | 第61-62页 |
4.3.2 tlh基因原核表达载体的构建和鉴定 | 第62-64页 |
4.4 讨论 | 第64-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第78页 |