摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-20页 |
1.1 水稻条纹病毒研究现状 | 第13-14页 |
1.1.1 水稻条纹叶枯病概况 | 第13页 |
1.1.2 水稻条纹病毒 | 第13-14页 |
1.1.3 RSV传毒介体灰飞虱 | 第14页 |
1.2 植物病毒与传毒昆虫介体的互作 | 第14-16页 |
1.2.1 植物病毒对介体或者非介体昆虫的影响 | 第14-15页 |
1.2.2 RSV对灰飞虱生长发育的影响 | 第15-16页 |
1.3 蛋白质组学分析技术 | 第16-18页 |
1.3.1 双向电泳 | 第16页 |
1.3.2 iTRAQ技术 | 第16-18页 |
1.4 昆虫卵子发生和胚胎发育 | 第18页 |
1.5 研究目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 iTRAQ技术解析RSV对灰飞虱卵生长发育的影响 | 第20-32页 |
2.1 材料和方法 | 第20-26页 |
2.1.1 试剂与仪器 | 第20-21页 |
2.1.2 试剂配方 | 第21页 |
2.1.3 灰飞虱的饲养 | 第21页 |
2.1.4 利用斑点杂交技术对卵带毒率进行检测 | 第21-22页 |
2.1.5 蛋白质提取和浓度测定 | 第22-23页 |
2.1.6 蛋白质消化 | 第23页 |
2.1.7 iTRAQ标记 | 第23页 |
2.1.8 高pH条件下的反相色谱分离 | 第23-24页 |
2.1.9 ABI-5600质谱进行蛋白质分析 | 第24-25页 |
2.1.10 差异蛋白质鉴定,定量和生物学分析 | 第25-26页 |
2.2 结果 | 第26-30页 |
2.2.1 利用斑点杂交检测有毒卵的带毒率 | 第26页 |
2.2.2 差异蛋白质的鉴定与定量 | 第26页 |
2.2.3 GO注释 | 第26-29页 |
2.2.4 KEGG通路分析 | 第29-30页 |
2.3 讨论 | 第30-32页 |
第三章 通过RT-qPCR从转录水平验证iTRAQ差异蛋白质 | 第32-39页 |
3.1 材料与方法 | 第32-35页 |
3.1.1 试剂与仪器 | 第32页 |
3.1.2 构建本地灰飞虱转录组数据库 | 第32页 |
3.1.3 差异蛋白质mRNA序列的获得 | 第32-33页 |
3.1.4 带毒卵和无毒卵总RNA的提取与检测 | 第33页 |
3.1.5 荧光定量引物特异性检验 | 第33-34页 |
3.1.6 单链cDNA的合成 | 第34-35页 |
3.1.7 RT-qPCR验证差异蛋白质转录 | 第35页 |
3.2 结果 | 第35-38页 |
3.2.1 目标蛋白质核酸序列的获得 | 第35-36页 |
3.2.2 有毒卵和无毒卵RNA完整性的检测 | 第36页 |
3.2.3 荧光定量引物特异性检验 | 第36-37页 |
3.2.4 通过RT-qPCR验证iTRAQ结果 | 第37-38页 |
3.3 讨论 | 第38-39页 |
第四章 RSV对灰飞虱生长发育相关基因转录水平的影响 | 第39-44页 |
4.1 材料与方法 | 第39页 |
4.1.1 试剂与仪器 | 第39页 |
4.1.2 灰飞虱生长发育相关基因mRNA序列的获得 | 第39页 |
4.1.3 带毒灰飞虱和无毒灰飞虱总RNA的提取与检测 | 第39页 |
4.1.4 荧光定量引物特异性检验 | 第39页 |
4.1.5 RT-qPCR检测生长发育基因转录水平 | 第39页 |
4.2 结果与分析 | 第39-42页 |
4.2.1 生长发育相关基因核酸序列的获得 | 第39-40页 |
4.2.2 带毒和无毒灰飞虱总RNA质量检测 | 第40页 |
4.2.3 荧光定量引物特异性检验 | 第40-42页 |
4.2.4 带毒与无毒灰飞虱生长发育基因表达量分析 | 第42页 |
4.3 讨论 | 第42-44页 |
第五章 全文总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |