| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第1章 前言 | 第9-11页 |
| 第2章 材料与方法 | 第11-31页 |
| 2.1 材料 | 第11页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第11页 |
| 2.2 主要实验试剂和耗材 | 第11-12页 |
| 2.3 配制实验试剂 | 第12-13页 |
| 2.4 主要的实验设备仪器 | 第13-14页 |
| 2.5 细胞的培养 | 第14-17页 |
| 2.5.1 细胞的传代 | 第14-15页 |
| 2.5.2 细胞冻存 | 第15-16页 |
| 2.5.3 细胞复苏 | 第16-17页 |
| 2.6 提取细胞的总RNA和聚合酶链反应（PCR） | 第17-20页 |
| 2.6.1 细胞总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.6.2 RNA逆转录为cDNA | 第18页 |
| 2.6.3 梯度PCR选取最适的退火温度 | 第18-19页 |
| 2.6.4 实时荧光定量PCR检测CHD1L和hMLH1的mRNA表达水平 | 第19-20页 |
| 2.7 蛋白提取和Western blot检测CHD1L和hMLH1蛋白的表达 | 第20-24页 |
| 2.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第20页 |
| 2.7.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第20-21页 |
| 2.7.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第21-22页 |
| 2.7.4 转膜 | 第22-23页 |
| 2.7.5 免疫反应 | 第23页 |
| 2.7.6 蛋白检测 | 第23-24页 |
| 2.8 在SMMC7721细胞中转染siRNA后检测CHD1L和hMLH1的mRNA和蛋白的表达水平 | 第24-27页 |
| 2.8.1 设计合成针对CHD1L基因特异性siRNA序列 | 第24页 |
| 2.8.2 细胞转染 | 第24-25页 |
| 2.8.3 最佳siCHD1L片段筛选 | 第25-26页 |
| 2.8.4 实时荧光定量PCR分析转染siRNA后细胞的CHD1L和hMLH1的mRNA表达水平的变化情况 | 第26页 |
| 2.8.5 Western blot分析转染siRNA后细胞的CHD1L和hMLH1的蛋白表达水平的变化情况 | 第26-27页 |
| 2.9 CCK8法检测CHD1L对肝癌细胞系SMMC7721增殖的影响 | 第27-28页 |
| 2.9.1 细胞分组与处理 | 第27页 |
| 2.9.2 CCK8法检测细胞增殖情况 | 第27-28页 |
| 2.10 凋亡实验检测CHD1L对肝癌细胞系SMMC7721凋亡的影响 | 第28-29页 |
| 2.10.1 细胞分组和处理 | 第28页 |
| 2.10.2 凋亡实验检测细胞的凋亡情况 | 第28-29页 |
| 2.11 Transwell迁移实验检测对肝癌细胞系SMMC7721迁移能力的影响 | 第29-30页 |
| 2.11.1 细胞分组和处理 | 第29页 |
| 2.11.2 Transwell迁移实验检测细胞的迁移能力 | 第29-30页 |
| 2.12 统计学分析 | 第30-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-37页 |
| 3.1 CHD1LsiRNA转染肝癌细胞系SMMC7721对CHD1L蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 下调肝癌细胞系SMMC7721中CHD1L的表达后hMLH1的mRNA和蛋白表达水平上调 | 第32-33页 |
| 3.3 下调肝癌细胞系SMMC7721中CHD1L的表达后，其增殖功能受到抑制 | 第33-34页 |
| 3.4 下调肝癌细胞系SMMC7721中CHD1L的表达后，其凋亡率升高 | 第34-35页 |
| 3.5 下调肝癌细胞系SMMC7721中CHD1L的表达后，其迁移能力降低 | 第35-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 CHD1L基因对肝癌细胞系SMMC7721增殖、迁移和凋亡的影响 | 第37-38页 |
| 4.2 CHD1L基因对肝癌细胞系SMMC7721中hMLH1基因表达的影响 | 第38-40页 |
| 第5章 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
| 综述 CHD1L、hMLH1在肝癌中的最新研究进展 | 第46-54页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
