| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-14页 |
| 第2章 CHAF1b在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 | 第14-19页 |
| 2.1 研究对象 | 第14页 |
| 2.2 主要仪器和试剂 | 第14-15页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第15页 |
| 2.3 实验步骤 | 第15页 |
| 2.4 设立对照 | 第15-16页 |
| 2.5 结果判定 | 第16页 |
| 2.6 统计学分析方法 | 第16页 |
| 2.7 结果 | 第16-18页 |
| 2.7.1 肝癌组、癌旁组、正常组中CHAF1b的表达 | 第16-17页 |
| 2.7.2 CHAF1b的表达与肝癌临床病理学特征的关系 | 第17-18页 |
| 2.8 结论 | 第18-19页 |
| 第3章 CHAF1b在人肝癌细胞株中的表达 | 第19-24页 |
| 3.1 实验材料 | 第19页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第19页 |
| 3.1.2 主要仪器与试剂 | 第19页 |
| 3.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第19-20页 |
| 3.2.2 实验步骤 | 第20-23页 |
| 3.3 统计学分析方法 | 第23页 |
| 3.4 结果 | 第23页 |
| 3.5 结论 | 第23-24页 |
| 第4章 CHAF1b基因RNA干扰慢病毒载体的构建与包装 | 第24-34页 |
| 4.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 4.1.1 慢病毒载体系统 | 第24页 |
| 4.1.2 细胞与菌株 | 第24页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第24-25页 |
| 4.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 4.2.1 CHAF1b基因RNA干扰慢病毒载体的制备 | 第25-29页 |
| 4.2.2 慢病毒包装 | 第29-31页 |
| 4.3 结果 | 第31-33页 |
| 4.3.1 载体酶切线性化 | 第31页 |
| 4.3.2 目的基因阳性克隆 | 第31-32页 |
| 4.3.3 阳性克隆测序结果分析 | 第32-33页 |
| 4.4 结论 | 第33-34页 |
| 第5章 重组慢病毒对人肝癌细胞株SMMC-7721的生物学影响 | 第34-44页 |
| 5.1 研究对象 | 第34页 |
| 5.2 主要仪器和试剂 | 第34-35页 |
| 5.2.1 主要仪器 | 第34页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 5.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 5.3.1 慢病毒感染目的细胞 | 第35-36页 |
| 5.3.2 Real-time PCR检测敲减效率 | 第36页 |
| 5.3.3 Cellomics细胞计数检测细胞生长 | 第36页 |
| 5.3.4 FACS细胞周期检测 | 第36-37页 |
| 5.3.5 Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第37页 |
| 5.3.6 细胞克隆形成检测 | 第37页 |
| 5.3.7 MTT法检测细胞增殖 | 第37-38页 |
| 5.4 统计学分析方法 | 第38页 |
| 5.5 结果 | 第38-42页 |
| 5.5.1 慢病毒转染效率检测 | 第38-39页 |
| 5.5.2 Real-time PCR检测敲减效率结果 | 第39-40页 |
| 5.5.3 Cellomics细胞计数检测细胞生长结果 | 第40页 |
| 5.5.4 FACS细胞周期检测结果 | 第40-41页 |
| 5.5.5 Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测细胞凋亡结果 | 第41页 |
| 5.5.6 细胞克隆形成检测结果 | 第41-42页 |
| 5.5.7 MTT法检测细胞增殖结果 | 第42页 |
| 5.6 结论 | 第42-44页 |
| 第6章 讨论 | 第44-47页 |
| 6.1 目的基因的选择 | 第44页 |
| 6.2 免疫组织化学技术和Real-time PCR | 第44-45页 |
| 6.3 RNA干扰技术与慢病毒载体 | 第45页 |
| 6.4 实验设计 | 第45页 |
| 6.5 实验结论 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 综述 | 第52-58页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
