| Abstract (English) | 第9-12页 |
| Abstract (Chinese) | 第13-16页 |
| Acknowledgement | 第16-25页 |
| 1 INTRODUCTION | 第25-35页 |
| 1.1 Gastric Cancer | 第26-35页 |
| 1.1.1 Background | 第26页 |
| 1.1.2 Histological types | 第26-27页 |
| 1.1.3 Pathogenesis | 第27-28页 |
| 1.1.4 Cancer Drug resistance | 第28-29页 |
| 1.1.5 Aurora Kinases | 第29-30页 |
| 1.1.6 ERK pathway in cancer | 第30页 |
| 1.1.7 NEDD41 in Malignancies | 第30-32页 |
| 1.1.8 Survivin | 第32-34页 |
| 1.1.9 Aims of this thesis | 第34-35页 |
| 2 MATERIALS AND METHODS | 第35-62页 |
| 2.1 MATERIALS | 第36-46页 |
| 2.1.1 Chemicals | 第36页 |
| 2.1.2 Molecular Biology Reagents | 第36页 |
| 2.1.3 Plasmids | 第36-37页 |
| 2.1.4 Protein Biochemktry Reagents | 第37页 |
| 2.1.5 Antibodies | 第37-38页 |
| 2.1.6 Primers | 第38-39页 |
| 2.1.7 Buffers | 第39-43页 |
| 2.1.8 Solutions | 第43-46页 |
| 2.2 METMODS | 第46-62页 |
| 2.2.1 Patients and Clinical Samples | 第46页 |
| 2.2.2 Cell Culture | 第46-47页 |
| 2.2.2.1 AGS cell line | 第46-47页 |
| 2.2.2.2 BGC823 cell line | 第47页 |
| 2.2.2.3 HEK293 cells | 第47页 |
| 2.2.3 Freezing and Thawing Cell Lines | 第47-48页 |
| 2.2.4 Mycoplasma Analysis | 第48页 |
| 2.2.5 Cells Harvesting | 第48-49页 |
| 2.2.6 Western Blot Analysis | 第49页 |
| 2.2.7 Immunohistochemistry | 第49-50页 |
| 2.2.8 Immunofluorescence | 第50页 |
| 2.2.9 Small inthrfering RNA Transfection | 第50-51页 |
| 2.2.10 Lentiviral Production | 第51页 |
| 2.2.11 Generation of Stable Cell lines | 第51页 |
| 2.2.12 Tunnel Assay | 第51-52页 |
| 2.2.13 Cell Survival (MTT) Assay | 第52页 |
| 2.2.14 Evaluation of Drug Interactions | 第52页 |
| 2.2.15 Survivin Ubiquitylation and Sumoylation assay | 第52页 |
| 2.2.16 RNA immunoprecipitation | 第52-53页 |
| 2.2.17 Reverse Transcription Polymerase Chain reaction | 第53页 |
| 2.2.18 Plasmid DNA Constructs | 第53-57页 |
| 2.2.18.1 pCDH-AurA | 第53-54页 |
| 2.2.18.2 pcDNAV-AurA-HA | 第54页 |
| 2.2.18.3 pcDNAV-CPEBl-myc | 第54-55页 |
| 2.2.18.4 pLVX-Survivin-IRES-DsRed | 第55-56页 |
| 2.2.18.5 pCDH-Survivin-IRES-DsRed-Puro-GFP | 第56页 |
| 2.2.18.6 pLKO-shAurA | 第56-57页 |
| 2.2.19 Transformation of competent E. coli cells | 第57页 |
| 2.2.20 Purification of plasmid DNA from E.coli | 第57-58页 |
| 2.2.20.1 Small-scale Purification | 第57页 |
| 2.2.20.2 Large-scale Purification | 第57-58页 |
| 2.2.21 Purification of DNA from Agarose Gel | 第58页 |
| 2.2.22 Determination of DNA Quantity | 第58页 |
| 2.2.23 DNA Sequencing | 第58页 |
| 2.2.24 Co-immunopreciphation | 第58-59页 |
| 2.2.25 Cell cycle analysis | 第59页 |
| 2.2.26 Dual Luciferase Assay | 第59-60页 |
| 2.2.27 In-gel Tryptic Digestion | 第60-61页 |
| 2.2.28 Statistical Analysis | 第61-62页 |
| 3 RESULTS | 第62-97页 |
| 3.1 The Role of AurA inthe Clinical Prognosis of Gastric Cancer | 第63-67页 |
| 3.2 AurA and Gastric Cancer Drug Resistance | 第67-69页 |
| 3.3 The Role of Aura in the DNA Damage and Gastric Cancer Drug Resistaiue | 第69-73页 |
| 3.4 The Role of AurA in the Upwgulation of Survivin in Gastric Cancer cells | 第73-76页 |
| 3.5 The Role of AurA in Survivin Posttranslational Modificationand Drug Resistance | 第76-78页 |
| 3.6 Effect of AurA and Survivin Ectopic Expression on Colonogenicity | 第78-79页 |
| 3.7 Drug-Drug Irrteraction Studies: VX-680 and Doxorubicin | 第79-80页 |
| 3.8 Mechanistic Studies of AurA Mediated Survivin Upregulation | 第80-81页 |
| 3.9 Effect of Cell cycle Modulation on AurA and Survivin co-expression | 第81-83页 |
| 3.10 AurA and Survivin Transcriptional Regulation | 第83-85页 |
| 3.11 Post-tnnscriptional Control: AurA and Survivin mRNA Stability | 第85-87页 |
| 3.12 Transiational Control: AurA, mTOR and Survivin | 第87-88页 |
| 3.13 Post-tnnslational Control | 第88页 |
| 3.14 AurA and Survivin K129 acetylation | 第88-90页 |
| 3.15 AurA and Survivin Proteosomal Degradation | 第90-92页 |
| 3.16 AurA, NEDD4L and Survivin Ubiquitination | 第92-94页 |
| 3.17 AurA relays survivin stabilization signals through phospho ERK1/2 | 第94-96页 |
| 3.18 The proposed mechanism for AurA mediated survivin protein stabUization | 第96-97页 |
| 4 DISCUSSION | 第97-105页 |
| 5 REFERENCES | 第105-115页 |
| 6 APPENDEX Publications | 第115-117页 |
