| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第14-46页 |
| 第一章 睾丸发育与精子发生 | 第14-19页 |
| 1.1 睾丸组织的结构及功能 | 第14-15页 |
| 1.2 雄性动物生殖细胞的早期发育 | 第15-16页 |
| 1.3 精子发生和上皮发生周期 | 第16-19页 |
| 第二章 精原干细胞及精原干细胞移植 | 第19-25页 |
| 2.1 精原干细胞 | 第19-20页 |
| 2.2 精原干细胞的分离纯化和分子标记 | 第20-21页 |
| 2.2.1 精原干细胞的分离 | 第20页 |
| 2.2.2 精原干细胞的纯化 | 第20-21页 |
| 2.2.3 精原干细胞的分子标记 | 第21页 |
| 2.3 精原干细胞的培养及关键信号通路 | 第21-22页 |
| 2.4 精原干细胞移植 | 第22-25页 |
| 2.4.1 精原干细胞移植技术 | 第22-23页 |
| 2.4.2 精原干细胞移植受体的制备 | 第23-25页 |
| 第三章 转基因动物制作的研究进展 | 第25-37页 |
| 3.1 转基因动物研究的简介 | 第25页 |
| 3.2 转基因动物的制作方法 | 第25-27页 |
| 3.2.1 原核显微注射法 | 第25-26页 |
| 3.2.2 胚胎干细胞介导技术法 | 第26页 |
| 3.2.3 逆转录病毒感染技术法 | 第26页 |
| 3.2.4 体细胞核移植法 | 第26页 |
| 3.2.5 精子载体法 | 第26-27页 |
| 3.2.6 基因打靶法 | 第27页 |
| 3.3 转基因技术的载体 | 第27-29页 |
| 3.3.1 非病毒载体 | 第27-28页 |
| 3.3.2 病毒载体 | 第28-29页 |
| 3.4 慢病毒制作转基因动物的研究 | 第29-37页 |
| 3.4.1 慢病毒制作转基因动物的研究概况 | 第29-30页 |
| 3.4.2 慢病毒启动子在转基因动物制作的选择 | 第30-32页 |
| 3.4.3 慢病毒载体介导的持续干扰的转基因动物制作 | 第32页 |
| 3.4.4 慢病毒介导的精子或精原干细胞修饰的转基因制作 | 第32-34页 |
| 3.4.5 使用慢病毒载体转基因仍需考虑的问题 | 第34-37页 |
| 第四章 睾丸组织块移植介导的种质资源保存 | 第37-46页 |
| 4.1 睾丸组织移植概况 | 第37-41页 |
| 4.1.1 自体或同种睾丸组织块移植 | 第38页 |
| 4.1.2 异种睾丸移植种属对精子发生的影响 | 第38-39页 |
| 4.1.3 异种移植供体年龄的选择 | 第39-40页 |
| 4.1.4 异种移植中移植受体及移植部位的选择 | 第40-41页 |
| 4.1.5 异种移植中睾丸移植块的冷冻处理 | 第41页 |
| 4.2 睾丸组织块移植介导的珍稀动物保护 | 第41-42页 |
| 4.3 灵长类睾丸移植研究现状 | 第42-46页 |
| 实验部分 | 第46-120页 |
| 第五章 腺嘌呤诱导的大鼠精原干细胞移植受体模型的建立 | 第46-80页 |
| 5.1 前言 | 第46-47页 |
| 5.2 材料与方法 | 第47-64页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第47页 |
| 5.2.2 实验用载体、细胞及感受态 | 第47页 |
| 5.2.3 主要试剂及试剂配制 | 第47-52页 |
| 5.2.4 仪器设备 | 第52页 |
| 5.2.5 关键试验流程 | 第52-64页 |
| 5.2.6 实验设计 | 第64页 |
| 5.3 结果 | 第64-77页 |
| 5.3.1 腺嘌呤和白消安处理后大鼠生理及睾丸形态学观察 | 第64-68页 |
| 5.3.2 慢病毒包装及滴度测定 | 第68-69页 |
| 5.3.3 睾丸单细胞悬液的获得 | 第69-70页 |
| 5.3.4 高纯度精原干细胞获得及鉴定 | 第70页 |
| 5.3.5 小鼠精原干细胞的体外修饰 | 第70-71页 |
| 5.3.6 异种移植及异源精子发生监测 | 第71-73页 |
| 5.3.7 腺嘌呤诱导的生殖细胞凋亡 | 第73-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-79页 |
| 5.5 小结 | 第79-80页 |
| 第六章 利用慢病毒体内转染精原干细胞制作转基因小鼠的研究 | 第80-106页 |
| 6.1 前言 | 第80页 |
| 6.2 材料与方法 | 第80-92页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第80-81页 |
| 6.2.2 实验载体 | 第81页 |
| 6.2.3 主要试剂及试剂配制 | 第81页 |
| 6.2.4 仪器设备 | 第81页 |
| 6.2.5 关键试验流程 | 第81-92页 |
| 6.3 结果 | 第92-101页 |
| 6.3.1 生物活性的慢病毒载体包装及滴度测定 | 第92-93页 |
| 6.3.2 受体年龄和注射部位不影响慢病毒载体制作转基因动物效率 | 第93-95页 |
| 6.3.3 强启动子慢病毒载体可提高精原干细胞制作转基因动物效率 | 第95-97页 |
| 6.3.4 外源转基因片段整合位置检测 | 第97-98页 |
| 6.3.5 转基因小鼠整合慢病毒GFP拷贝数分析 | 第98-99页 |
| 6.3.6 不同慢病毒介导的精原干细胞制作转基因动物差异分析 | 第99-101页 |
| 6.4 讨论 | 第101-105页 |
| 6.5 小结 | 第105-106页 |
| 第七章 异源睾丸组织块移植介导的种质资源保存的研究 | 第106-120页 |
| 7.1 前言 | 第106页 |
| 7.2 材料与方法 | 第106-108页 |
| 7.2.1 实验动物 | 第106页 |
| 7.2.2 主要试剂及试剂配制 | 第106-107页 |
| 7.2.3 仪器设备 | 第107页 |
| 7.2.4 关键试验流程 | 第107-108页 |
| 7.3 结果 | 第108-117页 |
| 7.3.1 移植睾丸组织块到免疫正常小鼠作体内的精子发生 | 第108-111页 |
| 7.3.2 免疫抑制剂处理受体动物可提高睾丸组织移植的效率 | 第111-113页 |
| 7.3.3 免疫组化鉴定移植组织块重建的情况 | 第113-117页 |
| 7.4 讨论 | 第117-118页 |
| 7.5 小结 | 第118-120页 |
| 结论 | 第120-121页 |
| 创新点 | 第121-122页 |
| 下一步研究工作 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 作者简介 | 第141-142页 |
