摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
中英文对照缩略表 | 第15-16页 |
引言 | 第16-18页 |
第一部分 脂多糖对HepG2、SMMC7721增殖、侵袭转移的影响 | 第18-43页 |
1 前言 | 第18-19页 |
2 实验材料 | 第19-22页 |
2.1 细胞系来源 | 第19页 |
2.2 主要试剂 | 第19页 |
2.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.4 常用试剂配制 | 第20-22页 |
3 实验方法 | 第22-30页 |
3.1 人肝癌细胞HepG2、SMMC7721的培养 | 第22-24页 |
3.1.1 HepG2、SMMC7721细胞复苏 | 第22页 |
3.1.2 细胞换液 | 第22-23页 |
3.1.3 细胞传代 | 第23页 |
3.1.4 细胞的冻存 | 第23-24页 |
3.1.5 形态的观察和生长曲线的测定 | 第24页 |
3.2 MTT法分别检测两株细胞的增殖情况 | 第24-25页 |
3.2.1 MTT法实验分组 | 第24页 |
3.2.2 MTT法检测LPS对HepG2、SMMC7721细胞生长作用实验步骤 | 第24-25页 |
3.3 划痕法分别检测LPS对HepG2细胞和SMMC7721细胞迁移的影响 | 第25-26页 |
3.3.1 实验分组 | 第25页 |
3.3.2 实验步骤 | 第25-26页 |
3.4 Transwell小室检测LPS对HepG2细胞、SMMC7721细胞侵袭作用的影响 | 第26页 |
3.4.1 实验分组 | 第26页 |
3.4.2 实验步骤 | 第26页 |
3.5 实时荧光定量PCR检测不同浓度LPS对HepG2、SMMC7721细胞mRNA的影响 | 第26-29页 |
3.5.1 qPCR实验分组 | 第26-27页 |
3.5.2 总RNA的提取及检测 | 第27页 |
3.5.3 逆转录合成cDNA第一链 | 第27-28页 |
3.5.4 qPCR法定量PPAR-γ、P21、Bcl-2、TGF-β mRNA表达水平 | 第28-29页 |
3.6 统计分析方法 | 第29-30页 |
4 实验结果 | 第30-40页 |
4.1 HepG2、SMMC7721的培养 | 第30-31页 |
4.1.1 形态学观察 | 第30页 |
4.1.2 生长曲线描记 | 第30-31页 |
4.2 MTT分别检测LPS对HepG2、SMMC7721细胞增殖活力的影响 | 第31-32页 |
4.3 LPS干预HepG2、SMMC7721细胞后划痕实验的结果 | 第32-34页 |
4.4 Transwell小室检测LPS对两种肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第34-36页 |
4.5 qPCR检测LPS对HepG2、SMMC7721 mRNA水平的影响 | 第36-40页 |
4.5.1 RNA的纯度检测 | 第36页 |
4.5.2 LPS干预两种细胞 48h后各mRNA相对表达量的变化 | 第36-40页 |
5 讨论 | 第40-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
第二部分 白藜芦醇抑制脂多糖诱导的肝癌细胞SMMC7721增殖、侵袭转移研究 | 第43-56页 |
1 前言 | 第43-44页 |
2 实验材料 | 第44-45页 |
2.1 细胞系来源 | 第44页 |
2.2 主要试剂 | 第44页 |
2.3 主要仪器设备 | 第44页 |
2.4 常用试剂配制 | 第44-45页 |
3 实验方法 | 第45-47页 |
3.1 MTT法检测白藜芦醇对脂多糖诱导的SMMC7721增殖的影响 | 第45页 |
3.1.1 MTT法实验分组 | 第45页 |
3.1.2 MTT法检测SMMC7721细胞生长作用实验方法 | 第45页 |
3.2 划痕法检测白藜芦醇对脂多糖诱导的SMMC7721细胞迁移的影响 | 第45页 |
3.2.1 实验分组 | 第45页 |
3.2.2 实验步骤 | 第45页 |
3.3 Transwell小室检测不同浓度白藜芦醇对脂多糖诱导的SMMC7721的细胞侵袭作用的影响 | 第45-46页 |
3.3.1 实验分组 | 第45-46页 |
3.3.2 实验步骤及方法 | 第46页 |
3.4 RT-qPCR检测白藜芦醇对脂多糖诱导的SMMC7721细胞4种mRNA表达水平的影响 | 第46-47页 |
3.4.1 qPCR实验分组 | 第46页 |
3.4.2 qPCR实验方法及步骤 | 第46-47页 |
4 实验结果 | 第47-53页 |
5 讨论 | 第53-55页 |
6 小结 | 第55-56页 |
全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 | 第62-78页 |
参考文献 | 第73-78页 |
个人简历 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |