| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 植物的抗病机制 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物固有免疫系统 | 第11页 |
| 1.1.2 水杨酸、茉莉酸和乙烯介导的防御反应 | 第11-12页 |
| 1.1.3 病原菌防御信号的交叉途径 | 第12-13页 |
| 1.2 WRKY转录因子及其在植物抗病反应中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3 病毒诱导的基因沉默对WRKY转录因子抗病功能的影响 | 第14-15页 |
| 1.4 番茄WRKY转录因子的研究现状 | 第15页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第15-17页 |
| 2 SpWRKY6基因的生物信息学及表达模式分析 | 第17-28页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂及仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第18页 |
| 2.2.2 表达模式分析 | 第18-20页 |
| 2.2.3 数据统计分析 | 第20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-26页 |
| 2.3.1 编码蛋白的特性分析 | 第20页 |
| 2.3.2 与其他物种的多重序列比对及系统进化树分析 | 第20-22页 |
| 2.3.3 启动子分析 | 第22页 |
| 2.3.4 表达特性分析 | 第22-23页 |
| 2.3.5 目的基因与内参基因的溶解曲线及标准曲线 | 第23-24页 |
| 2.3.6 在番茄不同组织中的表达分析 | 第24页 |
| 2.3.7 在生物胁迫下的表达模式 | 第24-25页 |
| 2.3.8 在非生物胁迫下的表达模式 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 2.5 小结 | 第27-28页 |
| 3 SpWRKY6转录因子在番茄与致病疫霉互作过程中的功能分析 | 第28-56页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂及仪器 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 3.2.1 沉默载体pTRV2-SpWRKY6的构建 | 第29-33页 |
| 3.2.2 沉默载体对农杆菌的转化 | 第33-34页 |
| 3.2.3 农杆菌侵染液的制备及侵染 | 第34-35页 |
| 3.2.4 病毒诱导的SpWRKY6基因沉默效率的检测 | 第35页 |
| 3.2.5 沉默植株的抗病性分析 | 第35页 |
| 3.2.6 病程相关基因的表达分析 | 第35-36页 |
| 3.2.7 过表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.8 过表达载体对农杆菌的转化 | 第37页 |
| 3.2.9 农杆菌介导的番茄转化 | 第37-38页 |
| 3.2.10 转基因番茄植株的分子检测 | 第38-39页 |
| 3.2.11 转基因番茄植株的抗病性鉴定 | 第39页 |
| 3.2.12 组织化学染色 | 第39-40页 |
| 3.2.13 转基因番茄植株生理指标的测定 | 第40-42页 |
| 3.2.14 转基因番茄植株防卫相关基因的表达分析 | 第42页 |
| 3.2.15 数据统计分析 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-53页 |
| 3.3.1 SpWRKY6基因在沉默植株中表达量的检测 | 第42-45页 |
| 3.3.2 沉默SpWRKY6基因的番茄植株减弱对致病疫霉的抗性 | 第45-46页 |
| 3.3.3 沉默SpWRKY6基因的番茄植株影响病程相关基因的表达 | 第46页 |
| 3.3.4 转基因番茄植株的鉴定 | 第46-50页 |
| 3.3.5 转基因番茄植株增强对致病疫霉的抗性 | 第50-51页 |
| 3.3.6 病原菌侵染对番茄生理指标的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.7 番茄中过表达SpWRKY6基因影响防卫相关基因的表达 | 第53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 4 SpWRKY6基因在烟草中的异源表达及抗病性分析 | 第56-62页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.2 实验试剂及仪器 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 工程菌对烟草的转化 | 第56-57页 |
| 4.2.2 转基因烟草植株的分子检测 | 第57页 |
| 4.2.3 转基因烟草植株的抗病性鉴定 | 第57-58页 |
| 4.2.4 叶片台盼蓝染色分析 | 第58页 |
| 4.2.5 数据统计分析 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-61页 |
| 4.3.1 转基因烟草植株的鉴定 | 第59-60页 |
| 4.3.2 异源表达SpWRKY6基因的烟草植株增强对烟草疫霉的抗性 | 第60-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61页 |
| 4.5 小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录A 本论文所用培养基配方 | 第70-71页 |
| 附录B 本论文所用载体图谱 | 第71-72页 |
| 附录C 本论文所用DNA Marker | 第72-73页 |
| 附录D SpWRKY6基因序列 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
