| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-41页 |
| 1.1 脂肪酶概述 | 第14页 |
| 1.2 真菌脂肪酶 | 第14-15页 |
| 1.2.1 产真菌脂肪酶微生物 | 第14页 |
| 1.2.2 产脂肪酶真菌的分离与筛选 | 第14-15页 |
| 1.3 脂肪酶和酯酶的比较 | 第15-20页 |
| 1.3.1 脂肪酶和酯酶的催化类型 | 第16-17页 |
| 1.3.2 脂肪酶与酯酶的酶学特性 | 第17-20页 |
| 1.4 脂肪酶在不同行业中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 脂肪酶在手性技术中的应用 | 第21-22页 |
| 1.6 超临界流体中的酶催化 | 第22-25页 |
| 1.6.1 超临界流体及其性质 | 第22页 |
| 1.6.2 SC-CO_2酶的催化活性 | 第22-23页 |
| 1.6.3 SC-CO_2在酶催化反应中的应用 | 第23页 |
| 1.6.4 脂肪酶在超临界二氧化碳与传统有机溶剂介质催化比较 | 第23页 |
| 1.6.5 SC-CO_2作为非水相溶剂的优缺点 | 第23-24页 |
| 1.6.6 酶催化中水分子作用 | 第24-25页 |
| 1.6.7 pH状态 | 第25页 |
| 1.6.8 压力对光学选择性的影响 | 第25页 |
| 1.7 离子液中的脂肪酶催化 | 第25-29页 |
| 1.7.1 离子液的特征 | 第26-27页 |
| 1.7.2 离子液中脂肪特性变化 | 第27-28页 |
| 1.7.2.1 活性 | 第27-28页 |
| 1.7.2.2 稳定性 | 第28页 |
| 1.7.3 离子液体中脂肪酶催化的酯交换反应 | 第28-29页 |
| 1.8 α-苯乙醇手性药物拆分 | 第29-39页 |
| 1.8.1 手性药物研究概述 | 第29-31页 |
| 1.8.2 1-苯乙醇的性质 | 第31页 |
| 1.8.3 1-苯乙醇等手性药物的生产方法 | 第31-35页 |
| 1.8.3.1 从天然产物中提取手性药物 | 第31页 |
| 1.8.3.2 不对称催化合成手性药物 | 第31-32页 |
| 1.8.3.3 外消旋体的拆分 | 第32-35页 |
| 1.8.4 1-苯乙醇的手性拆分 | 第35-39页 |
| 1.8.4.1 化学法 | 第35-37页 |
| 1.8.4.2 生物拆分法 | 第37-39页 |
| 1.9 论文的研究思路及主要内容 | 第39-41页 |
| 第二章 产脂肪酶微生物的筛选与初步鉴定 | 第41-53页 |
| 2.1 引言 | 第41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-46页 |
| 2.2.1 土样采集 | 第41-42页 |
| 2.2.2 主要试剂与仪器 | 第42-43页 |
| 2.2.3 培养基 | 第43页 |
| 2.2.4 富集培养 | 第43页 |
| 2.2.5 初筛培养 | 第43-44页 |
| 2.2.6 复筛培养 | 第44页 |
| 2.2.7 菌种鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2.8 脂肪酶活性测定 | 第45-46页 |
| 2.2.9 脂肪酶酯交换反应及拆分效果检测 | 第46页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第46-51页 |
| 2.3.1 筛选模型的优化 | 第46-48页 |
| 2.3.2 筛选结果 | 第48-49页 |
| 2.3.3 脂肪酶在菌体中的分布 | 第49-50页 |
| 2.3.4 冻干脂肪酶 | 第50页 |
| 2.3.5 菌种鉴定 | 第50-51页 |
| 2.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 第三章 产脂肪酶微生物的发酵初步优化 | 第53-64页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 材料与方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 菌种 | 第53-54页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第54页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 3.2.4 培养基 | 第54-55页 |
| 3.2.5 菌种活化和种子培养 | 第55页 |
| 3.2.6 响应面优化 | 第55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-63页 |
| 3.3.1 最适C源的筛选 | 第55-56页 |
| 3.3.2 最适N源的筛选 | 第56-57页 |
| 3.3.3 Plackeet-Burman实验 | 第57-59页 |
| 3.3.4 最陡爬坡试验 | 第59页 |
| 3.3.5 响应面分析试验设计 | 第59-63页 |
| 3.3.6 验证试验 | 第63页 |
| 3.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 脂肪酶的纯化及动力学参数测定 | 第64-76页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 材料和方法 | 第64-71页 |
| 4.2.1 材料 | 第64-65页 |
| 4.2.1.1 主要试剂 | 第64-65页 |
| 4.2.1.2 主要仪器 | 第65页 |
| 4.2.2 方法 | 第65-71页 |
| 4.2.2.1 发酵液预处理 | 第65页 |
| 4.2.2.2 盐析 | 第65-66页 |
| 4.2.2.3 透析 | 第66页 |
| 4.2.2.4 浓缩粗酶液 | 第66页 |
| 4.2.2.5 n-己烷萃取 | 第66页 |
| 4.2.2.6 DEAE-Sepharose离子交换层析 | 第66-67页 |
| 4.2.2.7 透析 | 第67-68页 |
| 4.2.2.8 冷冻干燥 | 第68页 |
| 4.2.2.9 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第68-69页 |
| 4.2.2.10 米氏常数的测定 | 第69页 |
| 4.2.2.11 酶活测定 | 第69-70页 |
| 4.2.2.12 蛋白质浓度的测定 | 第70-71页 |
| 4.2.2.13 对硝基苯酚标准曲线 | 第71页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第71-75页 |
| 4.3.1 (NH_4)_2SO_4盐析 | 第71-72页 |
| 4.3.2 DEAE-Sepharose阴离子交换层析 | 第72-73页 |
| 4.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第73-74页 |
| 4.3.4 纯化结果汇总 | 第74页 |
| 4.3.5 米氏常数的测定 | 第74-75页 |
| 4.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第五章 脂肪酶催化转酯拆分1-苯乙醇 | 第76-91页 |
| 5.1 引言 | 第76页 |
| 5.2 材料和方法 | 第76-82页 |
| 5.2.1 主要化学试剂与实验仪器 | 第76-78页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.2.2.1 脂肪酶酶活的测定 | 第78页 |
| 5.2.2.2 脂肪酶酯交换拆分1-苯乙醇 | 第78-79页 |
| 5.2.3 分析方法 | 第79页 |
| 5.2.4 计算公式 | 第79-80页 |
| 5.2.5 有机溶剂对反应的影响 | 第80页 |
| 5.2.6 脂肪酶酶量对反应的影响 | 第80-81页 |
| 5.2.7 水活度对反应的影响 | 第81页 |
| 5.2.8 温度对反应的影响 | 第81页 |
| 5.2.9 底物浓度对反应的影响 | 第81-82页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第82-89页 |
| 5.3.1 脂肪酶的筛选 | 第82-83页 |
| 5.3.1.1 脂肪酶酶活的测定 | 第82页 |
| 5.3.1.2 脂肪酶拆分1-苯乙醇的效果 | 第82-83页 |
| 5.3.2 不同溶剂对反应的影响 | 第83-84页 |
| 5.3.3 脂肪酶酶量对反应的影响 | 第84-85页 |
| 5.3.4 反应体系水活度对反应的影响 | 第85-86页 |
| 5.3.5 温度对反应的影响 | 第86-87页 |
| 5.3.6 底物浓度对反应的影响 | 第87-89页 |
| 5.3.7 优化后的脂肪酶拆分结果 | 第89页 |
| 5.4 本章小结 | 第89-91页 |
| 第六章 超临界CO_2中脂肪酶催化水解拆分1-苯乙醇 | 第91-104页 |
| 6.1 引言 | 第91-92页 |
| 6.2 材料与方法 | 第92-97页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第92-93页 |
| 6.2.2 实验设备 | 第93页 |
| 6.2.3 乙酸苯乙酯的合成 | 第93-94页 |
| 6.2.4 脂肪酶酶活测定 | 第94页 |
| 6.2.5 气相检测条件及计算公式 | 第94页 |
| 6.2.6 常压摇床条件下的工艺路线考察 | 第94-95页 |
| 6.2.7 超临界CO_2条件下的工艺路线考察 | 第95-97页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第97-103页 |
| 6.3.1 常压下脂肪酶加量 | 第97页 |
| 6.3.2 常压下最适底物浓度 | 第97-98页 |
| 6.3.3 常压下不同有机溶剂体系对拆分的影响 | 第98页 |
| 6.3.4 不同浓度tert-丁醇溶剂对拆分的影响 | 第98-99页 |
| 6.3.5 浓度40%的不同有机溶剂磷酸缓冲液体系对拆分的影响 | 第99页 |
| 6.3.6 最适反应时间 | 第99-100页 |
| 6.3.7 最适反应体系中不同酶的水解拆分比较 | 第100页 |
| 6.3.8 超临界CO_2中不同酶水解拆分比较 | 第100-101页 |
| 6.3.9 超临界CO_2中最适底物浓度 | 第101-102页 |
| 6.3.10 超临界CO_2中最适温度 | 第102页 |
| 6.3.11 超临界CO_2中最适压力 | 第102-103页 |
| 6.3.12 超临界CO_2中最适反应时间 | 第103页 |
| 6.4 本章小结 | 第103-104页 |
| 第七章 总结与展望 | 第104-106页 |
| 7.1 结论与创新点 | 第104-105页 |
| 7.1.1 结论 | 第104-105页 |
| 7.1.2 创新点 | 第105页 |
| 7.2 展望 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-118页 |
| 博士期间发表的文章 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
