本论文创新点 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10页 |
第一章 绪论 | 第11-58页 |
第一节 异源三聚体G蛋白信号通路 | 第11-25页 |
一. 异源三聚体G蛋白信号传导的基本组成及原理 | 第11-13页 |
二. G蛋白偶联受体(GPCRs) | 第13-14页 |
三. G蛋白信号通路 | 第14-21页 |
四. G蛋白循环调节因子 | 第21-25页 |
第二节 细胞迁移 | 第25-46页 |
一. 细胞迁移的基本过程 | 第25-37页 |
二. 细胞迁移中的膜结构及其调控 | 第37-42页 |
三. Rho家族小G蛋白及其在细胞迁移中的作用 | 第42-46页 |
第三节 受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinases,RTK) | 第46-48页 |
第四节 Ric-8蛋白的功能 | 第48-50页 |
第五节 蛋白激酶C与细胞迁移 | 第50-53页 |
第六节 SOS蛋白与细胞迁移 | 第53-56页 |
第七节 Abl蛋白在肌动蛋白骨架重组中的作用 | 第56-58页 |
第二章 aPKCλ在生长因子刺激下Dorsal Ruffle turnover和细胞迁移中的作用 | 第58-78页 |
第一节 选题背景 | 第58-59页 |
第二节 实验材料 | 第59-61页 |
一. 细胞系和菌株 | 第59页 |
二. 细胞培养材料 | 第59页 |
三. 实验试剂 | 第59-60页 |
四. 质粒 | 第60页 |
五. 实验仪器 | 第60-61页 |
第三节 实验方法 | 第61-64页 |
一. RNA干扰 | 第61页 |
二. 细胞划痕愈伤实验 | 第61-62页 |
三. Boyden小室细胞迁移实验 | 第62页 |
四. 免疫荧光实验 | 第62页 |
五. 蛋白纯化 | 第62-63页 |
六. ELISA实验 | 第63页 |
七. 显微注射 | 第63页 |
八. 延时摄影荧光显微镜 | 第63-64页 |
九. 统计学分析 | 第64页 |
第四节 实验结果 | 第64-75页 |
一. aPKCλ参与生长因子PDGF-BB诱导的dorsal ruffle turnover | 第64-68页 |
二. aPKCλ是PDGF-BB诱导的细胞迁移所必需的 | 第68-70页 |
三. aPKCλ参与Ric-8A的磷酸化修饰 | 第70-72页 |
四. Ric-8A突变体对dorsal ruffle turnover的影响 | 第72-74页 |
五. Ric-8A的磷酸化修饰影响其在细胞内的定位 | 第74-75页 |
第五节 结论与讨论 | 第75-78页 |
第三章 Ga13与SOS1蛋白相互作用调节细胞迁移和器官再生 | 第78-92页 |
第一节 选题背景 | 第78-79页 |
第二节 实验材料 | 第79-80页 |
一. 细胞系和菌株 | 第79页 |
二. 细胞培养材料 | 第79页 |
三. 实验试剂 | 第79页 |
四. 质粒 | 第79-80页 |
五. 实验仪器 | 第80页 |
第三节 实验方法 | 第80-83页 |
一. 细胞划痕愈伤实验 | 第80页 |
二. 免疫荧光实验 | 第80-81页 |
三. 蛋白纯化 | 第81页 |
四. 显微注射 | 第81页 |
五. 延时摄影荧光显微镜 | 第81-82页 |
六. 肝脏免疫荧光 | 第82页 |
七. 核苷酸交换实验 | 第82页 |
八. ERK MAPK实验 | 第82页 |
九. 统计学分析 | 第82-83页 |
第三节 实验结果 | 第83-90页 |
一. SOS1与Gα_(13)蛋白直接相互作用 | 第83-84页 |
二. Gα_(13)和SOS1在生长因子PDGF-BB刺激条件下对dorsal ruffle turnover的影响 | 第84-85页 |
三. 敲除Gα_(13)或SOS1都可以抑制PDGF-BB诱导的细胞迁移 | 第85-86页 |
四. Ga13结合在SOS1蛋白的DH结构域 | 第86-87页 |
五. 内皮细胞中Gα13的缺失使成熟动物肝脏再生能力下降 | 第87-88页 |
六. 内皮细胞中Ga13的缺失抑制ERK1/2的磷酸化和激活 | 第88-89页 |
七. Gα13通过SOS1调控ERK活性及内皮细胞增殖 | 第89-90页 |
第四节 结论与讨论 | 第90-92页 |
第四章 Ga13与Abl相互作用及其功能初探 | 第92-105页 |
第一节 实验材料 | 第92-93页 |
一. 细胞系和菌株 | 第92页 |
二. 细胞培养材料 | 第92页 |
三. 实验试剂 | 第92-93页 |
四. 质粒 | 第93页 |
五. 实验仪器 | 第93页 |
第二节 实验方法 | 第93-96页 |
一. 细胞划痕愈伤实验 | 第93-94页 |
二. Boyden小室细胞迁移实验 | 第94页 |
三. 免疫荧光实验 | 第94页 |
四. 蛋白纯化 | 第94-95页 |
五. 显微注射 | 第95页 |
六. 延时摄影荧光显微镜 | 第95页 |
七. Spheroid实验 | 第95-96页 |
八. 统计学分析 | 第96页 |
第三节 实验结果 | 第96-103页 |
一. Ga13与Ab1在细胞内形成复合物 | 第96-97页 |
二. 体外沉降实验表明Ga13与Ab1相互作用位点在Ab1的激酶结构域 | 第97-99页 |
三. Abl在生长因子PDGF-BB刺激下对dorsal ruffle turnover的影响 | 第99-100页 |
四. Abl对PDGF-BB诱导的细胞迁移的影响 | 第100-101页 |
五. Gα13和Abl在血管形成中的功能 | 第101-103页 |
第四节 结论与讨论 | 第103-105页 |
第五章 总结与展望 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
缩略词表 | 第121-123页 |
攻博期间发表的科研成果目录 | 第123-124页 |
致谢 | 第124页 |