| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 立题背景 | 第11-12页 |
| 1.2 β-谷甾醇 | 第12-13页 |
| 1.3 MicroRNAs 研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 MicroRNAs 的发现及形成 | 第13-14页 |
| 1.3.2 MicroRNAs 与癌症发生 | 第14-16页 |
| 1.4 MicroRNAs 的检测方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 Northern blot 印迹 | 第16-17页 |
| 1.4.2 实时荧光定量 PCR 检测技术 | 第17页 |
| 1.4.3 MicroRNAs 微阵列技术 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-32页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 实验技术路线 | 第19页 |
| 2.2.2 细胞培养与传代 | 第19-20页 |
| 2.2.3 药物配制 | 第20-21页 |
| 2.2.4 药物对 Hela 细胞与 Hela/DDP 细胞的生长抑制作用 | 第21页 |
| 2.2.5 Hela 细胞芯片扫描及分析 | 第21-24页 |
| 2.2.6 Hela 和 Hela/DDP 中 microRNAs 荧光定量 PCR | 第24-27页 |
| 2.2.7 Hela 和 Hela/DDP 中 microRNAs 靶基因的荧光定量 PCR | 第27-32页 |
| 第3章 β-谷甾醇和顺铂对 Hela 和 Hela/DDP 的抑制作用分析 | 第32-36页 |
| 3.1 药物处理后 Hela 及 Hela/DDP 细胞镜检结果 | 第32-34页 |
| 3.2 抑制率测定 | 第34页 |
| 3.2.1 不同浓度的β-谷甾醇对 Hela 及 Hela/DDP 细胞的抑制作用 | 第34页 |
| 3.2.2 不同浓度的顺铂对 Hela 及 Hela/DDP 细胞的抑制作用 | 第34页 |
| 3.3 本章小结 | 第34-36页 |
| 第4章 Hela 细胞药物处理前后 TagMan MicroRNA 芯片扫描分析结果 | 第36-46页 |
| 4.1 RNA 纯度检测及浓度计算 | 第36页 |
| 4.2 电泳检测结果 | 第36-37页 |
| 4.3 芯片结果分析 | 第37-45页 |
| 4.3.1 β-谷甾醇作用 Hela 细胞后 microRNAs 的差异表达情况 | 第37-38页 |
| 4.3.2 顺铂处理后表达情况分析 | 第38-39页 |
| 4.3.3 两种药物比对及目标 microRNAs 的选择 | 第39页 |
| 4.3.4 靶标预测及筛选 | 第39-40页 |
| 4.3.5 靶标功能富集分析 | 第40-41页 |
| 4.3.6 通过靶标反向查找 microRNAs | 第41-42页 |
| 4.3.7 靶标与对应 microRNAs 之间的能量学分析 | 第42-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第5章 Hela 细胞荧光定量 PCR 结果 | 第46-55页 |
| 5.1 RNA 样品的浓度测定及检测 | 第46-47页 |
| 5.1.1 RNA 样品吸光值测定结果 | 第46-47页 |
| 5.1.2 电泳检测结果 | 第47页 |
| 5.2 MicroRNAs 荧光定量 PCR 结果 | 第47-53页 |
| 5.2.1 内参 U6 的荧光定量 PCR 检测结果 | 第47-48页 |
| 5.2.2 Hsa-miR-21 荧光定量 PCR 检测结果 | 第48-49页 |
| 5.2.3 Hsa-miR-143 荧光定量 PCR 检测结果 | 第49-51页 |
| 5.2.4 Hsa-miR-504 荧光定量 PCR 检测结果 | 第51-52页 |
| 5.2.5 Hsa-miR-10b 荧光定量 PCR 检测结果 | 第52-53页 |
| 5.3 本章小结 | 第53-55页 |
| 第6章 Hela 细胞中靶基因的荧光定量 PCR 结果分析 | 第55-67页 |
| 6.1 PCR 检测引物扩增片段结果分析 | 第55-57页 |
| 6.1.1 内参基因 ACTB 电泳检测结果 | 第55页 |
| 6.1.2 靶标基因 PDCD4 电泳检测结果 | 第55-56页 |
| 6.1.3 靶标基因 TP53 电泳检测结果 | 第56页 |
| 6.1.4 靶标基因 RAC3 电泳检测结果 | 第56-57页 |
| 6.1.5 靶标基因 JNK1 电泳检测结果 | 第57页 |
| 6.2 靶基因荧光定量 PCR 结果 | 第57-65页 |
| 6.2.1 内参基因 ACTB 的荧光定量 PCR 结果 | 第57-58页 |
| 6.2.2 靶基因 PDCD4 的荧光定量 PCR 结果 | 第58-60页 |
| 6.2.3 靶基因 TP53 的荧光定量 PCR 结果 | 第60-62页 |
| 6.2.4 靶基因 RAC3 的荧光定量 PCR 结果 | 第62-64页 |
| 6.2.5 靶基因 JNK1 的荧光定量 PCR 结果 | 第64-65页 |
| 6.3 本章小结 | 第65-67页 |
| 第7章 Hela/DDP 细胞 microRNAs 荧光定量 PCR 结果 | 第67-74页 |
| 7.1 RNA 样品的浓度测定及检测 | 第67-68页 |
| 7.1.1 RNA 样品吸光值测定结果 | 第67-68页 |
| 7.1.2 电泳检测结果 | 第68页 |
| 7.2 MiroRNAs 荧光定量 PCR 结果 | 第68-73页 |
| 7.2.1 内参 U6 的荧光定量 PCR 检测结果 | 第68-69页 |
| 7.2.2 Hsa-miR-21 荧光定量 PCR 检测结果 | 第69-70页 |
| 7.2.3 Hsa-miR-143 荧光定量 PCR 检测结果 | 第70-72页 |
| 7.2.4 Hsa-miR-504 荧光定量 PCR 检测结果 | 第72页 |
| 7.2.5 Hsa-miR-10b 荧光定量 PCR 检测结果 | 第72-73页 |
| 7.3 本章小结 | 第73-74页 |
| 第8章 Hela/DDP 细胞中 microRNAs 靶基因的荧光定量 PCR 结果分析 | 第74-85页 |
| 8.1 PCR 检测引物扩增片段结果分析 | 第74-76页 |
| 8.1.1 内参基因 ACTB 电泳检测结果 | 第74页 |
| 8.1.2 靶标基因 PDCD4 电泳检测结果 | 第74-75页 |
| 8.1.3 靶标基因 TP53 电泳检测结果 | 第75页 |
| 8.1.4 靶标基因 RAC3 电泳检测结果 | 第75-76页 |
| 8.1.5 靶标基因 JNK1 电泳检测结果 | 第76页 |
| 8.2 靶基因的荧光定量 PCR 结果 | 第76-84页 |
| 8.2.1 内参基因 ACTB 的荧光定量 PCR 结果 | 第76-77页 |
| 8.2.2 靶基因 PDCD4 的荧光定量 PCR 结果 | 第77-79页 |
| 8.2.3 靶基因 TP53 的荧光定量 PCR 结果 | 第79-81页 |
| 8.2.4 靶基因 RAC3 的荧光定量 PCR 结果 | 第81-82页 |
| 8.2.5 靶基因 JNK1 的荧光定量 PCR 结果 | 第82-84页 |
| 8.3 本章小结 | 第84-85页 |
| 第9章 Hela 细胞与 Hela/DDP 细胞的荧光定量 PCR 结果比较及分析 | 第85-92页 |
| 9.1 Hela 细胞与 Hela/DDP 细胞结果比较 | 第85-87页 |
| 9.1.1 两种细胞 microRNAs 变化比较 | 第85-86页 |
| 9.1.2 两种细胞靶基因变化比较 | 第86-87页 |
| 9.2 MicroRNAs 与靶基因间的调控 | 第87-91页 |
| 9.2.1 Hsa-miR-21 与靶基因 PDCD4 | 第87-88页 |
| 9.2.2 Hsa-miR-504 与靶基因 TP53 | 第88-89页 |
| 9.2.3 Hsa-miR-143 与 TP53 和 RAC3 | 第89页 |
| 9.2.4 Hsa-miR-504 与 RAC3 和 JNK1 | 第89-91页 |
| 9.2.5 Hsa-miR-10b 与其靶基因 TIAM1 | 第91页 |
| 9.3 本章小结 | 第91-92页 |
| 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 附录一: 成簇分布 miRNAs 的靶标基因 | 第101-105页 |
| 附录二: 靶标基因对应的 microRNAs | 第105-108页 |
| 附录三：Hela 细胞 microRNA 荧光定量 PCR 扩增曲线 | 第108-118页 |
| 附录四：Hela 细胞靶基因荧光定量 PCR 扩增曲线 | 第118-128页 |
| 附录五：Hela/DDP 细胞 microRNAs 的荧光定量 PCR 扩增曲线 | 第128-136页 |
| 附录六：Hela/DDP 细胞靶基因荧光定量 PCR 扩增曲线 | 第136-146页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
