| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 甜菊醇糖苷研究进展 | 第9-14页 |
| 1.1.1 甜菊醇糖苷 | 第9-10页 |
| 1.1.2 甜菊醇糖苷的代谢途径及代谢基因 | 第10-13页 |
| 1.1.3 甜菊醇糖苷的常见提取方法 | 第13-14页 |
| 1.2 甜叶菊育种研究进展 | 第14页 |
| 1.2.1 生物学特性 | 第14页 |
| 1.2.2 甜叶菊的引种及国内生产现状 | 第14页 |
| 1.3 发根遗传转化体系研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 发根农杆菌 | 第14-15页 |
| 1.3.2 发根农杆菌遗传转化体系在转基因的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的主要内容和研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 甜叶菊UGT76G1基因的克隆、序列分析及其过量表达载体的构建 | 第17-29页 |
| 2.1. 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 溶液 | 第17页 |
| 2.1.5 培养基 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 甜叶菊RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.2 甜叶菊UGT76G1基因的克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.3 PCR产物的回收 | 第20-21页 |
| 2.2.4 目的片段与T载体的连接 | 第21页 |
| 2.2.5 大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.6 重组质粒的转化与筛选 | 第22页 |
| 2.2.7 重组质粒的菌液PCR检测 | 第22页 |
| 2.2.8 测序获得序列的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.9 重组质粒质粒pEASY:::UGT76G1的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.10 过量表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 甜叶菊RNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.2 UGT76G1基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.3.3 阳性克隆的序列测定及其分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4 过量载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第28-29页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.4.2 目的片段UGT76G1的克隆与鉴定 | 第28-29页 |
| 第三章 发根农杆菌介导的甜叶菊遗传转化体系建立及发状根的再生 | 第29-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 菌种 | 第29页 |
| 3.1.3 酶与试剂 | 第29页 |
| 3.1.4 培养基 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 3.2.1 甜叶菊无菌组培苗的培养 | 第29页 |
| 3.2.2 发根农杆菌A4的活化 | 第29-30页 |
| 3.2.3 发根农杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| 3.2.4 质粒pRI 101 AN-DN:::UGT76G1电激转化发根农杆菌A4感受态细胞 | 第30-31页 |
| 3.2.5 发根农杆菌遗传转化体系的建立 | 第31页 |
| 3.2.6 发状根的再生 | 第31-32页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.3.1 外植体的选择 | 第32页 |
| 3.3.2 发状根遗传转化体系的优化 | 第32-33页 |
| 3.3.3 发状根的再生 | 第33-37页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第37-39页 |
| 3.4.1 外植体的选择 | 第37-38页 |
| 3.4.2 转基因系统的构建 | 第38页 |
| 3.4.3 过量表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| 4.1 甜叶菊UGT76G1过量表达载体载体的构建 | 第39页 |
| 4.2 建立甜叶菊守田2号茎尖高效遗传转化体系 | 第39页 |
| 4.3 抗性发状根的获得 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第53页 |
