| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 我国农药生产使用现状 | 第11页 |
| 1.2 农药污染带来的负面影响 | 第11-13页 |
| 1.3 农药残留检测技术 | 第13-18页 |
| 1.4 研究的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 R-DmAChE 的表达 | 第26-32页 |
| 2.2.1.1 DmAChE cDNA 密码子优化 | 第26-28页 |
| 2.2.1.2 DmAChE 甲醇酵母表达载体pPIC9K/DmAChE 的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.1.3 高活性甲醇酵母重组子的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.1.4 DmAChE 的诱导表达 | 第31页 |
| 2.2.1.5 R-DmAChE 的分离 | 第31-32页 |
| 2.2.2 DmAChE 生物传感器的研制和应用 | 第32-36页 |
| 2.2.2.1 DmAChE 生物传感器制备 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 传感器特性表征 | 第33-34页 |
| 2.2.2.3 抑制物的测定 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第36-51页 |
| 3.1 R-DmAChE 的表达 | 第36-40页 |
| 3.1.1 DmAChE cDNA 的改造 | 第36-37页 |
| 3.1.2 DmAChE 甲醇酵母表达载体pPIC9K/DmAChE 的构建 | 第37页 |
| 3.1.3 高活性甲醇酵母重组子的筛选 | 第37-39页 |
| 3.1.4 DmAChE 的诱导表达与分离 | 第39-40页 |
| 3.2 DmAChE 生物传感器的研制和应用 | 第40-51页 |
| 3.2.1 普鲁士蓝的电聚合 | 第40-41页 |
| 3.2.2 氧化电压的确定 | 第41-43页 |
| 3.2.3 表观米氏常数(Km)app 的测定 | 第43-45页 |
| 3.2.4 信号稳定性和热稳定性 | 第45-46页 |
| 3.2.5 pH 值的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.6 抑制时间的确定 | 第47-48页 |
| 3.2.7 标准抑制物的测定 | 第48-49页 |
| 3.2.8 加标实际样品的测定 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录Ⅰ本研究技术路线图 | 第57-58页 |
| 附录Ⅱ缩略词表 | 第58-60页 |
| 附录Ⅲ重叠PCR 所用引物 | 第60-63页 |
| 附录Ⅳ传感器技术原理图与制作流程 | 第63-64页 |
| 附录Ⅴ简明抑制物测试流程 | 第64-65页 |
| 发表文章 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
