缩略语 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
文献综述 | 第15-34页 |
1. 花柱SI决定因子:S-RNase基因 | 第16-19页 |
1.1 S-RNase基因结构和功能 | 第17页 |
1.2 S-RNase与自交(不)亲和性的关系 | 第17页 |
1.3 S基因型鉴定方法 | 第17-19页 |
2. 花粉决定因子:SLF/SFB基因 | 第19-25页 |
2.1 SLF/SFB基因结构特点及连锁距离 | 第19-22页 |
2.2 SFB基因与自交不亲和性及亲和性的关系 | 第22-23页 |
2.3 鉴定SFB基因的方法 | 第23-25页 |
2.4 S-RNase基因与SFB基因的相互作用 | 第25页 |
3. 参与S-RNase介导SI反应的其它因子 | 第25-27页 |
3.1 HT修饰基因 | 第26页 |
3.2 120KDa蛋白 | 第26-27页 |
4. S-RNase介导的SI反应学说 | 第27-29页 |
4.1 膜受体学说 | 第27页 |
4.2 胞内抑制剂学说 | 第27页 |
4.3 修正抑制子模式学说 | 第27-28页 |
4.4 其它新的学说 | 第28-29页 |
5. S位点结构 | 第29-30页 |
6. 新S基因特异性的产生 | 第30-31页 |
7. SI的打破及种间育种壁垒 | 第31-32页 |
8. 研究目的与意义 | 第32-34页 |
第一章 梨和梅种质资源S基因型鉴定 | 第34-49页 |
第一节 梨20个品种(类型)S基因型的鉴定及S_(40)-和S_(41)-RNase基因序列分析 | 第34-41页 |
1. 材料与方法 | 第35-36页 |
1.1 试验材料 | 第35页 |
1.2 试验方法 | 第35-36页 |
2. 结果与分析 | 第36-39页 |
2.1 S基因型鉴定 | 第36-39页 |
2.2 新S-RNases基因核苷酸序列分析 | 第39页 |
3. 讨论 | 第39-41页 |
第二节 梅品种S基因型及7个新S-RNases基因的鉴定 | 第41-49页 |
1. 材料与方法 | 第42-43页 |
1.1 试验材料 | 第42页 |
1.2 试验方法 | 第42-43页 |
1.3 田间授粉 | 第43页 |
2. 结果与分析 | 第43-47页 |
2.1 梅品种S基因型及新S-RNase基因的鉴定 | 第43-46页 |
2.2 梅新S-RNases基因与已知S-RNases基因之间的比较分析 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
3.1 引物对PCR扩增产物的影响 | 第47页 |
3.2 S-RNase基因高变区与自交不亲和性的关系 | 第47-49页 |
第二章 梅雌蕊S-RNase基因的克隆 | 第49-61页 |
1. 材料与方法 | 第50-52页 |
1.1 试验材料 | 第50页 |
1.2 DNA和RNA的提取 | 第50-51页 |
1.3 梅S-RNase基因cDNA序列的扩增 | 第51-52页 |
1.4 梅S-RNase第一内含子的扩增 | 第52页 |
2. 结果与分析 | 第52-60页 |
2.1 梅S-RNase基因cDNA的克隆 | 第52-53页 |
2.2 梅S-RNase基因第一、二内含子的扩增 | 第53-55页 |
2.3 梅S-RNases基因与李属其它种内S-RNases基因氨基酸序列的比较 | 第55-60页 |
3. 讨论 | 第60-61页 |
3.1 梅S-RNase基因保守区域的差异 | 第60页 |
3.2 李属S-RNase基因包含了两个内含子 | 第60-61页 |
第三章 梅花粉SFB基因的克隆与结构分析 | 第61-73页 |
1. 材料与方法 | 第62-63页 |
1.1 试验材料 | 第62页 |
1.2 梅PmSFB_(10)~PmSFB_(16)的扩增与分离 | 第62-63页 |
1.3 梅PmSFB_(10)~PmSFB_(16)基因5'端内含子的扩增 | 第63页 |
1.4 梅S-RNase基因与SFB基因之间物理距离分析 | 第63页 |
2. 结果与分析 | 第63-70页 |
2.1 梅SFB基因的扩增 | 第63-65页 |
2.2 梅S-RNase基因与SFB基因之间的物理距离 | 第65页 |
2.3 李属植物SFB基因内含子的比较 | 第65-67页 |
2.4 梅SFB基因与李属其它SFB基因的比较 | 第67-70页 |
3. 讨论 | 第70-73页 |
3.1 李属S单元型中SFB基因结构特点 | 第70-71页 |
3.2 李属SFB基因5'端内含子 | 第71页 |
3.3 李属植物S单元型中S-RNase基因和SFB基因的共同进化 | 第71-73页 |
第四章 不同种属间S单元型特异性识别功能研究 | 第73-96页 |
第一节 李属不同种间S基因特异性识别功能验证 | 第73-82页 |
1. 材料与方法 | 第74-76页 |
1.1 试验材料 | 第74-75页 |
1.2 DNA和RNA的提取 | 第75页 |
1.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第75页 |
1.4 S-RNase基因的扩增 | 第75-76页 |
1.5 花柱S糖蛋白的提取 | 第76页 |
1.6 花柱S糖蛋白浓度的测定 | 第76页 |
1.7 荧光观察花柱中花粉管生长 | 第76页 |
1.8 花粉的液体荫发培养 | 第76页 |
2. 结果与分析 | 第76-78页 |
2.1 花粉管荧光观察 | 第76-77页 |
2.2. 离体条件条件下S-RNase对花粉萌发及生长的影响 | 第77-78页 |
3. 讨论 | 第78-82页 |
3.1 花粉管荧光观察 | 第78-79页 |
3.2 ‘龙眼梅’S_(13)-RNase与‘冀光’S_9-RNase识别功能的验证 | 第79-80页 |
3.3 不同种间S单元型特异性识别 | 第80-81页 |
3.4 序列同源性较高S单元型的来源 | 第81-82页 |
第二节 梨属和苹果属不同种间S单元型的识别 | 第82-96页 |
1. 材料与方法 | 第82-84页 |
1.1 试验材料 | 第82页 |
1.2 叶片DNA和RNA的提取 | 第82页 |
1.3 cDNA的合成 | 第82-83页 |
1.4 S-RNase基因的扩增 | 第83页 |
1.5 花柱S糖蛋白的提取 | 第83页 |
1.6 花柱S糖蛋白浓度的测定 | 第83-84页 |
1.7 田间授粉 | 第84页 |
1.8 梨品种‘明月’花粉的培养 | 第84页 |
2. 结果与分析 | 第84-93页 |
2.1 砂梨PpS_8-RNase和新疆梨PsiS_(28)-RNase不同种间特异性识别功能分析 | 第84-90页 |
2.2 梨属‘明月’PpS_8-RNase与苹果属‘海棠3号’MsS_3-RNase特异性识别功能分析 | 第90-93页 |
3. 讨论 | 第93-96页 |
3.1 活体花柱中S-RNase对不同花粉管生长的影响 | 第93页 |
3.2 砂梨PpS_8-RNase和新疆梨PsiS_(28)-RNase不同种间特异性识别功能 | 第93-94页 |
3.3 梨属PpS_8-RNase和苹果属MsS_3-RNase不同属间特异性识别功能 | 第94-95页 |
3.4 S位点的进化 | 第95页 |
3.5 新S位点的产生 | 第95-96页 |
综合讨论 | 第96-103页 |
1. 蔷薇科果树种质资源S基因型鉴定及S基因的克隆 | 第96-97页 |
2. 蔷薇科植物S单元型结构特点与功能 | 第97-98页 |
3. 梨属与李属S单元型中内含子的差异 | 第98-99页 |
4. 蔷薇科植物S单元型的进化 | 第99-100页 |
4.1 蔷薇科植物不同种间S-RNase基因的进化 | 第99页 |
4.2 蔷薇科植物不同种间SFB基因的进化 | 第99-100页 |
5. 不同种属间S单元型的特异性识别功能 | 第100-101页 |
6. 新S位点的产生 | 第101-103页 |
全文结论及主要创新之处 | 第103-105页 |
1. 全文结论 | 第103-104页 |
2. 创新点 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-117页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第117-118页 |
致谢 | 第118页 |