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蔷薇科部分果树S基因的鉴定、克隆及其特异性识别研究

缩略语第8-10页
摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
文献综述第15-34页
    1. 花柱SI决定因子:S-RNase基因第16-19页
        1.1 S-RNase基因结构和功能第17页
        1.2 S-RNase与自交(不)亲和性的关系第17页
        1.3 S基因型鉴定方法第17-19页
    2. 花粉决定因子:SLF/SFB基因第19-25页
        2.1 SLF/SFB基因结构特点及连锁距离第19-22页
        2.2 SFB基因与自交不亲和性及亲和性的关系第22-23页
        2.3 鉴定SFB基因的方法第23-25页
        2.4 S-RNase基因与SFB基因的相互作用第25页
    3. 参与S-RNase介导SI反应的其它因子第25-27页
        3.1 HT修饰基因第26页
        3.2 120KDa蛋白第26-27页
    4. S-RNase介导的SI反应学说第27-29页
        4.1 膜受体学说第27页
        4.2 胞内抑制剂学说第27页
        4.3 修正抑制子模式学说第27-28页
        4.4 其它新的学说第28-29页
    5. S位点结构第29-30页
    6. 新S基因特异性的产生第30-31页
    7. SI的打破及种间育种壁垒第31-32页
    8. 研究目的与意义第32-34页
第一章 梨和梅种质资源S基因型鉴定第34-49页
    第一节 梨20个品种(类型)S基因型的鉴定及S_(40)-和S_(41)-RNase基因序列分析第34-41页
        1. 材料与方法第35-36页
            1.1 试验材料第35页
            1.2 试验方法第35-36页
        2. 结果与分析第36-39页
            2.1 S基因型鉴定第36-39页
            2.2 新S-RNases基因核苷酸序列分析第39页
        3. 讨论第39-41页
    第二节 梅品种S基因型及7个新S-RNases基因的鉴定第41-49页
        1. 材料与方法第42-43页
            1.1 试验材料第42页
            1.2 试验方法第42-43页
            1.3 田间授粉第43页
        2. 结果与分析第43-47页
            2.1 梅品种S基因型及新S-RNase基因的鉴定第43-46页
            2.2 梅新S-RNases基因与已知S-RNases基因之间的比较分析第46-47页
        3 讨论第47-49页
            3.1 引物对PCR扩增产物的影响第47页
            3.2 S-RNase基因高变区与自交不亲和性的关系第47-49页
第二章 梅雌蕊S-RNase基因的克隆第49-61页
    1. 材料与方法第50-52页
        1.1 试验材料第50页
        1.2 DNA和RNA的提取第50-51页
        1.3 梅S-RNase基因cDNA序列的扩增第51-52页
        1.4 梅S-RNase第一内含子的扩增第52页
    2. 结果与分析第52-60页
        2.1 梅S-RNase基因cDNA的克隆第52-53页
        2.2 梅S-RNase基因第一、二内含子的扩增第53-55页
        2.3 梅S-RNases基因与李属其它种内S-RNases基因氨基酸序列的比较第55-60页
    3. 讨论第60-61页
        3.1 梅S-RNase基因保守区域的差异第60页
        3.2 李属S-RNase基因包含了两个内含子第60-61页
第三章 梅花粉SFB基因的克隆与结构分析第61-73页
    1. 材料与方法第62-63页
        1.1 试验材料第62页
        1.2 梅PmSFB_(10)~PmSFB_(16)的扩增与分离第62-63页
        1.3 梅PmSFB_(10)~PmSFB_(16)基因5'端内含子的扩增第63页
        1.4 梅S-RNase基因与SFB基因之间物理距离分析第63页
    2. 结果与分析第63-70页
        2.1 梅SFB基因的扩增第63-65页
        2.2 梅S-RNase基因与SFB基因之间的物理距离第65页
        2.3 李属植物SFB基因内含子的比较第65-67页
        2.4 梅SFB基因与李属其它SFB基因的比较第67-70页
    3. 讨论第70-73页
        3.1 李属S单元型中SFB基因结构特点第70-71页
        3.2 李属SFB基因5'端内含子第71页
        3.3 李属植物S单元型中S-RNase基因和SFB基因的共同进化第71-73页
第四章 不同种属间S单元型特异性识别功能研究第73-96页
    第一节 李属不同种间S基因特异性识别功能验证第73-82页
        1. 材料与方法第74-76页
            1.1 试验材料第74-75页
            1.2 DNA和RNA的提取第75页
            1.3 反转录cDNA第一链的合成第75页
            1.4 S-RNase基因的扩增第75-76页
            1.5 花柱S糖蛋白的提取第76页
            1.6 花柱S糖蛋白浓度的测定第76页
            1.7 荧光观察花柱中花粉管生长第76页
            1.8 花粉的液体荫发培养第76页
        2. 结果与分析第76-78页
            2.1 花粉管荧光观察第76-77页
            2.2. 离体条件条件下S-RNase对花粉萌发及生长的影响第77-78页
        3. 讨论第78-82页
            3.1 花粉管荧光观察第78-79页
            3.2 ‘龙眼梅’S_(13)-RNase与‘冀光’S_9-RNase识别功能的验证第79-80页
            3.3 不同种间S单元型特异性识别第80-81页
            3.4 序列同源性较高S单元型的来源第81-82页
    第二节 梨属和苹果属不同种间S单元型的识别第82-96页
        1. 材料与方法第82-84页
            1.1 试验材料第82页
            1.2 叶片DNA和RNA的提取第82页
            1.3 cDNA的合成第82-83页
            1.4 S-RNase基因的扩增第83页
            1.5 花柱S糖蛋白的提取第83页
            1.6 花柱S糖蛋白浓度的测定第83-84页
            1.7 田间授粉第84页
            1.8 梨品种‘明月’花粉的培养第84页
        2. 结果与分析第84-93页
            2.1 砂梨PpS_8-RNase和新疆梨PsiS_(28)-RNase不同种间特异性识别功能分析第84-90页
            2.2 梨属‘明月’PpS_8-RNase与苹果属‘海棠3号’MsS_3-RNase特异性识别功能分析第90-93页
        3. 讨论第93-96页
            3.1 活体花柱中S-RNase对不同花粉管生长的影响第93页
            3.2 砂梨PpS_8-RNase和新疆梨PsiS_(28)-RNase不同种间特异性识别功能第93-94页
            3.3 梨属PpS_8-RNase和苹果属MsS_3-RNase不同属间特异性识别功能第94-95页
            3.4 S位点的进化第95页
            3.5 新S位点的产生第95-96页
综合讨论第96-103页
    1. 蔷薇科果树种质资源S基因型鉴定及S基因的克隆第96-97页
    2. 蔷薇科植物S单元型结构特点与功能第97-98页
    3. 梨属与李属S单元型中内含子的差异第98-99页
    4. 蔷薇科植物S单元型的进化第99-100页
        4.1 蔷薇科植物不同种间S-RNase基因的进化第99页
        4.2 蔷薇科植物不同种间SFB基因的进化第99-100页
    5. 不同种属间S单元型的特异性识别功能第100-101页
    6. 新S位点的产生第101-103页
全文结论及主要创新之处第103-105页
    1. 全文结论第103-104页
    2. 创新点第104-105页
参考文献第105-117页
攻读博士学位期间发表的论文第117-118页
致谢第118页

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