| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩写词 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-39页 |
| 1.1 一氧化氮信号通路 | 第12-13页 |
| 1.2 可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）简介 | 第13-25页 |
| 1.2.1 sGC 概述 | 第14页 |
| 1.2.2 sGC 在组织中的分布及外源表达 | 第14-15页 |
| 1.2.3 sGC 结构特征 | 第15-21页 |
| 1.2.4 NO 激活 sGC 的分子机制 | 第21-23页 |
| 1.2.5 sGC 对 NO 失活和脱敏的机理研究 | 第23-24页 |
| 1.2.6 sGC 生物学功能 | 第24-25页 |
| 1.3 鸟苷酸环化酶中的卟啉 | 第25-28页 |
| 1.3.1 卟啉的合成 | 第26-27页 |
| 1.3.2 卟啉的结合 | 第27-28页 |
| 1.4 亚硝基化及其对 sGC 活性的调节 | 第28-31页 |
| 1.4.1 亚硝基化简介 | 第28-29页 |
| 1.4.2 亚硝基化功能 | 第29页 |
| 1.4.3 亚硝基化的实验检测 | 第29-30页 |
| 1.4.4 亚硝基化导致 sGC 对 NO 不敏感 | 第30-31页 |
| 1.5 红外光谱研究 sGC 的半胱氨酸 | 第31-32页 |
| 1.6 sGC 活性调节剂 | 第32-36页 |
| 1.7 相关疾病以及新药研究进展 | 第36-37页 |
| 1.8 本论文的研究目的和意义 | 第37-39页 |
| 第2章 鸟苷酸环化酶β1 亚基以及片段蛋白表达和纯化 | 第39-59页 |
| 2.1 实验仪器，材料和试剂 | 第39-45页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第40页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第40-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-50页 |
| 2.2.1 构建 sGCβ1 及其片段的表达菌株 | 第45-47页 |
| 2.2.2 sGCβ1 亚基及其片段蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 2.2.3 sGCβ1(1-194)的纯化 | 第48页 |
| 2.2.4 sGCβ1(1-385)的纯化 | 第48-49页 |
| 2.2.5 sGCβ1 亚基的表达及检测 | 第49-50页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE | 第50页 |
| 2.2.7 MALDI-TOF 质谱仪测蛋白分子量 | 第50页 |
| 2.2.8 紫外可见吸收光谱 | 第50页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第50-56页 |
| 2.3.1 表达菌体的构建及验证 | 第50-52页 |
| 2.3.2 sGCβ1(1-194) 的表达和纯化 | 第52-54页 |
| 2.3.3 sGCβ1(1-385) 的表达和纯化 | 第54-55页 |
| 2.3.4 sGCβ1 亚基的表达 | 第55-56页 |
| 2.4 小结 | 第56-59页 |
| 第3章 C78 对卟啉稳定性的影响 | 第59-79页 |
| 3.1 实验方法 | 第59-65页 |
| 3.1.1 3D 模型分析影响卟啉结合的氨基酸 | 第59页 |
| 3.1.2 突变体的构建 | 第59-63页 |
| 3.1.3 纯化不同突变体蛋白 | 第63页 |
| 3.1.4 紫外可见光谱检测突变体蛋白的卟啉饱和度 | 第63页 |
| 3.1.5 突变体卟啉不同状态检测 | 第63-64页 |
| 3.1.6 突变体对 CO 结合能力的变化 | 第64页 |
| 3.1.7 共振拉曼光谱 | 第64-65页 |
| 3.2 实验结果与讨论 | 第65-78页 |
| 3.2.1 C78 在卟啉口袋中的位置 | 第65-67页 |
| 3.2.2 定点突变结果 | 第67页 |
| 3.2.3 蛋白纯化结果 | 第67页 |
| 3.2.4 不同突变体的卟啉饱和度 | 第67-70页 |
| 3.2.5 突变体氧化态，还原态以及配基结合态 | 第70-73页 |
| 3.2.6 突变体对 CO 结合的影响 | 第73-75页 |
| 3.2.7 共振拉曼光谱 | 第75-77页 |
| 3.2.8 影响卟啉稳定性的机理模型 | 第77-78页 |
| 3.3 小结 | 第78-79页 |
| 第4章 半胱氨酸及其亚硝基化的红外研究 | 第79-93页 |
| 4.1 实验方法 | 第79-83页 |
| 4.1.1 定点突变和蛋白纯化 | 第79页 |
| 4.1.2 GSNO 的合成 | 第79页 |
| 4.1.3 亚硝基化样品的制备 | 第79-80页 |
| 4.1.4 蛋白与 GSNO 反应的浓度梯度实验 | 第80页 |
| 4.1.5 红外样品的制备 | 第80页 |
| 4.1.6 傅里叶变换红外光谱的测定 | 第80页 |
| 4.1.7 Biotin-switch 实验 | 第80-83页 |
| 4.2 实验结果与讨论 | 第83-91页 |
| 4.2.1 突变体的制备 | 第83-84页 |
| 4.2.2 GSNO 合成的紫外吸收检测 | 第84-85页 |
| 4.2.3 野生型及突变体的红外光谱 | 第85-89页 |
| 4.2.4 Biotin-switch 实验结果 | 第89-90页 |
| 4.2.5 sGCβ1(1-194) 亚硝基化的 GSNO 浓度依赖性 | 第90-91页 |
| 4.3 小结 | 第91-93页 |
| 第5章 工作总结 | 第93-97页 |
| 参考文献 | 第97-115页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
