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副猪嗜血杆菌OMP P2基因PCR检测方法的建立与四川地区HPs分子流行病学调查

中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 文献综述第12-23页
    1 病原概述第12-13页
    2 流行病学及致病机理第13-15页
        2.1 流行病学研究第13-14页
        2.2 致病机理研究第14-15页
    3 毒力因子研究第15-18页
        3.1 荚膜、菌毛等第16页
        3.2 外膜蛋白(OMP)第16-17页
        3.3 自转运蛋白第17页
        3.4 脂多糖(LSP)和脂寡糖(LOS)第17-18页
        3.5 其他潜在毒力因子第18页
    4 副猪嗜血杆菌的诊断第18-20页
        4.1 清学诊断第19页
        4.2 病原学诊断第19-20页
    5 副猪嗜血杆菌病的防治第20-22页
    6 研究的目的与意义第22-23页
第二章 副猪嗜血杆菌OMP P2基因PCR检测方法的建立与应用第23-36页
    1 材料第23-24页
        1.1 试验菌株第23页
        1.2 主要试剂第23页
        1.3 主要设备第23-24页
        1.4 培养基及溶液配置第24页
    2 方法第24-28页
        2.1 PCR引物的设计第24页
        2.2 HPs标准株复苏第24页
        2.3 HPs纯度检测第24-25页
        2.4 细菌DNA模板提取第25页
        2.5 PCR反应条件的确立及PCR扩增第25页
        2.6 PCR产物回收纯化与测序鉴定第25-27页
        2.7 PCR特异性试验第27-28页
        2.8 PCR灵敏性试验第28页
        2.9 PCR方法的应用第28页
    3 结果第28-33页
        3.1 PCR反应条件的确立第28-29页
        3.2 重组质粒的PCR鉴定与测序第29-30页
        3.3 PCR的特异性测定第30-31页
        3.4 PCR的灵敏性测定第31-32页
        3.5 PCR方法的应用第32-33页
    4 分析与讨论第33-36页
第三章 2013年四川地区HPs的分子流行病学调查第36-56页
    1 材料第36页
        1.1 病料第36页
        1.2 试验菌株第36页
        1.3 主要试剂及仪器设备第36页
    2 方法第36-38页
        2.1 病料处理第36-37页
        2.2 病料的PCR检测第37页
        2.3 HPs espp2基因引物的设计第37页
        2.4 espp2基因的扩增第37页
        2.5 PCR产物的回收纯化及克隆测序第37-38页
        2.6 HPs espp2基因序列分析第38页
    3 结果第38-53页
        3.1 病料采集第38-39页
        3.2 HPs分子流行病学调查结果第39-40页
        3.3 HPs espp2基因的扩增结果第40-41页
        3.4 重组质粒的PCR鉴定结果第41-42页
        3.5 espp2基因的测序结果第42页
        3.6 espp2基因同源性分析第42-43页
        3.7 espp2基因氨基酸序列同源性及差异位点比较分析第43-52页
        3.8 espp2基因系统进化树构建第52-53页
    4 讨论与分析第53-56页
全文结论第56-57页
参考文献第57-62页
致谢第62页

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