| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 我国猪人工授精的现状 | 第11页 |
| 1.2 猪精液冷冻保存的现状 | 第11-13页 |
| 1.3 表观遗传学 | 第13-18页 |
| 1.3.1 表观遗传学的研究内容 | 第13-14页 |
| 1.3.2 精子发生及冷冻过程中的表观遗传变化 | 第14-17页 |
| 1.3.3 几个跟精子功能有关的表观遗传相关基因 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 试验样品 | 第20页 |
| 2.1.2 主要药品及试剂 | 第20-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 猪精液冷冻稀释液的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.2 试验设计 | 第23页 |
| 2.2.3 精液冷冻 | 第23-24页 |
| 2.2.4 精子Total RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5 总RNA质量检测 | 第25页 |
| 2.2.6 cDNA合成 | 第25-26页 |
| 2.2.7 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| 2.2.8 PCR | 第27-28页 |
| 2.2.9 精子总蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.10 ELISA试验 | 第29-30页 |
| 2.3 数据分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| 3.1 精子常规参数分析 | 第31页 |
| 3.2 RNA质量检测 | 第31-32页 |
| 3.3 验证引物有效性 | 第32-33页 |
| 3.4 表观遗传相关基因的相对表达量情况 | 第33-34页 |
| 3.5 猪精子蛋白质浓度 | 第34-36页 |
| 3.6 表观遗传相关基因蛋白水平的表达量情况 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-45页 |
| 4.1 冷冻-解冻后猪精子活率及活力 | 第38-39页 |
| 4.2 猪精子冷冻过程表观遗传变化 | 第39-45页 |
| 4.2.1 冷冻对Dnmt3a,Dnmt3b表达量的影响 | 第39-40页 |
| 4.2.2 冷冻对IGF2表达量的影响 | 第40-41页 |
| 4.2.3 冷冻对Jhdm2a表达量的影响 | 第41-42页 |
| 4.2.4 冷冻对Prm1、Prm2表达量的影响 | 第42-43页 |
| 4.2.5 冷冻对Kat8表达量的影响 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第55页 |