摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
目录 | 第5-7页 |
图索引 | 第7-8页 |
表索引 | 第8-9页 |
第一章 综述 | 第9-17页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第9-11页 |
1.2 花粉管生长导向信号网络 | 第11-14页 |
1.2.1 花粉管导向信号概述 | 第11页 |
1.2.2 参与孢子体阶段花粉管导向的信号分子 | 第11-13页 |
1.2.3 参与配子体阶段花粉管导向的信号分子 | 第13-14页 |
1.3 植物类受体蛋白激酶LRR-RLKs | 第14-15页 |
1.3.1 LRR-RLK亚家族基因结构特征 | 第14页 |
1.3.2 植物中LRR-RLKs的作用 | 第14-15页 |
1.4 研究对象选取的背景 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.1 植物材料、菌株及质粒载体 | 第17页 |
2.1.2 酶、试剂盒、培养基、抗生素、杂交膜及各种化学药品 | 第17页 |
2.1.3 所用仪器 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-24页 |
2.2.1 植物培养方法 | 第17-18页 |
2.2.2 植物的遗传操作 | 第18页 |
2.2.3 拟南芥基因组DNA提取——Edwards方法 | 第18页 |
2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18-19页 |
2.2.5 常规PCR进行基因型鉴定 | 第19-20页 |
2.2.6 拟南芥基因组DNA大量提取(用作Southern blot) | 第20页 |
2.2.7 Southern blot | 第20-22页 |
2.2.8 拟南芥基因组RNA的提取[Ultrapure RNA Kit(DNaseI)] | 第22-23页 |
2.2.9 cDNA第一链合成(SuperRT cDNA Kit) | 第23页 |
2.2.10 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第23-24页 |
2.2.11 花粉管的β-半乳糖苷酶(GUS)活性染色观察 | 第24页 |
2.2.12 花粉管的亚甲基兰(Aniline Blue)染色观察 | 第24页 |
2.3 所用引物 | 第24-27页 |
第三章 基因芯片分析 | 第27-31页 |
3.1 基因芯片的制作 | 第27页 |
3.2 结果分析 | 第27-30页 |
3.3 讨论 | 第30-31页 |
第四章 LL1的T-DNA插入基因型鉴定以及表型分析 | 第31-47页 |
4.1 突变体DNA水平鉴定 | 第31-32页 |
4.2 突变体RNA水平鉴定 | 第32-33页 |
4.3 Southern Blot确认插入拷贝数口 | 第33-34页 |
4.4 p1300-GFP(GUS)融合LL1载体构建 | 第34-39页 |
4.5 GFP定位结果 | 第39-41页 |
4.6 GUS定位结果 | 第41页 |
4.7 表型统计 | 第41-44页 |
4.8 讨论 | 第44-47页 |
总结与展望 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |