| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第13-14页 |
| 一、引言 | 第14-34页 |
| 1.1 真核生物核糖体的结构和功能 | 第14-16页 |
| 1.2 真核生物核糖体的生物发生过程 | 第16-21页 |
| 1.2.1 pre-rRNA的转录 | 第17页 |
| 1.2.2 pre-rRNA的剪切 | 第17-19页 |
| 1.2.3 pre-rRNA的修饰 | 第19-20页 |
| 1.2.4 核糖体发生过程中的核糖体蛋白和组装因子 | 第20-21页 |
| 1.3 早期核糖体前体的组装及成熟 | 第21-24页 |
| 1.3.1 90S核糖体前体复合物的组装与成熟 | 第21-22页 |
| 1.3.2 pre-40S颗粒的组装与成熟 | 第22页 |
| 1.3.3 pre-60S颗粒的组装与成熟 | 第22-24页 |
| 1.4 早期pre-60S颗粒的相关研究 | 第24-26页 |
| 1.4.1 A3因子 | 第25-26页 |
| 1.4.2 B因子 | 第26页 |
| 1.5 核糖体的发生是一个有层次的共转录发生的过程 | 第26-29页 |
| 1.5.1 真核生物核糖体的共转录组装 | 第27-28页 |
| 1.5.2 真核生物核糖体pre-rRNA的共转录修饰 | 第28页 |
| 1.5.3 真核生物核糖体pre-rRNA的共转录加工 | 第28-29页 |
| 1.5.4 真核生物核糖体的层次组装 | 第29页 |
| 1.6 真核生物核糖体前体共转录组装过程的研究方法 | 第29-32页 |
| 1.6.1 酿酒酵母表达系统 | 第29页 |
| 1.6.2 外源质粒可以在酿酒酵母体内表达并模拟转录过程中的pre-RNA | 第29-30页 |
| 1.6.3 用于纯化rRNP的MS2标签亲和纯化及诱饵蛋白亲和纯化 | 第30-32页 |
| 1.6.4 液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术 | 第32页 |
| 1.7 研究核糖体共转录组装过程的目的 | 第32-34页 |
| 1.7.1 研究核糖体发生过程的现实意义 | 第32页 |
| 1.7.2 早期pre-60S颗粒的共转录组装过程是需要解决的问题 | 第32-34页 |
| 二、酵母核糖体大亚基早期组装过程的研究 | 第34-87页 |
| 2.1 实验背景 | 第34-35页 |
| 2.2 实验材料与实验方法 | 第35-56页 |
| 2.2.2 质粒克隆的构建和表达 | 第35-42页 |
| 2.2.3 酵母转化 | 第42-43页 |
| 2.2.4 MS2-MBP融合蛋白的表达纯化 | 第43-45页 |
| 2.2.5 磁力珠偶联IgG配体 | 第45-46页 |
| 2.2.6 一步TAP亲和纯化 | 第46-47页 |
| 2.2.7 MS2-IgG两步纯化 | 第47-48页 |
| 2.2.8 蛋白质样品的凝胶分离与银染染色 | 第48-49页 |
| 2.2.9 质谱样品的处理和分析 | 第49-50页 |
| 2.2.10 RNA样品的制备 | 第50-51页 |
| 2.2.11 Northern blot杂交实验 | 第51-52页 |
| 2.2.12 Primer Extension实验 | 第52-56页 |
| 2.3 实验结果 | 第56-75页 |
| 2.3.1 质粒表达的外源27S pre-rRNA在酵母体内可以被正常加工为成熟的25S rRNA | 第56-58页 |
| 2.3.2 不同纯化策略的比较 | 第58-61页 |
| 2.3.3 含有不同长度pre-rRNA片段的早期pre-60S颗粒的纯化和质谱分析 | 第61-64页 |
| 2.3.4 早期pre-60S颗粒共转录组装过程中组装因子的组装顺序 | 第64-65页 |
| 2.3.5 早期pre-60S颗粒共转录组装过程中核糖体大亚基蛋白的组装顺序 | 第65-68页 |
| 2.3.6 用pre-rRNA片段纯化的早期pre-60S颗粒中rRNA的加工情况 | 第68-71页 |
| 2.3.7 5S rRNA在早期pre-60S颗粒中的组装时期 | 第71页 |
| 2.3.8 外源pre-rRNA纯化的pre-60S颗粒与内源纯化的pre-60S颗粒之间的比较 | 第71-75页 |
| 2.4 讨论 | 第75-87页 |
| 2.4.1 B位点的剪切与早期pre-60S颗粒共转录组装过程的联系 | 第75-77页 |
| 2.4.2 共转录组装过程中A3因子、B因子的组装顺序 | 第77-78页 |
| 2.4.3 一种比Ssf1颗粒更早期的pre-60S颗粒 | 第78-79页 |
| 2.4.4 蛋白因子组装顺序与ITS区域剪切顺序之间的联系 | 第79页 |
| 2.4.5 酵母共转录组装过程中的核糖体大亚基蛋白 | 第79-82页 |
| 2.4.6 3'ETS区域在早期pre-60S颗粒共转录组装中的作用 | 第82-83页 |
| 2.4.7 90S共转录组装与早期pre-60S共转录组装的比较 | 第83-85页 |
| 2.4.8 真核生物与原核生物核糖体大亚基蛋白组装过程的比较 | 第85-86页 |
| 2.4.9 本论文研究过程中的困难和不足 | 第86-87页 |
| 三、结论与展望 | 第87-88页 |
| 3.1 结论 | 第87页 |
| 3.2 展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 简历 | 第95-96页 |
| 附录 | 第96-108页 |
