| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第15-32页 |
| 1.1 抗菌肽简介 | 第15-29页 |
| 1.1.1 防御素简介 | 第15-19页 |
| 1.1.2 β-防御素简介 | 第19-20页 |
| 1.1.3 绵羊β-防御素简介 | 第20-22页 |
| 1.1.4 LPS与防御素的关系 | 第22-23页 |
| 1.1.5 LPS相关信号通路 | 第23-24页 |
| 1.1.6 MAPK信号通路简介 | 第24-27页 |
| 1.1.7 Toll样受体简介 | 第27-29页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第29-30页 |
| 1.4 技术路线 | 第30-32页 |
| 2 实验一 绵羊输卵管上皮细胞培养及特征鉴定 | 第32-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第33页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第33-35页 |
| 2.1.4.1 输卵管上皮细胞原代培养 | 第33页 |
| 2.1.4.2 输卵管上皮细胞传代培养 | 第33-34页 |
| 2.1.4.3 生长曲线的绘制 | 第34页 |
| 2.1.4.4 细胞免疫荧光 | 第34-35页 |
| 2.2 实验结果 | 第35-36页 |
| 2.2.1 绵羊输卵管上皮细胞的形态观察 | 第35页 |
| 2.2.2 绵羊输卵管上皮细胞的生长曲线 | 第35-36页 |
| 2.2.3 绵羊输卵管上皮细胞的免疫荧光鉴定结果 | 第36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 3 实验二 LPS对绵羊输卵管上皮细胞SBD-1表达的影响 | 第38-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-51页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第38页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第38-40页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第40-51页 |
| 3.1.4.1 绵羊输卵管上皮细胞的培养 | 第40-41页 |
| 3.1.4.2 RNA的提取及其浓度和质量的测定 | 第41-42页 |
| 3.1.4.3 样品反转录及qPCR反应 | 第42-44页 |
| 3.1.4.4 qPCR反应产物的测序 | 第44-45页 |
| 3.1.4.5 SBD-1多克隆抗体的制备 | 第45-50页 |
| 3.1.4.6 绵羊输卵管SBD-1的表达定位 | 第50-51页 |
| 3.1.4.7 LPS对SBD-1基因表达的影响 | 第51页 |
| 3.1.4.8 数据统计与分析 | 第51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-63页 |
| 3.2.1 绵羊输卵管上皮细胞的总RNA检测结果 | 第51-52页 |
| 3.2.2 绵羊输卵管上皮细胞中SBD-1和SBD-2基因的表达情况检测结果 | 第52-56页 |
| 3.2.3 多克隆抗体制备的结果 | 第56-61页 |
| 3.2.4 绵羊输卵管SBD-1蛋白表达定位结果 | 第61-62页 |
| 3.2.5 LPS对绵羊输卵管上皮细胞SBD-1基因表达的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63-65页 |
| 3.4 小结 | 第65-66页 |
| 4 实验三 LPS调控绵羊输卵管上皮细胞SBD-1基因的信号转导机制 | 第66-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第66-68页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第66页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第66页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第66页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.1.4.1 LPS对MAPK信号通路的影响 | 第66-68页 |
| 4.1.4.2 绵羊输卵管P38、JNK和ERK1/2的表达定位 | 第68页 |
| 4.1.4.3 MAPK通路阻断试验 | 第68页 |
| 4.2 实验结果 | 第68-76页 |
| 4.2.1 LPS对MAPK通路的影响 | 第68-72页 |
| 4.2.2 绵羊输卵管P38、JNK和ERK1/2的表达定位 | 第72-75页 |
| 4.2.3 MAPK通路阻断试验 | 第75-76页 |
| 4.3 讨论 | 第76-77页 |
| 4.4 小结 | 第77-78页 |
| 5 实验四 LPS受体检测 | 第78-85页 |
| 5.1 材料与方法 | 第78-80页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第78页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第78页 |
| 5.1.4 实验方法 | 第78-80页 |
| 5.1.4.1 LPS受体TLR4的检测 | 第78-79页 |
| 5.1.4.2 TLR4受体干预试验 | 第79-80页 |
| 5.1.4.3 LPS调控SBD-1表达过程中受体TLR4的作用 | 第80页 |
| 5.2 实验结果 | 第80-83页 |
| 5.2.1 绵羊输卵管上皮细胞LPS受体TLR4的表达情况 | 第80-81页 |
| 5.2.2 TLR4受体干预试验 | 第81-82页 |
| 5.2.3 LPS调控SBD-1表达过程中受体TLR4的作用 | 第82-83页 |
| 5.3 讨论 | 第83-84页 |
| 5.4 小结 | 第84-85页 |
| 6 结论 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 附录 | 第99-101页 |
| 作者简介 | 第101页 |
