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油菜素甾醇信号通路转录因子BES1参与调控独脚金内酯信号所介导的植物分枝

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 综述第8-24页
    1.1 独角金内酯(Strigolactones,SLs)的生物学功能第8-12页
        1.1.1 独脚金内酯能促进寄生植物种子的萌发第8页
        1.1.2 SL能促进丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal fungi,AM)的分支第8-9页
        1.1.3 独脚金内酯是一类具有生物学活性的植物激素第9-12页
    1.2. 植物分枝的调控第12-17页
        1.2.1 植物分枝的产生第12-13页
        1.2.2 生长素对于分枝的调控作用第13-14页
        1.2.3 细胞分裂素对于分枝的调控作用第14-15页
        1.2.4 独脚金内酯对于分枝的调控作用第15页
        1.2.5 三种激素之间的相互关系第15-17页
    1.3 独脚金内酯信号元件的发现及信号通路的确立第17-19页
        1.3.1 SL受体的发现第17-18页
        1.3.2 MAX2是SL信号通路中一个重要的元件第18页
        1.3.3 MAX2底物的发现第18-19页
    1.4 BR信号转导途径的研究进展第19-24页
        1.4.1 BR信号在细胞内的转导第19-22页
        1.4.2 BR信号调控基因表达的关键转录因子第22-24页
第二章 引言第24-25页
第三章 材料与方法第25-39页
    3.1 实验材料第25-28页
        3.1.1 植物材料第25页
        3.1.2 载体质粒第25-26页
        3.1.3 菌株第26页
        3.1.4 抗生素第26页
        3.1.5 工具酶及试剂盒第26-27页
        3.1.6 抗体第27页
        3.1.7 主要的化学试剂第27-28页
        3.1.8 蛋白纯化介质第28页
        3.1.9 实验仪器第28页
    3.2 实验方法第28-39页
        3.2.1 植物材料的培养第28-29页
        3.2.2 植物激素处理第29页
        3.2.3 拟南芥的杂交第29页
        3.2.4 拟南芥基因组DNA的提取第29-30页
        3.2.5 反转录PCR第30页
        3.2.6 荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达第30-31页
        3.2.7 载体的构建第31页
        3.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第31-32页
        3.2.9 质粒的提取第32页
        3.2.10 农杆菌感受态细胞的制备和转化第32-33页
        3.2.11 农杆菌介导的拟南芥转化第33页
        3.2.12 酵母双杂交实验第33-34页
        3.2.13 激光共聚焦显微镜观察拟南芥茎部BES1-GFP蛋白的降解第34页
        3.2.14 融合蛋白的体外表达和纯化第34-35页
        3.2.15 免疫印迹分析BES1蛋白表达第35页
        3.2.16 半体内pull-down实验第35-36页
        3.2.17 免疫共沉淀实验第36页
        3.2.18 质谱鉴定MAX2互作蛋白第36-37页
        3.2.19 BES1泛素化实验第37页
        3.2.20 BES1的半体内降解实验第37-38页
        3.2.21 烟草叶片瞬时转化第38-39页
第四章 结果与分析第39-55页
    4.1 BES1相关突变体的初级分枝数目发生改变第39-40页
    4.2 bes1-D表现出对SL的不敏感第40-41页
    4.3 BR上游元件并不参与SL所介导的植物分枝调控第41-42页
    4.4 MAX2互作蛋白的鉴定第42-43页
    4.5 MAX2与BES1蛋白家族的互作第43-45页
    4.6 BES1与MAX2互作区段的确认第45-46页
    4.7 MAX2介导着BES1蛋白的泛素化第46-47页
    4.8 MAX2介导着BES1蛋白的降解第47-48页
    4.9 GR24不影响MAX2与BES1的互作强度第48-49页
    4.10 GR24促进依赖于MAX2的BES1的降解第49-51页
    4.11 MAX2介导着BZR1蛋白的降解第51-52页
    4.12 AtD14参与BES1蛋白的降解过程第52-53页
    4.13 MAX2与BESl的上位性分析第53页
    4.14 SL的信号转导模型第53-55页
第五章 讨论第55-59页
    5.1 BES1作为MAX2的直接底物参与SL所介导的分枝调控第55-56页
    5.2 BES1通过不同的方式参与到两种信号途径中第56-57页
    5.3 BZR1也是MAX2的底物第57页
    5.4 karrikin与SL信号通路之间的关系第57-59页
第六章 结论和展望第59-60页
    6.1 研究特色与创新之处第59页
    6.2 结论第59页
    6.3 展望第59-60页
参考文献第60-72页
附录第72-83页
    附录1 本论文中用到的引物第72-76页
    附录2 常用试剂和缓冲液配方第76-81页
    附录3 常用培养基配方第81-83页
致谢第83-84页

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