| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第18-20页 |
| 第二章 文献综述 | 第20-40页 |
| 第一节 氟骨症相关概述 | 第20-25页 |
| 1.1 氟和氟中毒 | 第20页 |
| 1.2 氟斑牙 | 第20-21页 |
| 1.3 氟骨症和骨转换 | 第21-22页 |
| 1.4 氟骨症的研究进展 | 第22-25页 |
| 第二节 骨代谢及其相关因子研究 | 第25-32页 |
| 2.1 骨的生理重建 | 第25-26页 |
| 2.2 骨髓间充质干细胞 | 第26页 |
| 2.3 骨细胞 | 第26-27页 |
| 2.4 成骨细胞相关概念 | 第27-28页 |
| 2.5 破骨细胞相关概念 | 第28-29页 |
| 2.6 OPG/RANKL/RANK系统 | 第29-30页 |
| 2.7 成骨细胞与破骨细胞相互作用 | 第30-32页 |
| 第三节 TGF-β1 相关及其信号通路研究进展 | 第32-38页 |
| 3.1 TGF-β 信号研究进展及其生物学作用 | 第32-33页 |
| 3.1.1 TGF-β 及其生物学作用 | 第32页 |
| 3.1.2 TGF-β1 在骨转化中的作用 | 第32-33页 |
| 3.2 TGF-β1 相关因子及其抑制剂 | 第33-35页 |
| 3.2.1 Smads蛋白 | 第33-34页 |
| 3.2.2 丝裂原活化蛋白激酶MAPK | 第34-35页 |
| 3.2.3 TGF-β1 受体抑制剂SB431542 | 第35页 |
| 3.3 TGF-β1 信号通路与骨转换相关研究进展 | 第35-38页 |
| 3.3.1 TGF-β1 与Smad2/3 信号通路 | 第36-37页 |
| 3.3.2 TGF-β1 与MAPK信号通路 | 第37-38页 |
| 第四节 研究设想和意义 | 第38-40页 |
| 第三章 实验研究 | 第40-94页 |
| 第一节 氟骨症动物模型实验 | 第40-59页 |
| 1.1 实验材料 | 第40-42页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第40-41页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第41-42页 |
| 1.1.4 实验器械耗材 | 第42页 |
| 1.2 实验方法 | 第42-48页 |
| 1.2.1 氟中毒动物模型的制备 | 第42-43页 |
| 1.2.2 大鼠骨密度检测 | 第43页 |
| 1.2.3 大鼠骨病理学检测 | 第43-45页 |
| 1.2.4 氟中毒大鼠骨组织相关基因的表达分析 | 第45-47页 |
| 1.2.5 氟中毒大鼠血清成骨、破骨因子表达水平检测 | 第47页 |
| 1.2.6 统计学处理 | 第47-48页 |
| 1.3 实验结果 | 第48-57页 |
| 1.3.1 大鼠体重变化趋势 | 第48-49页 |
| 1.3.2 染氟联合SB431542处理大鼠氟斑牙情况 | 第49-50页 |
| 1.3.3 大鼠骨密度分析 | 第50-51页 |
| 1.3.4 骨组织切片染色 | 第51-54页 |
| 1.3.4.1 骨组织切片HE染色 | 第51-52页 |
| 1.3.4.2 大鼠骨组织抗Smad3免疫组化染色 | 第52-53页 |
| 1.3.4.3 大鼠骨组织抗OCN免疫组化染色 | 第53-54页 |
| 1.3.5 实时定量PCR分析大鼠相关基因表达 | 第54-56页 |
| 1.3.6 染氟联合SB431542处理大鼠血清内PINP和CTX的表达变化 | 第56-57页 |
| 1.4 小结 | 第57-59页 |
| 第二节 细胞染氟培养体外研究实验 | 第59-94页 |
| 第一部分 RAW264.7 细胞染氟实验 | 第59-65页 |
| 2.1.1 实验用细胞 | 第59页 |
| 2.1.2 实验仪器及试剂 | 第59-60页 |
| 2.1.3 MTT实验方法 | 第60-61页 |
| 2.1.4 RAW264.7 细胞骨吸收实验 | 第61-62页 |
| 2.1.5 统计学处理 | 第62页 |
| 2.1.6 实验结果 | 第62-64页 |
| 2.1.6.1 染氟联合SB431542对RAW264.7 细胞增殖活性的影响 | 第62-63页 |
| 2.1.6.2 骨吸收陷窝结果 | 第63-64页 |
| 2.1.7 小结 | 第64-65页 |
| 第二部分 MC3T3-E1细胞染氟实验 | 第65-75页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第65页 |
| 2.2.2 实验仪器及试剂 | 第65-66页 |
| 2.2.3 MTT实验方法 | 第66页 |
| 2.2.4 MC3T3-E1细胞mi RNA分析 | 第66-67页 |
| 2.2.5 统计学处理 | 第67页 |
| 2.2.6 实验结果 | 第67-73页 |
| 2.2.6.1 染氟联合SB431542对MC3T3-E1细胞增殖活性影响 | 第67-68页 |
| 2.2.6.2 染氟MC3T3-E1细胞miRNA分析 | 第68-73页 |
| 2.2.7 小结 | 第73-75页 |
| 第三部分 染氟骨髓间充质干细胞体外实验研究 | 第75-94页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第75-77页 |
| 2.3.1.1 实验用细胞 | 第75页 |
| 2.3.1.2 实验仪器 | 第75-76页 |
| 2.3.1.3 实验试剂 | 第76-77页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第77-86页 |
| 2.3.2.1 BMSCs原代分离提取、传代及矿化诱导 | 第77-78页 |
| 2.3.2.2 MTT检测染氟联合SB431542处理细胞增殖活性 | 第78页 |
| 2.3.2.3 钙钴法检测细胞碱性磷酸酶活性 | 第78-80页 |
| 2.3.2.4 茜素红染色 | 第80页 |
| 2.3.2.5 免疫细胞化学染色 | 第80-81页 |
| 2.3.2.6 PCR检测相关基因表达情况 | 第81-83页 |
| 2.3.2.7 Western Blot检测BMSCs细胞中相关蛋白的表达 | 第83-86页 |
| 2.3.2.8 统计学处理 | 第86页 |
| 2.3.3 实验结果 | 第86-92页 |
| 2.3.3.1 氟联合SB431542处理BMSCs细胞增殖活性变化情况 | 第86-87页 |
| 2.3.3.2 氟联合SB431542处理BMSCs碱性磷酸酶活性变化 | 第87页 |
| 2.3.3.3 氟联合SB431542处理BMSCs钙盐沉积情况变化 | 第87-88页 |
| 2.3.3.4 抗OCN免疫细胞化学染色 | 第88-89页 |
| 2.3.3.5 实时定量PCR分析细胞相关基因表达 | 第89-91页 |
| 2.3.3.6 Western blot分析细胞相关蛋白表达 | 第91-92页 |
| 2.3.4 小结 | 第92-94页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第94-100页 |
| 第五章 课题创新性 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
| 学期间取得的科研成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
