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CREB在前列腺癌细胞增殖与凋亡中的作用

缩略语表第6-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-14页
前言第15-16页
文献回顾第16-32页
第一部分 CREB及p-CREB在前列腺癌组织及不同前列腺细胞系中的表达及可能的功能第32-52页
    1 材料第32-36页
        1.1 组织芯片第32页
        1.2 细胞系第32页
        1.3 相关试剂第32-33页
        1.4 缓冲液第33-35页
        1.5 相关仪器第35-36页
    2 方法第36-39页
        2.1 不同前列腺组织芯片免疫组化染色第36页
        2.2 人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1、前列腺癌细胞PC3及LNCap的培养第36-37页
        2.3 三种不同细胞系的免疫细胞化学染色第37-38页
        2.4 Western blotting检测三种不同细胞系的增殖水平(PCNA表达水平)第38-39页
        2.5 统计学分析第39页
    3 结果第39-50页
        3.1 CREB在不同前列腺组织中的表达情况第39-42页
        3.2 p-CREB在不同前列腺组织中的表达情况第42-48页
        3.3 CREB在不同前列腺细胞中的表达情况第48-49页
        3.4 p-CREB在不同前列腺细胞中的表达情况第49页
        3.5 Western blotting检测CREB及p-CREB在WPMY-1、PC3及LNCap细胞中的表达第49-50页
    4 讨论第50-52页
第二部分 CREB在前列腺癌细胞增殖与凋亡中的作用第52-71页
    1 材料第52-54页
        1.1 感受态菌株第52页
        1.2 细胞系第52页
        1.3 相关试剂第52-53页
        1.4 培养基(液)及缓冲液第53页
        1.5 相关仪器第53-54页
    2 方法第54-61页
        2.1 E.coli JM109感受态的制备第54页
        2.2 LNCap细胞的总RNA提取第54页
        2.3 反转录合成cDNA第54-55页
        2.4 PCR扩增CREB基因编码区第55页
        2.5 产物琼脂糖凝胶电泳分离及胶回收第55-56页
        2.6 将DNA回收产物和pcDNA3.1 质粒连接重组第56-57页
        2.7 重组质粒pcDNA3.1-CREB的扩增和鉴定第57页
        2.8 重组质粒pcDNA3.1-CREB的转染第57-58页
        2.9 转染CREB-siRNA第58页
        2.10 检测CREB转染效率第58-59页
        2.11 CCK-8 试剂盒检测细胞增殖水平第59页
        2.12 TUNEL染色检测细胞凋亡第59-60页
        2.13 统计学分析第60-61页
    3 结果第61-69页
        3.1 重组质粒pcDNA3.1-CREB的鉴定结果第61-63页
        3.2 转染重组质粒pcDNA3.1-CREB对前列腺癌细胞增殖水平的影响第63-66页
        3.3 转染CREB-siRNA对前列腺癌细胞增殖水平的影响第66-67页
        3.4 转染pcDNA3.1-CREB及CREB-siRNA对前列腺癌细胞凋亡的影响第67-68页
        3.5 转染pcDNA3.1-CREB及CREB-siRNA影响前列腺癌细胞凋亡的可能机制第68-69页
    4 讨论第69-71页
第三部分 CREB在TAM相关的前列腺癌细胞生长中的作用第71-80页
    1 材料第71-72页
        1.1 细胞系第71页
        1.2 相关试剂第71-72页
        1.3 相关仪器第72页
    2 方法第72-74页
        2.1 血液单核细胞系THP-1 的培养及其巨噬细胞诱导第72页
        2.2 诱导巨噬细胞向M1及M2型分化第72-73页
        2.3 收集M1及M2型巨噬细胞条件性培养基第73页
        2.4 M1及M2型巨噬细胞条件性培养基刺激前列腺癌细胞第73页
        2.5 Western blotting第73页
        2.6 免疫细胞化学染色第73-74页
        2.7 CCK-8 试剂盒检测细胞增殖水平第74页
        2.8 统计学分析第74页
    3 结果第74-79页
        3.1 鉴定血液单核细胞系THP-1 向巨噬细胞的诱导第74-75页
        3.2 鉴定巨噬细胞向M1及M2表型诱导第75-76页
        3.3 M2型巨噬细胞条件性培养基对前列腺癌细胞生长的影响第76-77页
        3.4 CREB在M2型巨噬细胞条件性培养基促进前列腺癌细胞生长中的作用第77-79页
    4 讨论第79-80页
小结第80-81页
参考文献第81-93页
个人简历和研究成果第93-94页
致谢第94页

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