摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第6-8页 |
第一章 实验材料 | 第8-11页 |
1.1 实验器材 | 第8页 |
1.2 配方及试剂 | 第8-9页 |
1.3 实验动物 | 第9-10页 |
1.4 样本 | 第10页 |
1.5 常用软件及数据库 | 第10-11页 |
第二章 实验方法 | 第11-20页 |
2.1 小鼠体重、体长及脏器周围脂肪重量的测定 | 第11页 |
2.2 鼠尾DNA的鉴定 | 第11-12页 |
2.3 粪便样品的处理及肠道细菌总DNA的提取 | 第12-13页 |
2.4 质粒构建 | 第13-14页 |
2.4.1 感受态、载体、引物及测序 | 第13页 |
2.4.2 目的片段的扩增 | 第13页 |
2.4.3 PCR产物的回收 | 第13-14页 |
2.4.4 基因克隆文库的构建及测序 | 第14页 |
2.4.4.1 连接反应 | 第14页 |
2.4.4.2 质粒转化、阳性克隆的挑选及送测 | 第14页 |
2.5 血清相关指标的测定 | 第14-15页 |
2.5.1 血糖(BG)的测定 | 第14-15页 |
2.5.2 甘油三酯(TG)的测定 | 第15页 |
2.5.3 总胆固醇(TC)的测定 | 第15页 |
2.6 RNA提取 | 第15-16页 |
2.7 实时荧光定量PCR | 第16-17页 |
2.7.1 肠道菌群的实时定量 | 第16-17页 |
2.7.2 下丘脑饮食相关基因的实时定量 | 第17页 |
2.8 Western Blot检测LC3和P62蛋白表达 | 第17-19页 |
2.8.1 蛋白样品的制备 | 第17页 |
2.8.2 Western Blot | 第17-19页 |
2.8.2.1 SDS-电泳 | 第17-18页 |
2.8.2.2 电转 | 第18页 |
2.8.2.3 免疫反应 | 第18-19页 |
2.8.2.4 化学发光、显影、定影 | 第19页 |
2.9 数据处理 | 第19-20页 |
第三章 实验结果 | 第20-26页 |
3.1 鼠尾DNA鉴定结果 | 第20页 |
3.2 体重/体长分析结果 | 第20-21页 |
3.3 血糖及血清的相关指标 | 第21-22页 |
3.4 脏器周围脂肪重量的测定结果 | 第22页 |
3.5 肠道益生菌测定分析结果 | 第22-23页 |
3.6 下丘脑饮食相关基因的mRNA相对表达量分析 | 第23-24页 |
3.7 自噬相关基因LC3和P62在小肠组织中的表达 | 第24-26页 |
第四章 讨论 | 第26-29页 |
结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-35页 |
综述 | 第35-42页 |
综述参考文献 | 第39-42页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |