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内源性ω-3 PUFAs增加对小鼠体重及肠道益生菌的影响

摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-8页
第一章 实验材料第8-11页
    1.1 实验器材第8页
    1.2 配方及试剂第8-9页
    1.3 实验动物第9-10页
    1.4 样本第10页
    1.5 常用软件及数据库第10-11页
第二章 实验方法第11-20页
    2.1 小鼠体重、体长及脏器周围脂肪重量的测定第11页
    2.2 鼠尾DNA的鉴定第11-12页
    2.3 粪便样品的处理及肠道细菌总DNA的提取第12-13页
    2.4 质粒构建第13-14页
        2.4.1 感受态、载体、引物及测序第13页
        2.4.2 目的片段的扩增第13页
        2.4.3 PCR产物的回收第13-14页
        2.4.4 基因克隆文库的构建及测序第14页
            2.4.4.1 连接反应第14页
            2.4.4.2 质粒转化、阳性克隆的挑选及送测第14页
    2.5 血清相关指标的测定第14-15页
        2.5.1 血糖(BG)的测定第14-15页
        2.5.2 甘油三酯(TG)的测定第15页
        2.5.3 总胆固醇(TC)的测定第15页
    2.6 RNA提取第15-16页
    2.7 实时荧光定量PCR第16-17页
        2.7.1 肠道菌群的实时定量第16-17页
        2.7.2 下丘脑饮食相关基因的实时定量第17页
    2.8 Western Blot检测LC3和P62蛋白表达第17-19页
        2.8.1 蛋白样品的制备第17页
        2.8.2 Western Blot第17-19页
            2.8.2.1 SDS-电泳第17-18页
            2.8.2.2 电转第18页
            2.8.2.3 免疫反应第18-19页
            2.8.2.4 化学发光、显影、定影第19页
    2.9 数据处理第19-20页
第三章 实验结果第20-26页
    3.1 鼠尾DNA鉴定结果第20页
    3.2 体重/体长分析结果第20-21页
    3.3 血糖及血清的相关指标第21-22页
    3.4 脏器周围脂肪重量的测定结果第22页
    3.5 肠道益生菌测定分析结果第22-23页
    3.6 下丘脑饮食相关基因的mRNA相对表达量分析第23-24页
    3.7 自噬相关基因LC3和P62在小肠组织中的表达第24-26页
第四章 讨论第26-29页
结论第29-30页
参考文献第30-35页
综述第35-42页
    综述参考文献第39-42页
攻读学位期间的研究成果第42-43页
致谢第43-44页

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