| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 骨骼肌的基本结构及其发育调控 | 第12-14页 |
| 1.2 骨骼肌卫星细胞的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 micro RNA的研究进展概述 | 第15-16页 |
| 1.3.1 micro RNA的发现 | 第15页 |
| 1.3.2 micro RNA的发生 | 第15页 |
| 1.3.3 micro RNA调控基因的表达机制 | 第15-16页 |
| 1.3.4 micro RNA的功能 | 第16页 |
| 1.4 骨骼肌发育与micro RNA | 第16-17页 |
| 1.5 miR-103的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌株、质粒与细胞 | 第20页 |
| 2.1.2 工具酶、试剂盒和其他试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.2.1 细胞总RNA提取和反转录 | 第22-24页 |
| 2.2.2 细胞基因组DNA的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 实时定量PCR | 第25页 |
| 2.2.4 pc DNA3.1-miR-103载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.5 重组质粒瞬时转染牛骨骼肌卫星细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.6 EDU检测重组质粒对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.7 免疫荧光检测牛骨骼肌卫星细胞分化阶段的Myo G基因的表达量 | 第30页 |
| 2.2.8 Dual-Luciferase双报告基因检测启动子活性及特异性 | 第30-31页 |
| 2.2.9 统计分析 | 第31页 |
| 2.2.10 Q-PCR检测三种重组质粒转染细胞后相关基因的表达变化 | 第31-32页 |
| 2.2.11 Western Blot检测转染后相关基因蛋白的表达变化 | 第32-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| 3.1 牛骨骼肌卫星细胞的诱导分化结果 | 第35页 |
| 3.2 miR-103在牛骨骼肌卫星细胞分化过程中的表达 | 第35-36页 |
| 3.3 miR-103过表达载体的构建及鉴定 | 第36-37页 |
| 3.4 miR-103对骨骼肌卫星细胞增殖的影响 | 第37-38页 |
| 3.5 miR-103对骨骼肌卫星细胞分化的影响 | 第38-40页 |
| 3.6 生物信息学分析 | 第40页 |
| 3.7 miR-103对CCNE1基因的表达调控 | 第40-44页 |
| 3.7.1 双荧光素酶载体的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| 3.7.2 双荧光素酶实验检测miR-103对CCNE1的启动子活性的影响 | 第42-43页 |
| 3.7.3 实时定量PCR和Western blot检测miR-103对CCNE1的影响 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
