| 摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 哺乳动物早期胚胎发育概述 | 第14-17页 |
| 1.1.1 小鼠早期胚胎发育进程的概述 | 第14-15页 |
| 1.1.2 小鼠着床前胚胎发育滋养层与内细胞团分化概述 | 第15-17页 |
| 1.2 小鼠着床前胚胎发育滋养层与内细胞团分化机理 | 第17-20页 |
| 1.2.1 小鼠胚胎滋养层与内细胞团分化的重要转录因子 | 第17-19页 |
| 1.2.2 ROCK和Hippo通路对小鼠滋养层和内细胞团分化的调控 | 第19-20页 |
| 1.3 猪早期胚胎发育滋养层与内细胞团分化研究现状 | 第20-23页 |
| 1.3.1 猪滋养层与内细胞团分化的研究现状 | 第20-21页 |
| 1.3.2 猪胚胎体外基础培养体系的概况 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 组织材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 猪体外各时期卵母细胞/胚胎的获取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 猪各时期体内胚胎的获取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 小鼠体内各时期卵母细胞/胚胎的获取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 免疫荧光 | 第27-28页 |
| 2.2.5 蛋白质免疫印记杂交 | 第28-29页 |
| 2.2.6 胚胎体外培养、处理及检测 | 第29页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀 | 第29-30页 |
| 2.2.8 猪胚胎RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.9 猪CDX2和OCT4编码区克隆 | 第31-32页 |
| 2.2.10实验数据分析 | 第32-33页 |
| 2.2.11实验所用引物和抗体汇总 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-51页 |
| 3.1 猪胚层分化标记因子的筛选及其表达模式的追踪 | 第34-40页 |
| 3.1.1 滋养层标记因子CDX2在猪早期胚胎中表达模式的追踪 | 第34-35页 |
| 3.1.2 SOX2在猪囊胚内细胞团中特异性表达 | 第35-36页 |
| 3.1.3 SOX2与CDX2在猪内细胞团和滋养层细胞中显示出相互排斥的表达模式 | 第36-38页 |
| 3.1.4 SOX2特异性表达模式的建立过程与猪滋养层和内细胞团特化过程同时发生 | 第38-39页 |
| 3.1.5 谱系分化相关因子在猪体内胚胎中的时空分布 | 第39-40页 |
| 3.2 利用CDX2和SOX2作为胚层标记评价胎牛血清对猪早期胚胎发育培养体系的影响 | 第40-43页 |
| 3.2.1 FBS提高猪体外胚胎孵化率和囊胚细胞数 | 第41-42页 |
| 3.2.2 FBS促进ICM增殖和进一步分化 | 第42-43页 |
| 3.3 猪着床前胚胎极性建立的延迟导致CDX2起始表达晚于小鼠 | 第43-47页 |
| 3.3.1 CDX2在猪早期胚胎起始表达晚于小鼠 | 第43-44页 |
| 3.3.2 ROCK-YAP信号通路调控CDX2的表达 | 第44-46页 |
| 3.3.3 猪早期胚胎细胞极化发生晚于小鼠 | 第46-47页 |
| 3.4 CDX2和OCT4在猪早期胚胎中的相互作用——在猪早期胚胎中过表达CDX2的研究 | 第47-51页 |
| 3.4.1 CDX2的过表达会导致猪胚胎发育阻滞 | 第47页 |
| 3.4.2 CDX2过表导致胚胎发育阻滞是由于OCT4蛋白的缺失 | 第47-48页 |
| 3.4.3 在猪早期胚胎中CDX2在翻译后水平上抑制OCT4 | 第48-49页 |
| 3.4.4 早期胚胎中CDX2促进OCT4定位从细胞核向胞质转变 | 第49-50页 |
| 3.4.5 CDX2可能通过竞争机制抑制了OCT4对DNA的可触性 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 4.1 猪早期胚层分化分子基础与小鼠中不同 | 第51页 |
| 4.2 SOX2在猪和小鼠多潜能网络调控研究中的意义 | 第51-52页 |
| 4.3 关于FBS对于猪体外胚胎发育胚层分化影响的讨论 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
