| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第15-35页 |
| 1.1 天然免疫概述 | 第15-28页 |
| 1.1.1 Toll-样受体（TLR） | 第15-19页 |
| 1.1.2 TLRs介导的信号通路 | 第19-21页 |
| 1.1.3 RIG-I-样受体 (RLRs) | 第21-22页 |
| 1.1.4 RIG-I/MDA5介导的信号通路 | 第22-23页 |
| 1.1.5 PRRs对自身及病毒核酸的识别 | 第23页 |
| 1.1.6 干扰素转录激活机制 | 第23-25页 |
| 1.1.7 NF-κB途径 | 第25-27页 |
| 1.1.8 病毒逃避天然免疫应答 | 第27-28页 |
| 1.2 猪流行性腹泻（PED）的概述 | 第28-29页 |
| 1.2.1 PED的流行病学特征 | 第28-29页 |
| 1.2.2 PED的临床症状及病理变化 | 第29页 |
| 1.3 PEDV病原学特性 | 第29-30页 |
| 1.3.1 PEDV的分类及理化性质 | 第29-30页 |
| 1.3.2 PEDV的体外培养特性 | 第30页 |
| 1.3.3 PEDV的抗原性 | 第30页 |
| 1.3.4 PEDV的致病机理 | 第30页 |
| 1.4 PEDV的基因组结构特征 | 第30-33页 |
| 1.4.1 S基因和S蛋白 | 第31-32页 |
| 1.4.2 M基因和M蛋白 | 第32页 |
| 1.4.3 N基因和N蛋白 | 第32-33页 |
| 1.4.4 E基因和E蛋白 | 第33页 |
| 1.5 猪小肠上皮细胞 | 第33页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第33-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-47页 |
| 2.1 材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 菌种、毒株、细胞及质粒 | 第35页 |
| 2.1.2 主要试剂、药品、工具酶和抗体 | 第35-36页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-47页 |
| 2.2.1 PEDV的增殖 | 第36-37页 |
| 2.2.2 PEDV感染力（TCID50）的测定 | 第37页 |
| 2.2.3 质粒的构建 | 第37-42页 |
| 2.2.4 siRNA的合成 | 第42页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第42-43页 |
| 2.2.6 荧光定量RT-PCR检测基因m RNA水平 | 第43-44页 |
| 2.2.7 细胞核和细胞质的提取 | 第44页 |
| 2.2.8 组织样品蛋白的提取 | 第44-45页 |
| 2.2.9 Western blot检测目的蛋白 | 第45页 |
| 2.2.10 双荧光素酶检测实验 | 第45页 |
| 2.2.11 免疫组化实验 | 第45-46页 |
| 2.2.12 激光共聚焦显微镜观察 | 第46页 |
| 2.2.13 统计学方法 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-80页 |
| 3.1 PEDV感染猪小肠上皮细胞（IECs） | 第47-48页 |
| 3.2 PEDV感染IECs细胞抑制I型IFN产生分子机制的研究 | 第48-60页 |
| 3.2.1 PEDV感染不能激活I型IFN-β的转录 | 第48-49页 |
| 3.2.2 PEDV感染能激活NF-κB，但是不能诱导IRF-3 的激活 | 第49-51页 |
| 3.2.3 PEDV感染抑制poly(I:C)诱导的IFN-β的表达 | 第51-53页 |
| 3.2.4 PEDV感染抑制poly(I:C)诱导IRF-3 的核易位 | 第53-54页 |
| 3.2.5 PEDV不抑制TBK1/IKKε的激活 | 第54页 |
| 3.2.6 PEDV抑制RIG-I介导的信号通路 | 第54-58页 |
| 3.2.7 PEDV部分抑制TRIF介导的信号通路 | 第58-60页 |
| 3.3 PEDV感染激活NF-κB的分子机制 | 第60-80页 |
| 3.3.1 猪p65基因的扩增 | 第60页 |
| 3.3.2 猪p65基因的重组真核表达质粒的构建 | 第60-61页 |
| 3.3.3 猪p65蛋白结构分析 | 第61页 |
| 3.3.4 P65蛋白系统发生树 | 第61-62页 |
| 3.3.5 猪p65的组织表达差异分析 | 第62-65页 |
| 3.3.6 PEDV感染诱导NF-κB发生核易位 | 第65页 |
| 3.3.7 PEDV激活NF-κB与病毒的剂量及复制密切相关 | 第65-67页 |
| 3.3.8 PEDV感染诱导IκBα蛋白降解 | 第67页 |
| 3.3.9 TLR通路参与PEDV诱导的NF-κB活化 | 第67-69页 |
| 3.3.10 TLR2、TLR3和TLR9通路参与PEDV诱导的NF-κB活化 | 第69-71页 |
| 3.3.11 PEDV编码结构蛋白激活NF-κB的研究 | 第71-80页 |
| 4 讨论 | 第80-85页 |
| 4.1 猪小肠上皮细胞 | 第80-81页 |
| 4.2 PEDV感染IECs抑制IFN-β产生的分子机制 | 第81-82页 |
| 4.3 猪p65基因的克隆及其功能鉴定 | 第82-83页 |
| 4.4 PEDV感染IECs诱导激活NF-κB的分子机制 | 第83-84页 |
| 4.5 PEDV N蛋白在IECs细胞中表达能诱导激活NF-κB | 第84-85页 |
| 5 结论 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-103页 |
| 附录A | 第103-105页 |
| 附录B | 第105-107页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第107页 |
