| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 犊牛腹泻的概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 细菌性腹泻 | 第11-12页 |
| 1.1.2 病毒性腹泻 | 第12页 |
| 1.1.3 寄生虫性腹泻 | 第12页 |
| 1.2 犊牛大肠杆菌性腹泻 | 第12-14页 |
| 1.2.1 病原学 | 第12-13页 |
| 1.2.2 流行病学 | 第13页 |
| 1.2.3 临床症状及病理变化 | 第13-14页 |
| 1.2.4 诊断方法 | 第14页 |
| 1.3 致犊牛腹泻性大肠杆菌主要致病因子 | 第14-19页 |
| 1.3.1 黏附素 | 第14-15页 |
| 1.3.2 肠毒素 | 第15-19页 |
| 1.3.3 志贺毒素 | 第19页 |
| 1.4 大肠杆菌性犊牛腹泻病的预防 | 第19-22页 |
| 1.4.1 药物防治 | 第19-20页 |
| 1.4.2 疫苗免疫 | 第20-21页 |
| 1.4.3 卵黄抗体治疗 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株、载体、实验动物及细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 细菌的分离、鉴定及序列分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2 重组蛋白的表达与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.3 r LT-IIc1重组蛋白的纯化及生物活性检测 | 第27-28页 |
| 2.2.4 LT-II诱导小鼠机体免疫的研究 | 第28-30页 |
| 2.2.5 卵黄抗体的制备 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-51页 |
| 3.1 大肠杆菌的分离、鉴定及序列分析 | 第32-34页 |
| 3.1.1 大肠杆菌的分离培养 | 第32页 |
| 3.1.2 革兰氏染色镜检 | 第32页 |
| 3.1.3 生化鉴定 | 第32页 |
| 3.1.4 LT-II鉴定引物扩增结果 | 第32-33页 |
| 3.1.5 LT-II毒力基因的测序比对结果 | 第33-34页 |
| 3.2 重组蛋白的表达与鉴定 | 第34-37页 |
| 3.2.1 r LT-IIc1重组蛋白的表达与鉴定 | 第34-36页 |
| 3.2.2 LT-IIc1 A、B亚基重组蛋白表达与鉴定 | 第36-37页 |
| 3.3 重组蛋白纯化与生物活性检验 | 第37-39页 |
| 3.4 LT-II诱导小鼠机体免疫的效果测定 | 第39-47页 |
| 3.4.1 免疫小鼠特异性抗体IgG测定 | 第39-42页 |
| 3.4.2 免疫小鼠特异性抗体s Ig A测定 | 第42-45页 |
| 3.4.3 小鼠脾淋巴细胞增殖 | 第45-46页 |
| 3.4.4 体外中和试验结果 | 第46-47页 |
| 3.5 卵黄抗体的制备 | 第47-51页 |
| 3.5.1 间接ELISA方法的建立 | 第47页 |
| 3.5.2 卵黄抗体效价的检测 | 第47-49页 |
| 3.5.3 卵黄抗体的中和价测定结果 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-57页 |
| 4.1 大肠杆菌II型不耐热肠毒 | 第51-52页 |
| 4.2 重组LT-II毒素的构建及纯化 | 第52-53页 |
| 4.3 小鼠免疫效力评价及动物模型建立的可行性分析 | 第53-54页 |
| 4.4 亚单位疫苗的应用前景 | 第54-55页 |
| 4.5 卵黄抗体的抗毒作用及应用前景 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |
