| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略语对照表 | 第8-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-12页 |
| 1.2 结直肠癌研究概况 | 第12-13页 |
| 1.2.1 结直肠癌的流行病学特征 | 第12页 |
| 1.2.2 结直肠癌的发病病因 | 第12-13页 |
| 1.3 全基因组外显子测序技术 | 第13-14页 |
| 1.4 DDI2 | 第14-16页 |
| 1.4.1 DDI2基因 | 第14-15页 |
| 1.4.2 DDI2基因的功能 | 第15-16页 |
| 1.4.3 DDI2与肿瘤的研究进展 | 第16页 |
| 1.5 5-氟尿嘧啶(5-FU) | 第16-18页 |
| 1.6 研究意义与设计 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 sCRC组织样本 | 第20页 |
| 2.1.2 实验细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂及耗材 | 第20-22页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 3例sCRC样本的全基因组外显子测序结果分析筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.2.3 质粒提取 | 第25-27页 |
| 2.2.4 双酶切电泳鉴定目的基因 | 第27-28页 |
| 2.2.5 Lipo2000转染最佳条件的确定 | 第28-29页 |
| 2.2.6 划痕实验 | 第29-31页 |
| 2.2.7 Transwell迁移实验 | 第31-32页 |
| 2.2.8 Transwell侵袭实验 | 第32-33页 |
| 2.2.9 CCK-8细胞增殖实验 | 第33-34页 |
| 2.2.10 克隆形成实验 | 第34-35页 |
| 2.2.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第35页 |
| 2.2.12 5-FU对细胞毒性的检测 | 第35-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-50页 |
| 3.1 全基因组外显子测序结果筛选出sCRC候选基因DDI2 | 第37-38页 |
| 3.2 质粒在LoVo细胞中的转染效率 | 第38-39页 |
| 3.3 质粒双酶切鉴定结果 | 第39-41页 |
| 3.4 DDI2抑制LoVo细胞的迁移能力 | 第41-43页 |
| 3.4.1 划痕实验结果 | 第41-42页 |
| 3.4.2 Transwell迁移实验结果 | 第42-43页 |
| 3.5 DDI2抑制LoVo细胞的侵袭能力 | 第43-44页 |
| 3.6 DDI2抑制LoVo细胞的增殖能力 | 第44-46页 |
| 3.6.1 CCK-8细胞增殖实验结果 | 第44-45页 |
| 3.6.2 克隆形成实验结果 | 第45-46页 |
| 3.7 DDI2对LoVo细胞凋亡能力的影响 | 第46-47页 |
| 3.8 DDI2过表达影响LoVo细胞对5-FU的耐药性 | 第47-50页 |
| 第四章 结论和讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 LoF突变位点与结直肠癌 | 第50-51页 |
| 4.2 DDI2与结直肠癌功能实验研究 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
