| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 蜜蜂三种病毒研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1.1 蜜蜂病害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 蜜蜂病毒的分类及其分子生物学 | 第13-15页 |
| 1.1.3 蜜蜂三种病毒的危害和发病特征 | 第15-17页 |
| 1.1.4 三种病毒的传播 | 第17-19页 |
| 1.1.5 三种病毒病的诊断方法 | 第19页 |
| 1.2 环介导等温扩增技术 | 第19-22页 |
| 1.2.1 LAMP技术原理 | 第20-21页 |
| 1.2.2 LAMP反应特点 | 第21页 |
| 1.2.3 LAMP的应用 | 第21-22页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-34页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂与配制 | 第23-25页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第26-27页 |
| 2.2.2 蜜蜂RNA提取及cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.3 LAMP检测蜜蜂三种病毒方法的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.4 LAMP体系优化 | 第29-31页 |
| 2.2.5 扩增区域的克隆测序 | 第31-34页 |
| 2.2.6 敏感性和特异性试验验证 | 第34页 |
| 2.2.7 临床样本的检测 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-56页 |
| 3.1 应用LAMP检测BQCV的研究结果 | 第34-42页 |
| 3.1.1 BQCV-LAMP反应体系的优化 | 第34-35页 |
| 3.1.2 BQCV-LAMP外引物的PCR反应与鉴定 | 第35-37页 |
| 3.1.3 LAMP与PCR的敏感性对比试验 | 第37-38页 |
| 3.1.4 可视化LAMP的特异性试验 | 第38-39页 |
| 3.1.5 临床样本的检测 | 第39-42页 |
| 3.2 应用LAMP检测SBV的研究结果 | 第42-49页 |
| 3.2.1 SBV-LAMP反应体系的优化 | 第42-44页 |
| 3.2.2 SBV-LAMP外引物的PCR反应与鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.3 LAMP与PCR的敏感性对比试验 | 第45-46页 |
| 3.2.4 可视化LAMP的特异性试验 | 第46-47页 |
| 3.2.5 临床样本的检测 | 第47-49页 |
| 3.3 应用LAMP检测DWV的研究结果 | 第49-56页 |
| 3.3.1 DWV-LAMP反应体系的优化 | 第49-51页 |
| 3.3.2 DWV-LAMP外引物的PCR反应与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.3.3 LAMP与PCR的敏感性对比试验 | 第52-53页 |
| 3.3.4 可视化LAMP的特异性试验 | 第53-54页 |
| 3.3.5 临床样本的检测 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 关于LAMP引物设计的讨论 | 第56-57页 |
| 4.2 关于LAMP体系优化 | 第57-58页 |
| 4.3 关于LAMP产物验证 | 第58页 |
| 4.4 关于LAMP结果观察 | 第58-59页 |
| 4.5 BQCV-LAMP、SBV-LAMP、DWV-LAMP体系的优势 | 第59-60页 |
| 4.6 本研究的展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
