| 内容摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 研究背景及文献综述 | 第13-32页 |
| 第一节 RAS蛋白与肿瘤 | 第13-17页 |
| 1.1 RAS蛋白 | 第13-15页 |
| 1.2 靶向RAS蛋白的药物研发 | 第15-17页 |
| 第二节 RAS突变细胞及动物模型 | 第17-24页 |
| 2.1 RAS突变细胞模型 | 第18-20页 |
| 2.2 RAS突变动物模型 | 第20-24页 |
| 2.3 RAS突变模型在药物研发中的应用 | 第24页 |
| 第三节 基因编辑技术的研究进展 | 第24-31页 |
| 3.1 基因编辑技术的发展 | 第24-25页 |
| 3.2 TALENs技术 | 第25-26页 |
| 3.3 CRISPR/Cas系统 | 第26-28页 |
| 3.4 腺病毒 | 第28-29页 |
| 3.5 腺相关病毒 | 第29-31页 |
| 第四节 研究内容及意义 | 第31-32页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第32-53页 |
| 第一节 实验材料 | 第32-41页 |
| 1.1 实验试剂 | 第32-34页 |
| 1.2 实验材料 | 第34页 |
| 1.3 实验仪器 | 第34-36页 |
| 1.4 实验试剂配制方法 | 第36-41页 |
| 第二节 实验方法 | 第41-53页 |
| 2.1 分子克隆 | 第41-45页 |
| 2.2 腺相关病毒的包装及纯化 | 第45-46页 |
| 2.3 单克隆的挑取 | 第46-47页 |
| 2.4 蛋白质印迹法 | 第47-48页 |
| 2.5 免疫沉淀实验 | 第48-49页 |
| 2.6 磺酰罗丹明染色法 | 第49-50页 |
| 2.7 细胞克隆形成实验 | 第50页 |
| 2.8 细胞周期实验 | 第50-52页 |
| 2.9 统计学分析 | 第52-53页 |
| 第三章 实验结果 | 第53-79页 |
| 第一节 KRAS突变型细胞株的构建 | 第53-64页 |
| 1.1 腺相关病毒重组表达质粒的构建 | 第53-57页 |
| 1.2 KRAS突变型细胞株的鉴定 | 第57-60页 |
| 1.3 KRAS点突变对KRAS-GTP的影响 | 第60-61页 |
| 1.4 KRAS点突变对下游信号通路的影响 | 第61-62页 |
| 1.5 不同KRAS点突变对KRAS-GTP及下游信号通路的影响 | 第62-63页 |
| 1.6 小结 | 第63-64页 |
| 第二节 KRAS突变型细胞株的生长差异 | 第64-72页 |
| 2.1 KRAS点突变对细胞存活的影响 | 第64-66页 |
| 2.2 KRAS点突变促进细胞克隆形成 | 第66-67页 |
| 2.3 KRAS点突变对细胞周期的影响 | 第67-70页 |
| 2.4 KRAS点突变对细胞增殖的影响 | 第70-71页 |
| 2.5 KRAS突变型细胞中周期蛋白及其激酶的变化 | 第71-72页 |
| 2.6 小结 | 第72页 |
| 第三节 KRAS突变型细胞对药物的响应 | 第72-79页 |
| 3.1 小分子抑制剂的确定 | 第72-73页 |
| 3.2 KRAS突变型细胞在药物敏感性上的研究 | 第73-75页 |
| 3.3 KRAS突变型细胞在药物组合上的研究 | 第75-77页 |
| 3.4 小结 | 第77-79页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第79-83页 |
| 第一节 全文总结 | 第79-80页 |
| 第二节 全文讨论 | 第80-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 附录Ⅰ 插图清单 | 第92-94页 |
| 附录Ⅱ 缩略词表 | 第94-95页 |
| 附录Ⅲ 硕士期间参与课题及发表文章 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |