摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第10-15页 |
第一章:新型何首乌药肝模型的建立 | 第15-26页 |
1 | 第15-17页 |
1.1 试剂 | 第15页 |
1.2 器材 | 第15页 |
1.3 实验动物 | 第15-16页 |
1.4 实验分组与方法 | 第16页 |
1.5 解剖病理学检查 | 第16-17页 |
1.6 统计学分析 | 第17页 |
2 结果 | 第17-25页 |
2.1 经LPS诱导后,PMT对SD大鼠体重的影响 | 第17-18页 |
2.2 经LPS诱导后,PMT对大鼠肝脏系数的影响 | 第18-19页 |
2.3 经LPS诱导后,PMT对大鼠血清,生化和血常规的检测 | 第19-22页 |
2.4 经LPS诱导后,PMT引起大鼠肝脏损伤 | 第22-25页 |
3 讨论 | 第25页 |
4 结论 | 第25-26页 |
第二章:何首乌醇提液经LPS激活对大鼠肝脏CYP450酶的影响 | 第26-53页 |
1 | 第26-38页 |
1.1 主要试剂 | 第26-27页 |
1.2 主要仪器 | 第27页 |
1.3 主要试剂配制 | 第27-30页 |
1.4 动物肝脏组织S9组分制备 | 第30页 |
1.5 细胞色素CYPs亚酶活性检测步骤 | 第30-33页 |
1.6 RNA样本制备方法 | 第33-34页 |
1.7 RNA完整性检测 | 第34-35页 |
1.8 RNA纯度及浓度的测定 | 第35页 |
1.9 反转录体系合成c DNA步骤 | 第35-36页 |
1.10 Real-time PCR步骤 | 第36-37页 |
1.11 动物肝脏组织蛋白样品的制备 | 第37页 |
1.12 Western-bloting实验步骤 | 第37-38页 |
1.13 统计学分析 | 第38页 |
2 结果 | 第38-51页 |
2.1 LPS诱导PMT对肝脏CYP1A2、CYP2E1和CYP3A1酶活性的影响 | 第38-41页 |
2.1.1 荧光法检测CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1酶活性结果 | 第38-40页 |
2.1.2 CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1酶活性相互比较 | 第40-41页 |
2.2 LPS诱导PMT对肝脏CYP1A2、CYP2E1和CYP3A1 m RNA的影响 | 第41-48页 |
2.2.1 检测RNA完整性 | 第41-42页 |
2.2.2 内参基因引物特异性分析 | 第42页 |
2.2.3 内参基因PCR循环反应曲线 | 第42-43页 |
2.2.4 目的基因引物特异性分析 | 第43-44页 |
2.2.5 目的基因PCR循环反应曲线 | 第44-45页 |
2.2.6 RT-PCR检测CYP1A2 m RNA相对表达量结果 | 第45-46页 |
2.2.7 RT-PCR检测CYP2E1 m RNA相对表达量结果 | 第46-47页 |
2.2.8 RT-PCR检测CYP3A1 m RNA相对表达量结果 | 第47-48页 |
2.3 LPS诱导PMT对肝脏CYP1A2、CYP2E1和CYP3A1蛋白表达影响 | 第48-51页 |
2.3.1 Western-Blot检测CYP1A2蛋白表达结果 | 第48-49页 |
2.3.2 Western-Blot检测CYP2E1蛋白表达结果 | 第49-50页 |
2.3.3 Western-Blot检测CYP3A1蛋白表达结果 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
4 结论 | 第52-53页 |
第三章:何首乌醇提液经LPS诱导对肝损伤中TLR4下游信号通路机制研究 | 第53-70页 |
1 材料与方法 | 第54-55页 |
1.1 试剂 | 第54页 |
1.3 Western-bloting法实验步骤 | 第54页 |
1.4 Real-time PCR实验步骤 | 第54-55页 |
1.5 统计学分析 | 第55页 |
2 结果 | 第55-68页 |
2.1 LPS诱导PMT对肝脏TLR4下游信号通路m RNA表达的影响 | 第55-63页 |
2.1.1 内参基因引物特异性分析 | 第56页 |
2.1.2 内参基因PCR循环反应曲线 | 第56-57页 |
2.1.3 目的基因引物特异性分析 | 第57-58页 |
2.1.4 目的基因PCR循环反应曲线 | 第58页 |
2.1.5 RT-PCR检测My D8、NF-k B相对表达量结果 | 第58-61页 |
2.1.6 RT-PCR检测TRIF、TRF-3 m RNA相对表达量结果 | 第61-63页 |
2.2 LPS诱导PMT对肝脏TLR4下游信号通路蛋白表达的影响 | 第63-68页 |
2.2.1 Western-blot检测TRL4、My D8、NF-k B蛋白表达结果 | 第63-66页 |
2.2.2 Western-blot检测TRIF、IRF-3 蛋白表达结果 | 第66-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
4 结论 | 第69-70页 |
总结与展望 | 第70-72页 |
附录: 缩略词 | 第72-74页 |
发表的论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |