| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 主要缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-18页 |
| 1.1 弓形虫的致病机制 | 第14-15页 |
| 1.2 Prx的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3 细胞凋亡的机制和诱导因素 | 第16页 |
| 1.4 弓形虫感染抑制细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第17-18页 |
| 第二章 弓形虫PRX基因的原核表达及鉴定 | 第18-36页 |
| 2.1 实验仪器和材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 相关试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2.1.5 菌株和载体 | 第22页 |
| 2.1.6 细胞和虫体 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 He La细胞系的传代培养和虫体的传代培养 | 第22页 |
| 2.2.2 弓形虫Prx基因的扩增 | 第22-24页 |
| 2.2.3 重组载体Prx/p TG19-T的构建和鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.4 重组表达载体Prx/p ET-28a（+）的构建与鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.5 重组蛋白的诱导表达和可溶性分析 | 第28页 |
| 2.2.6 重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.7 兔多克隆抗体的制备和鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 弓形虫Prx基因扩增结果 | 第30-31页 |
| 2.3.2 重组Prx/p TG19-T质粒的鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 重组质粒Prx/p ET-28a（+）的双酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.4 重组蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.3.5 重组蛋白的纯化 | 第33页 |
| 2.3.6 多克隆抗体的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 弓形虫P3×FLAG-MYC-CMVTM24PRX在HEPG2细胞中表达 | 第36-46页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 细胞株和菌株 | 第36-37页 |
| 3.1.5 相关试剂的配制 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 弓形虫Prx基因的扩增 | 第37页 |
| 3.2.2 重组载体Prx/p TG19-T的构建与鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.3 重组表达载体Prx/p3×FLAG-Myc-CMVTM-24 的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.4 真核表达质粒Prx/p3×FLAG-Myc-CMVTM-24 的大量提取 | 第39-40页 |
| 3.2.5 Hep G2细胞的复苏和传代 | 第40-41页 |
| 3.2.6 p3×FLAG-Myc-CMVTM24Prx转染Hep G2细胞 | 第41-42页 |
| 3.2.7 Western blotting技术检测Prx的表达 | 第42页 |
| 3.3 结果 | 第42-44页 |
| 3.3.1 弓形虫Prx基因扩增结果 | 第42-43页 |
| 3.3.2 重组载体Prx/p TG19-T的单酶切鉴定结果 | 第43页 |
| 3.3.3 重组真核表达质粒Prx/p3×FLAG-Myc-CMVTM-24 的双酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 Western blotting技术检测Prx在Hep G2细胞中的表达 | 第44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 弓形虫PRX体外抗氧化研究 | 第46-56页 |
| 4.1 实验仪器和材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第47页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第47页 |
| 4.1.4 试剂配制 | 第47页 |
| 4.1.5 细胞 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 Hep G2细胞的复苏和传代 | 第47页 |
| 4.2.2 Hep G2细胞的转染与凋亡诱导 | 第47-48页 |
| 4.2.3 Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡 | 第48-49页 |
| 4.2.4 细胞ROS检测 | 第49页 |
| 4.2.5 数据统计 | 第49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-52页 |
| 4.3.1 Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率的结果 | 第49页 |
| 4.3.2 细胞ROS检测的结果 | 第49-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-56页 |
| 结论与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 在学期间发表的学术论文及参加课题： | 第68-69页 |
