| 英文缩略词 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 第一部分 内含H7N9禽流感病毒mRNA的MS2噬菌体病毒样颗粒用于病毒核酸检测室间质量评价的研究 | 第13-63页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 1. 材料和方法 | 第14-37页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第14-22页 |
| 1.2. 方法 | 第22-37页 |
| 1.2.1. 内含HA、NA、MP和NP mRNA序列的重组病毒样颗粒原核表达载体的构建 | 第22-29页 |
| 1.2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第29-32页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第32-35页 |
| 1.2.4. 重组病毒样颗粒的耐酶性实验 | 第35页 |
| 1.2.5. 重组病毒样颗粒的稳定性评价 | 第35-36页 |
| 1.2.6. 以重组病毒样颗粒作为质评样本的室间质量评价 | 第36-37页 |
| 1.2.7. 统计学分析 | 第37页 |
| 2. 结果 | 第37-56页 |
| 2.1. 内含HA、NA、MP和NP mRNA序列的重组病毒样颗粒原核表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第40-42页 |
| 2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第42-47页 |
| 2.3.1. 琼脂糖凝胶电泳鉴定重组病毒样颗粒 | 第42-43页 |
| 2.3.2. SDS-PAGE鉴定重组病毒样颗粒 | 第43页 |
| 2.3.3. 电子显微镜鉴定重组病毒样颗粒 | 第43-44页 |
| 2.3.4. RT-PCR鉴定重组病毒样颗粒内含的目的RNA序列 | 第44-45页 |
| 2.3.5.商业试剂盒验证VLPs包装片段 | 第45-47页 |
| 2.4. 重组病毒样颗粒的耐酶性实验 | 第47-49页 |
| 2.5. 重组病毒样颗粒的稳定性实验 | 第49-51页 |
| 2.6. 以重组病毒样颗粒作为质评样本的室间质量评价 | 第51-56页 |
| 2.6.1. 样本盘的建立 | 第51页 |
| 2.6.2. 室间质量评价结果 | 第51-56页 |
| 3. 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 第二部分 内含pre-miR-122的MS2噬菌体病毒样颗粒用于miR-122的胞内转运及其在肝癌中治疗作用的研究 | 第63-123页 |
| 前言 | 第63-67页 |
| 1. 材料和方法 | 第67-97页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第67-77页 |
| 1.2. 方法 | 第77-97页 |
| 1.2.1. 内含pre-miR-122的重组病毒样颗粒真核表达载体的构建 | 第77-79页 |
| 1.2.2. 重组质粒转化酿酒酵母感受态细胞 | 第79-81页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒最佳表达条件的探索 | 第81-84页 |
| 1.2.4. 最佳条件下重组病毒样颗粒的表达及其纯化 | 第84-85页 |
| 1.2.5. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第85-86页 |
| 1.2.6. 重组病毒样颗粒的FITC荧光素标记及穿膜能力验证 | 第86-87页 |
| 1.2.7. 重组病毒样颗粒介导细胞内miR-122水平升高的验证 | 第87-90页 |
| 1.2.8. 重组病毒样颗粒的细胞毒性实验 | 第90-91页 |
| 1.2.9. 重组病毒样颗粒介导的miR-122水平升高对靶基因的抑制作用 | 第91-95页 |
| 1.2.10. 重组病毒样颗粒介导的miR-122水平升高诱导Hep3B细胞凋亡 | 第95-96页 |
| 1.2.11. 统计学分析 | 第96-97页 |
| 2. 结果 | 第97-114页 |
| 2.1. 转化酿酒酵母细胞后筛选阳性克隆 | 第97页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒最佳表达条件的探索 | 第97-100页 |
| 2.3. 最佳条件下重组病毒样颗粒的表达及其纯化 | 第100-102页 |
| 2.4. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第102-105页 |
| 2.5. FITC标记的重组病毒样颗粒进入细胞后荧光检测 | 第105-106页 |
| 2.6. 重组病毒样颗粒介导细胞内miR-122水平升高 | 第106-109页 |
| 2.7. 重组病毒样颗粒的细胞毒性实验 | 第109页 |
| 2.8. 重组病毒样颗粒介导的miR-122水平升高对靶基因的抑制作用 | 第109-111页 |
| 2.9. 重组病毒样颗粒介导的miR-122水平升高诱导Hep3B细胞凋亡 | 第111-114页 |
| 3. 讨论 | 第114-117页 |
| 参考文献 | 第117-123页 |
| 论文综述 | 第123-135页 |
| 参考文献 | 第131-135页 |
| 附录1 pACYCDuet-1载体详细信息 | 第135-137页 |
| 附录2 重组表达载体pACYC-MS2-HA、pACYC-MS2-NA、pACYC-MS2-MP和pACYC-MS2-NP测序结果 | 第137-152页 |
| 附录3 室间质量评价情况调查通知 | 第152-153页 |
| 附录4 H7N9禽流感病毒核酸检测项目开展情况调查表 | 第153-154页 |
| 附录5 H7N9禽流感病毒核酸检测室间质量评价活动安排及注意事项 | 第154-156页 |
| 附录6 H7N9禽流感病毒核酸检测室间质量评价调查活动结果回报表 | 第156-157页 |
| 附录7 各单位所用核酸提取方法和检测仪器汇总 | 第157-161页 |
| 附录8 各单位所用检测试剂汇总 | 第161-163页 |
| 附录9 各单位的检测结果汇总 | 第163-167页 |
| 附录10 pESC-URA载体详细信息 | 第167-168页 |
| 附录11 p2MS2-miR122重组质粒测序结果 | 第168-175页 |
| 附录12 pmirGLO载体详细信息 | 第175-176页 |
| 致谢 | 第176-177页 |
| 个人简介 | 第177-178页 |
