摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 杆状病毒发展史 | 第14-15页 |
1.1.1 杆状病毒简介 | 第14页 |
1.1.2 杆状病毒与宿主家蚕间的相互作用 | 第14-15页 |
1.2 家蚕抗BmNPV病毒研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 家蚕抗BmNPV资源的发现 | 第16页 |
1.2.2 影响家蚕对BmNPV感受性的因素 | 第16-17页 |
1.2.3 分子水平上对家蚕抗BmNPV的研究 | 第17-18页 |
1.2.4 家蚕抗BmNPV遗传规律的研究 | 第18页 |
1.3 基因功能研究方法概述 | 第18-21页 |
1.3.1 RNA干扰(RNA interference) | 第18-19页 |
1.3.2 基因编辑技术 | 第19-21页 |
1.3.3 GAL4/UAS系统 | 第21页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第21-23页 |
1.4.1 本课题研究的主要内容和意义 | 第21-22页 |
1.4.2 本课题研究的主要技术路线 | 第22-23页 |
第2章 BmNPV侵染后中肠组织的转录组分析 | 第23-37页 |
2.1 实验材料与设备 | 第23-24页 |
2.1.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.2 实验主要仪器设备 | 第23页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-26页 |
2.2.1 BmNPV侵染家蚕处理 | 第24页 |
2.2.2 RNA提取 | 第24页 |
2.2.3 RNA样品检测 | 第24页 |
2.2.4 RNA文库构建及测序 | 第24-25页 |
2.2.5 测序原始数据处理及文库质检 | 第25页 |
2.2.6 转录组数据比对及Unigene的注释 | 第25页 |
2.2.7 差异基因表达分析 | 第25-26页 |
2.2.8 荧光定量PCR验证 | 第26页 |
2.3 结果分析 | 第26-35页 |
2.3.1 测序数据 | 第26-27页 |
2.3.2 基因结构分析 | 第27-29页 |
2.3.3 新基因分析 | 第29页 |
2.3.4 差异表达基因分析 | 第29-30页 |
2.3.5 差异表达基因功能注释及富集分析 | 第30-34页 |
2.3.6 qRT-PCR验证差异表达基因 | 第34-35页 |
2.4 讨论与小结 | 第35-37页 |
第3章 BmTret1-like基因的克隆及BmNPV感染后组织表达分析 | 第37-50页 |
3.1 实验材料与设备 | 第38-39页 |
3.1.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.2 实验主要仪器设备 | 第38页 |
3.1.3 实验主要试剂 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 BmNPV侵染家蚕处理 | 第39页 |
3.2.2 RNA的提取 | 第39页 |
3.2.3 反转录反应 | 第39-40页 |
3.2.4 家蚕BmTret1-like基因的RT-PCR | 第40页 |
3.2.5 产物胶回收 | 第40-41页 |
3.2.6 连接转化 | 第41-42页 |
3.2.7 家蚕BmTret1-like基因同源基因的结构分析 | 第42页 |
3.2.8 家蚕BmTret1-like基因表达分析 | 第42-43页 |
3.3 结果分析 | 第43-49页 |
3.3.1 RNA样品的提取 | 第43页 |
3.3.2 家蚕BmTret1-like基因cDNA的克隆分析 | 第43页 |
3.3.3 家蚕BmTret1-like基因家族的基因组分布 | 第43-46页 |
3.3.4 其它昆虫tret1-like基因序列比对及系统进化树的构建 | 第46-47页 |
3.3.5 家蚕BmTret1-like基因表达 | 第47-49页 |
3.4 讨论与小结 | 第49-50页 |
第4章 BmTret1-like基因的功能初探 | 第50-55页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第50-51页 |
4.1.1 实验材料 | 第50页 |
4.1.2 实验主要设备 | 第50页 |
4.1.3 实验主要试剂 | 第50-51页 |
4.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.2.1 dsRNA引物的合成及模板的制备 | 第51页 |
4.2.2 dsRNA的制备 | 第51-52页 |
4.2.3 dsRNA的注射 | 第52-53页 |
4.3 结果分析 | 第53-54页 |
4.3.1 BmTret1-like基因双链RNA的合成 | 第53页 |
4.3.2 BmTret1-like基因对家蚕抗BmNPV的影响 | 第53-54页 |
4.4 讨论与小结 | 第54-55页 |
结论与展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |