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BmNPV侵染家蚕中肠组织转录组分析及BmTret1-like基因的功能鉴定

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第1章 绪论第14-23页
    1.1 杆状病毒发展史第14-15页
        1.1.1 杆状病毒简介第14页
        1.1.2 杆状病毒与宿主家蚕间的相互作用第14-15页
    1.2 家蚕抗BmNPV病毒研究进展第15-18页
        1.2.1 家蚕抗BmNPV资源的发现第16页
        1.2.2 影响家蚕对BmNPV感受性的因素第16-17页
        1.2.3 分子水平上对家蚕抗BmNPV的研究第17-18页
        1.2.4 家蚕抗BmNPV遗传规律的研究第18页
    1.3 基因功能研究方法概述第18-21页
        1.3.1 RNA干扰(RNA interference)第18-19页
        1.3.2 基因编辑技术第19-21页
        1.3.3 GAL4/UAS系统第21页
    1.4 本研究的目的意义第21-23页
        1.4.1 本课题研究的主要内容和意义第21-22页
        1.4.2 本课题研究的主要技术路线第22-23页
第2章 BmNPV侵染后中肠组织的转录组分析第23-37页
    2.1 实验材料与设备第23-24页
        2.1.1 实验材料第23页
        2.1.2 实验主要仪器设备第23页
        2.1.3 实验主要试剂第23-24页
    2.2 实验方法第24-26页
        2.2.1 BmNPV侵染家蚕处理第24页
        2.2.2 RNA提取第24页
        2.2.3 RNA样品检测第24页
        2.2.4 RNA文库构建及测序第24-25页
        2.2.5 测序原始数据处理及文库质检第25页
        2.2.6 转录组数据比对及Unigene的注释第25页
        2.2.7 差异基因表达分析第25-26页
        2.2.8 荧光定量PCR验证第26页
    2.3 结果分析第26-35页
        2.3.1 测序数据第26-27页
        2.3.2 基因结构分析第27-29页
        2.3.3 新基因分析第29页
        2.3.4 差异表达基因分析第29-30页
        2.3.5 差异表达基因功能注释及富集分析第30-34页
        2.3.6 qRT-PCR验证差异表达基因第34-35页
    2.4 讨论与小结第35-37页
第3章 BmTret1-like基因的克隆及BmNPV感染后组织表达分析第37-50页
    3.1 实验材料与设备第38-39页
        3.1.1 实验材料第38页
        3.1.2 实验主要仪器设备第38页
        3.1.3 实验主要试剂第38-39页
    3.2 实验方法第39-43页
        3.2.1 BmNPV侵染家蚕处理第39页
        3.2.2 RNA的提取第39页
        3.2.3 反转录反应第39-40页
        3.2.4 家蚕BmTret1-like基因的RT-PCR第40页
        3.2.5 产物胶回收第40-41页
        3.2.6 连接转化第41-42页
        3.2.7 家蚕BmTret1-like基因同源基因的结构分析第42页
        3.2.8 家蚕BmTret1-like基因表达分析第42-43页
    3.3 结果分析第43-49页
        3.3.1 RNA样品的提取第43页
        3.3.2 家蚕BmTret1-like基因cDNA的克隆分析第43页
        3.3.3 家蚕BmTret1-like基因家族的基因组分布第43-46页
        3.3.4 其它昆虫tret1-like基因序列比对及系统进化树的构建第46-47页
        3.3.5 家蚕BmTret1-like基因表达第47-49页
    3.4 讨论与小结第49-50页
第4章 BmTret1-like基因的功能初探第50-55页
    4.1 实验材料与试剂第50-51页
        4.1.1 实验材料第50页
        4.1.2 实验主要设备第50页
        4.1.3 实验主要试剂第50-51页
    4.2 实验方法第51-53页
        4.2.1 dsRNA引物的合成及模板的制备第51页
        4.2.2 dsRNA的制备第51-52页
        4.2.3 dsRNA的注射第52-53页
    4.3 结果分析第53-54页
        4.3.1 BmTret1-like基因双链RNA的合成第53页
        4.3.2 BmTret1-like基因对家蚕抗BmNPV的影响第53-54页
    4.4 讨论与小结第54-55页
结论与展望第55-57页
参考文献第57-63页
攻读硕士学位期间发表的论文第63-64页
致谢第64页

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