| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 摘要 | 第7-12页 |
| CHEPTER 1 LITERATURE REVIEWS | 第12-25页 |
| 1.1 Cotton | 第12页 |
| 1.2 Verticillium wilt in Cotton | 第12-13页 |
| 1.3 Defoliating strains | 第13-14页 |
| 1.4 Verticillium is a soil borne plant pathogen | 第14-15页 |
| 1.5 Verticillium dahliae | 第15-16页 |
| 1.6 Verticillium wilt Control | 第16-17页 |
| 1.7 Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT) | 第17-19页 |
| 1.8 TAIL-PCR | 第19页 |
| 1.9 Pathogenicity genes of Verticillium dahliae | 第19-20页 |
| 1.10 Verticillium genome analysis | 第20-21页 |
| 1.11 Problems and Prospects | 第21-22页 |
| 1.12 The purpose of this study | 第22-23页 |
| 1.13 Objective and scope of this thesis | 第23-25页 |
| CHEPTER 2 OPTIMIZATION OF A TRANSFORMATION SYSTEM FOR ADEFOLIATING V.DAHLIAE STRAIN BASED ON THE A GROBACTERIUMTUMEFACIENS-MEDIATED APPROACH | 第25-37页 |
| 2.1 INTRODUCTION | 第25-26页 |
| 2.2 MATERIALS AND METHODS | 第26-32页 |
| 2.2.1 Fungal Cultures and Growth Conditions | 第26页 |
| 2.2.2 A.tumefaciens strains | 第26页 |
| 2.2.3 Plasmid construction | 第26-27页 |
| 2.2.4 A. tumefaciens-mediated transformation | 第27-30页 |
| 2.2.5 Optimization of ATMT transformation conditions for V.dahlia | 第30-31页 |
| 2.2.6 Sensitivity of V.dahliae and A.tumefaciens to hygromycin B | 第31页 |
| 2.2.7 Purification of transformants | 第31页 |
| 2.2.8 Data Analysis | 第31-32页 |
| 2.3 RESULTS | 第32-35页 |
| 2.3.1 Sensitivity of wild type XJ2008 to Antibiotics | 第32页 |
| 2.3.2 Optimized condition for ATMT transformation | 第32-35页 |
| 2.4 DISCUSSION | 第35-37页 |
| CHEPTER 3 GENERATION AND EVALUATION OF A LARGE MUTATIONALLIBRARY FROM A DEFOLIATING V.DAHLIAE STRAIN | 第37-65页 |
| 3.1 INTRODUCTION | 第37-39页 |
| 3.2 MATERIALS AND METHODS | 第39-43页 |
| 3.2.1 ATMT transformation | 第39页 |
| 3.2.2 DNA extraction | 第39-40页 |
| 3.2.3 Mitotic Stability of Transformants | 第40页 |
| 3.2.4 Analysis for biological characteristics of wild-type strain and transformants | 第40-42页 |
| 3.2.5 Data Analysis | 第42-43页 |
| 3.3 RESULTS | 第43-62页 |
| 3.3.1 Generation of a mutant library of defoliating strain XJ2008 | 第43页 |
| 3.3.2 DNA extraction and analysis | 第43-44页 |
| 3.3.3 Mitotic Stability of Transformants | 第44-45页 |
| 3.3.4 Growth rate and colony morphology of transformants | 第45-51页 |
| 3.3.5 Sporulation quantity of mutants | 第51-55页 |
| 3.3.6 Microsclerotia formation | 第55页 |
| 3.3.7 Pathogenicity test | 第55-60页 |
| 3.3.8 The correlations between growth rate,Sporulation and Pathogenicity | 第60-62页 |
| 3.4 DISCUSSION | 第62-65页 |
| CHAPTER 4 IDENTIFICATION OF PATHOGENICITY-RELATED GENES | 第65-78页 |
| 4.1 INTRODUCTION | 第65-66页 |
| 4.2 MATERIALS AND METHODS | 第66-68页 |
| 4.2.1 Fungal and Bacterial Strains | 第66页 |
| 4.2.2 Confirmation of pathogenic defects of mutant | 第66页 |
| 4.2.5 Verification by PCR | 第66-67页 |
| 4.2.6 hiTAIL-PCR | 第67页 |
| 4.2.7 Data Analysis | 第67-68页 |
| 4.3 RESULTS | 第68-76页 |
| 4.3.1 Analysis of the copy number of T-DNA insertion mutants | 第68页 |
| 4.3.2 Screening for biological characteristics | 第68-70页 |
| 4.3.3 Re-screening pathogenicity test | 第70-71页 |
| 4.3.4 Determination of the site of T-DNA insertion | 第71-72页 |
| 4.3.5 PCR amplification,cloning and sequencing | 第72-73页 |
| 4.3.6 Transformation of bacteria | 第73页 |
| 4.3.7 Analysis of T-DNA flanking sequences | 第73-76页 |
| 4.4 DISCUSSION | 第76-78页 |
| SUMMARY AND CONCLUSION | 第78-80页 |
| REFRENCE | 第80-88页 |
| APPENDIX | 第88-106页 |
| LIST OF ABBREVIATION | 第106-107页 |
| LIST OF TABLE | 第107-108页 |
| LIST OF FIGURES | 第108-111页 |
| CURRICULUM VITAE | 第111-115页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第115页 |
