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家蚕减数分裂阻滞基因及RNA和输出因子结合蛋白基因的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-13页
引言第13-14页
第一章 昆虫精子形成调控的分子机制第14-27页
   ·果蝇精子发生和形成的形态学特征第14-15页
   ·果蝇睾丸的胚原始增殖中心的基因表达第15-17页
   ·初级精母细胞激活组织特异性转录程序第17-18页
   ·初级精母细胞中的基因表达第18-19页
   ·X 染色体的基因表达第19页
   ·减数分裂阻滞基因:在初级精母细胞中调控基因表达第19-23页
   ·精子延长中的转录活性第23-24页
   ·结语第24页
 参考文献第24-27页
第二章 RNA 的核输出机制第27-38页
   ·核孔复合物第27-28页
   ·经典的 importin-β 受体介导的出核运输第28-29页
   ·tRNA 核输出第29-30页
   ·miRNA 的核输出第30-31页
   ·snRNA 的核输出第31页
   ·mRNA 的核输出第31-34页
   ·rRNA 的核输出第34-35页
   ·结语第35页
 参考文献第35-38页
第三章 研究目的与研究内容第38-41页
 1 研究的目的和意义第38-39页
 2 研究的主要内容第39页
 3 技术路线第39-41页
第四章 材料与方法第41-60页
 1 一般材料第41-48页
   ·载体与菌种第41页
   ·细胞第41页
   ·生物材料第41页
   ·工具酶及试剂盒第41页
   ·其它试剂第41-42页
   ·主要实验试剂的配制第42-48页
 2 实验常用仪器设备第48-49页
 3 常用实验方法第49-59页
   ·碱裂解法制备质粒DNA第49-50页
   ·PCR 扩增第50页
   ·酶切反应第50页
   ·连接反应第50-51页
   ·感受态细胞的制备第51页
   ·连接产物的转化第51-52页
   ·重组质粒的筛选第52页
   ·琼脂糖凝胶电泳第52页
   ·分离回收目的片段第52页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第52-53页
   ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色第53页
   ·Western blotting第53-54页
   ·总RNA 的提取第54页
   ·RNA 反转录成 cDNA第54-55页
   ·纯化过柱第55-56页
   ·多克隆抗体的制作第56页
   ·定量 PCR(Quantitative PCR.qPCR)第56页
   ·免疫荧光检测第56-57页
   ·石蜡组织切片制作和染色第57-59页
 参考文献第59-60页
第五章 家蚕 aly 基因 cDNA 的克隆与序列分析第60-71页
 1 材料与方法第61-62页
   ·试剂材料第61页
   ·实验方法第61-62页
 2 结果与分析第62-68页
   ·Bmaly 基因的电子克隆第62页
   ·Bmaly ORF 的克隆与鉴定第62-63页
   ·Bmaly ORF 的分析第63-64页
   ·Bmaly 的保守结构域预测第64-65页
   ·Aly 的同源性比较第65-67页
   ·Aly 的进化分析第67-68页
 3 讨论第68-69页
 参考文献第69-71页
第六章 Bmaly 基因在家蚕不同组织中的表达差异第71-76页
 1 材料与方法第71-72页
   ·材料第71-72页
   ·方法第72页
 2 结果与分析第72-74页
   ·q-PCR 分析 Bmaly 在不同组织中的表达第72-73页
   ·基于基因芯片的 Bmaly 的表达谱第73-74页
 3 讨论第74-75页
 参考文献第75-76页
第七章 家蚕 aly 的原核表达、抗体制备和细胞定位第76-85页
 1 材料与方法第76-79页
   ·试剂材料第76-77页
   ·实验方法第77-79页
 2 结果与分析第79-81页
   ·BmAly 重组蛋白的诱导表达及过柱纯化第79页
   ·Western blotting 检测 BmAly 抗体的特异性。第79-80页
   ·BmAly 亚细胞定位第80-81页
 3 讨论第81-83页
   ·Bmaly 基因的稀有密码子对原核表达的影响第81页
   ·原核表达重组蛋白的纯化第81-82页
   ·BmAly 的亚细胞定位第82-83页
 参考文献第83-85页
第八章 注射 Bmaly siRNA 对家蚕精细胞发育的影响第85-91页
 1 材料与方法第86-87页
   ·试剂材料第86页
   ·实验方法第86-87页
 2 结果与分析第87-89页
   ·注射 siRNA 对精细胞发育的影响第87-88页
   ·注射 siRNA 对蚕卵受精率的影响第88-89页
 3 讨论第89-90页
 参考文献第90-91页
第九章 家蚕 ref 基因的克隆、序列分析及其细胞定位第91-106页
 1 材料与方法第93-95页
   ·材料与试剂第93页
   ·基因的克隆第93-94页
   ·Bmref 序列分析第94页
   ·家蚕 BmREF 原核表达质粒的构建及诱导表达第94页
   ·SDS-PAGE 和 Western blotting第94页
   ·鼠抗 His-BmREF 抗体的制备第94页
   ·BmREF 的细胞定位第94-95页
   ·表达谱分析第95页
 2 结果与分析第95-102页
   ·家蚕 BmREF ORF 的克隆与鉴定第95-96页
   ·Bmref 高级结构分析第96-97页
   ·REF 多重比对和进化分析第97-100页
   ·BmREF 原核表达及其抗体制备第100-101页
   ·BmREF 的细胞定位第101-102页
   ·Bmref 的组织表达谱第102页
 3 讨论第102-103页
 参考文献第103-106页
结论第106-107页
 1 已取得的成果第106页
 2 有待进行的研究第106-107页
附录第107-110页
 1 英文简写对照表第107-108页
 2 载体图谱第108-109页
 3 pPigT7 和 AcA3IFP2 结构第109-110页
在校期间发表论文情况第110-111页
 1 研究论文第110页
 2 GenBank 登录序列第110-111页
致谢第111-112页

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