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家蚕发育相关基因Bmvlg和Bmvis的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 综述第11-27页
 1 昆虫发育第11-14页
   ·昆虫胚胎发育第11-12页
   ·家蚕胚胎发育第12-14页
 2 Vasa 研究进展第14-19页
   ·Vasa 同源物的研究第14-18页
   ·vasa 研究意义第18-19页
 3 发育相关基因vismay 的研究第19-22页
   ·TGF-β信号通路第19-21页
   ·vismay 研究进展第21-22页
 参考文献第22-27页
第二章 课题研究意义及内容第27-29页
 1 研究意义第27-28页
 2 研究内容第28-29页
第三章 实验材料与方法第29-43页
 1 实验材料第29-34页
   ·载体与菌种第29页
   ·生物材料第29页
   ·工具酶及试剂盒第29页
   ·其它试剂第29-30页
   ·主要实验试剂与配制第30-34页
 2 常用仪器第34-35页
 3 常用实验方法第35-41页
   ·感受态细胞的制备第35页
   ·DNA 的连接反应体系第35页
   ·连接产物的转化第35页
   ·重组质粒的筛选第35页
   ·碱裂解法少量制备质粒DNA第35-36页
   ·DNA 的酶切反应体系第36-37页
   ·目的片段的分离和回收第37页
   ·PCR 扩增目的片段第37页
   ·琼脂糖凝胶电泳第37页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第37-38页
   ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色第38页
   ·Western blot第38-39页
   ·过柱纯化蛋白第39-40页
   ·免疫小鼠,制备多克隆抗体第40页
   ·RNA 反转录成cDNA第40页
   ·细胞的培养和保存第40-41页
   ·定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)第41页
 参考文献第41-43页
第四章 家蚕vasa-like 基因在雌雄性腺间的表达差异第43-52页
 1 材料与方法第44-45页
   ·试剂材料第44页
   ·实验方法第44-45页
 2 结果与分析第45-47页
   ·家蚕vlg 重组表达载体的鉴定第45-46页
   ·BmVLG 重组蛋白的诱导表达第46页
   ·BmVLG 蛋白的过柱纯化第46-47页
   ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测第47页
 3 讨论第47-49页
   ·原核表达重组蛋白的纯化第47-48页
   ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测第48-49页
 参考文献第49-52页
第五章 家蚕vlg 的实时定量PCR 分析第52-59页
 1 材料与方法第52-53页
   ·材料第52-53页
   ·方法第53页
 2 结果与分析第53-56页
   ·q-PCR 分析Bmvlg 在不同组织中的表达第53-55页
   ·基于基因芯片的BmVLG 的表达谱分析第55-56页
 3 讨论第56-57页
 参考文献第57-59页
第六章 Bm-VLG 在家蚕细胞中的定位第59-64页
 1 材料与方法第59-60页
   ·材料第59页
   ·免疫荧光细胞化学试剂第59-60页
   ·免疫荧光检测第60页
 2 结果与分析第60-61页
 3 讨论第61-62页
 参考文献第62-64页
第七章 Bmvlg-DsRed 融合蛋白载体的构建和转基因家蚕的制备第64-71页
 1 材料与方法第65-66页
   ·试剂材料第65页
   ·实验方法第65-66页
 2 结果与分析第66-68页
   ·Bmvlg - DsRed 的融合蛋白表达载体的构建第66-67页
   ·转基因家蚕的筛选与鉴定第67-68页
 3 讨论第68-69页
 参考文献第69-71页
第八章 家蚕vis 基因的克隆、组织表达和亚细胞定位第71-84页
 1 材料与方法第72-74页
   ·材料第72页
   ·Bmvis 基因的克隆及组织表达第72页
   ·Bmvis 基因的生物信息学分析第72-73页
   ·家蚕vis 基因的原核表达载体构建及目的蛋白的诱导表达第73页
   ·重组家蚕Vismay 蛋白的纯化第73页
   ·多克隆抗体的制备第73-74页
   ·SDS-PAGE 和Western blotting第74页
   ·Vis 蛋白的亚细胞定位第74页
 2 结果与分析第74-80页
   ·Bmvis 基因的电子克隆及RT-PCR 获得Bmvis 基因片段第74-75页
   ·Bmvis 基因及其编码氨基酸的序列分析第75-78页
   ·Bmvis 基因在家蚕不同组织中的表达第78-79页
   ·Bmvis 基因的原核表达及western blotting 检测第79页
   ·BmVis 蛋白的亚细胞定位第79-80页
 3 讨论第80-81页
 参考文献第81-84页
结论第84-85页
攻硕期间科研情况第85-86页
附录第86-89页
致谢第89-90页

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