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Periaxin蛋白PDZ结构域结合在EphrinB2的C末端序列

中文摘要第14-16页
ABSTRACT第16-17页
第一章 综述第18-31页
    1.1 周围神经髓鞘结构第18页
    1.2 周围神经中包裹轴突的施万细胞第18-19页
    1.3 施万细胞与晶状体纤维细胞特异表达的Periaxin蛋白第19-21页
        1.3.1 Periaxin的分布与功能第19-20页
        1.3.2 Periaxin的结构第20-21页
    1.4 EphrinB2及其受体EphB2第21-23页
    1.5 研究目的及意义第23-24页
    参考文献第24-31页
第二章 L-Periaxin蛋白与EphrinB2蛋白的结合区域分析第31-43页
    2.1 前言第31页
    2.2 实验材料第31页
        2.2.1 质粒及细胞系第31页
        2.2.2 试剂及仪器第31页
    2.3 实验方法第31-34页
        2.3.1 重组载体构建第31-32页
        2.3.2 细胞培养第32页
        2.3.3 细胞爬片第32页
        2.3.4 细胞转染第32页
        2.3.5 免疫荧光染色实验第32页
        2.3.6 双分子荧光互补实验第32-33页
        2.3.7 海肾荧光素酶互补实验第33页
        2.3.8 免疫共沉淀实验第33-34页
    2.4 实验结果第34-40页
        2.4.1 L-periaxin与EphrinB2在RSC96细胞中存在免疫荧光共定位第34-35页
        2.4.2 L-periaxin与EphrinB2之间存在相互作用第35页
        2.4.3 L-periaxin的PDZ结构域与EphrinB2蛋白的C末端结合第35-40页
    2.5 讨论第40-41页
    参考文献第41-43页
第三章 S-periaxin蛋白与EphrinB2蛋白相互作用分析第43-50页
    3.1 前言第43页
    3.2 实验材料第43页
        3.2.1 质粒及细胞系第43页
        3.2.2 试剂及仪器第43页
    3.3 实验方法第43-45页
        3.3.1 细胞培养第43页
        3.3.2 细胞爬片第43-44页
        3.3.3 细胞转染第44页
        3.3.4 双分子荧光互补第44页
        3.3.5 海肾荧光素酶互补实验第44-45页
        3.3.6 免疫共沉淀第45页
        3.3.7 GST Pull-down实验第45页
    3.4 实验结果第45-48页
        3.4.1 S-periaxin与EphrinB2之间存在相互作用第45-47页
        3.4.2 S-periaxin的PDZ结构域与EphrinB2的C末端结合第47-48页
    3.5 讨论第48页
    参考文献第48-50页
第四章 对L-periaxin的分子状态影响L-periaxin在细胞中的定位第50-58页
    4.1 前言第50页
    4.2 实验材料第50页
        4.2.1 质粒及细胞系第50页
        4.2.2 试剂及仪器第50页
    4.3 实验方法第50-52页
        4.3.1 细胞培养第50页
        4.3.2 细胞爬片第50-51页
        4.3.3 细胞转染第51页
        4.3.4 NLS3多肽孵育第51页
        4.3.5 膜蛋白、核蛋白和胞质蛋白抽提第51页
        4.3.6 免疫荧光染色第51页
        4.3.7 双分子荧光互补第51-52页
    4.4 实验结果第52-56页
        4.4.1 L-periaxin的NLS结构域结合在C端的酸性结构域形成首尾相接的分子结构第52-54页
        4.4.2 DRP2结合L-periaxin的NLS区域促进L-periaxin的膜上定位第54页
        4.4.3 体外合成的NLS3多肽促进L-periaxin的细胞膜定位第54-56页
    4.5 讨论第56页
    参考文献第56-58页
第五章 L-Periaxin的敲除对RSC96细胞增殖与周期的影响第58-64页
    5.1 前言第58页
    5.2 实验材料第58页
        5.2.1 质粒及细胞系第58页
        5.2.2 试剂及仪器第58页
    5.3 实验方法第58-59页
        5.3.1 细胞培养第58-59页
        5.3.2 细胞转染第59页
        5.3.3 Western blotting检测细胞中Periaxin蛋白表达情况第59页
        5.3.4 MTT法测细胞生长第59页
        5.3.5 流式细胞术检测细胞周期第59页
    5.4 实验结果第59-61页
        5.4.1 TALEN敲除L-periaxin基因的RSC96细胞只表达S-Periaxin蛋白第59-60页
        5.4.2 L-periaxin表达促进RSC96细胞的增殖第60-61页
        5.4.3 TALEN敲除L-periaxin基因RSC96细胞被阻止在细胞的S期第61页
    5.5 讨论第61-62页
    参考文献第62-64页
附录第64-66页
攻读学位期间取得的研究成果第66-67页
致谢第67-68页
个人简况及联系方式第68-69页

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