| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 中英文对照表（Abbreviations） | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 研究背景 | 第14-15页 |
| 2 油菜资源种植和利用概况 | 第15-16页 |
| 2.1 油菜的种植状况 | 第15页 |
| 2.2 油菜秸秆的利用现状 | 第15-16页 |
| 3 油菜秸秆的资源特性 | 第16-17页 |
| 3.1 油菜秸秆的结构特征 | 第16页 |
| 3.2 油菜秸秆的化学组成 | 第16-17页 |
| 3.2.1 纤维素 | 第16-17页 |
| 3.2.2 半纤维素 | 第17页 |
| 3.2.3 木质素 | 第17页 |
| 4 油菜秸秆饲料化处理技术 | 第17-20页 |
| 4.1 物理处理法 | 第18页 |
| 4.2 化学处理法 | 第18-19页 |
| 4.3 生物处理法 | 第19-20页 |
| 4.3.1 青贮 | 第19页 |
| 4.3.2 酶解处理 | 第19页 |
| 4.3.3 微贮 | 第19-20页 |
| 4.3.4 白腐菌处理 | 第20页 |
| 4.3.5 利用基因技术处理 | 第20页 |
| 5 白腐菌降解油菜秸秆的研究现状 | 第20-23页 |
| 5.1 白腐菌降解木素的机制 | 第21-22页 |
| 5.1.1 降解启动条件 | 第21页 |
| 5.1.2 白腐菌降解木质素的主要酶系统 | 第21-22页 |
| 5.1.3 降解反应过程 | 第22页 |
| 5.2 白腐菌在油菜秸秆饲料化的研究进展 | 第22-23页 |
| 6 利用分子技术将木质素降解酶基因在乳酸克鲁维酵母表达 | 第23-24页 |
| 7 研究内容 | 第24页 |
| 8 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 9 论文研究技术路线 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-66页 |
| 试验一 白腐菌发酵处理油菜秸秆对其化学成分及酶活性的影响 | 第26-36页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 1.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 1.1.1 材料及菌种 | 第26-27页 |
| 1.1.2 培养基 | 第27页 |
| 1.2 试验设计 | 第27页 |
| 1.3 样品的采集 | 第27-28页 |
| 1.4 试验指标及测定方法 | 第28页 |
| 1.4.1 化学成分分析 | 第28页 |
| 1.4.2 酶活性测定方法 | 第28页 |
| 1.5 统计分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.1 不同白腐菌发酵油菜秸秆对其化学成分的影响 | 第29页 |
| 2.2 不同白腐菌发酵的油菜秸秆的损失率 | 第29-31页 |
| 2.3 不同白腐菌发酵的油菜秸秆其发酵液的漆酶和锰过氧化物酶活性 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-35页 |
| 3.1 白腐菌发酵处理油菜秸秆对其化学成分的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 白腐菌发酵处理油菜秸秆对其养分损失率的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 白腐菌发酵油菜秸秆对其发酵液的漆酶和锰过氧化物酶活性的影响 | 第34-35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 试验二 不同白腐菌发酵处理油菜秸秆对其体外瘤胃发酵的影响 | 第36-43页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| 1.1 试验动物及材料 | 第36页 |
| 1.2 饲养管理及配方 | 第36-37页 |
| 1.3 人工培养液的配置 | 第37页 |
| 1.4 试验设计 | 第37页 |
| 1.5 试验指标及方法 | 第37-38页 |
| 1.5.1 挥发性脂肪酸（VFA）的测定 | 第37页 |
| 1.5.2 有机物体外消化率（IVOMD）的测定 | 第37-38页 |
| 1.6 有机物质酶降解率(Enzymatic OMD) | 第38页 |
| 1.7 统计分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-39页 |
| 2.1 白腐菌发酵的油菜秸秆对其体外发酵产生的挥发性脂肪酸的影响 | 第38-39页 |
| 2.2 白腐菌发酵的油菜秸秆对其IVOMD和Enzymatic OMD的影响 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 3.1 白腐菌发酵的油菜秸秆对其体外发酵产生的挥发性脂肪酸的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 白腐菌发酵的油菜秸秆对其IVOMD和Enzymatic OMD的影响 | 第40-41页 |
| 4 小结 | 第41-43页 |
| 试验三 不同白腐菌发酵处理油菜秸秆对其瘤胃降解动力学参数的影响 | 第43-47页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 1.1 试验动物及材料 | 第43-44页 |
| 1.2 尼龙袋的制备 | 第44页 |
| 1.3 饲养管理 | 第44页 |
| 1.4 试验设计 | 第44页 |
| 1.5 瘤胃降解参数的计算 | 第44-45页 |
| 1.6 统计分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 试验四 香菇菌漆酶基因的克隆及在乳酸克鲁维酵母中的表达 | 第47-66页 |
| 1 材料与方法 | 第47-59页 |
| 1.1 试验菌株与质粒 | 第47-48页 |
| 1.2 试验主要仪器 | 第48页 |
| 1.3 试剂与培养基 | 第48-50页 |
| 1.3.1 试剂 | 第48页 |
| 1.3.2 相关培养基及溶液 | 第48-50页 |
| 1.4 技术路线 | 第50页 |
| 1.5 试验方法 | 第50-59页 |
| 1.5.1香菇漆酶基因的克隆 | 第50-53页 |
| 1.5.1.1 香菇的培养 | 第50页 |
| 1.5.1.2 菌株总RNA提取 | 第50-51页 |
| 1.5.1.3 香菇RNA的RT-PCR | 第51-52页 |
| 1.5.1.5 漆酶目的基因的PCR扩增 | 第52-53页 |
| 1.5.1.5 PCR产物的纯化 | 第53页 |
| 1.5.2 克隆载体pMD-19t/Lac的构建及转化大肠杆菌 | 第53-56页 |
| 1.5.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第53-54页 |
| 1.5.2.2 p MD-19T载体质粒和漆酶基因的连接和转化 | 第54页 |
| 1.5.2.3 重组质粒pMD-19t/Lac和表达载体PKLAC2质粒的提取 | 第54-55页 |
| 1.5.2.4 重组质粒pMD-19t/Lac和表达载体pKLAC2的双酶切 | 第55-56页 |
| 1.5.2.5 目的基因的测序 | 第56页 |
| 1.5.3 表达载体pKLAC2/Lac的构建及转化乳酸克鲁维斯酵母GG799 | 第56-58页 |
| 1.5.3.1 表达载体pKLAC2的双酶切 | 第56页 |
| 1.5.3.2 载体酶切片段的胶回收纯化 | 第56页 |
| 1.5.3.3 载体pKLAC2与漆酶基因的连接和转化大肠杆菌 | 第56-57页 |
| 1.5.3.4 重组子的筛选 | 第57页 |
| 1.5.3.5 p KLAC2/Lac重组子质粒的提取 | 第57页 |
| 1.5.3.6 重组质粒pKLAC2/Lac的线性化及纯化 | 第57页 |
| 1.5.3.7 线性化的pKLAC2/Lac质粒转化乳酸克鲁维酵母菌GG799 | 第57-58页 |
| 1.5.4 转化子的筛选和鉴定 | 第58-59页 |
| 1.5.4.1 重组乳酸克鲁维酵母总DNA的提取 | 第58-59页 |
| 1.5.4.2 重组乳酸克鲁维酵母DNA的PCR鉴定 | 第59页 |
| 1.5.4.3 重组乳酸克鲁维酵母的诱导表达 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-64页 |
| 2.1 香菇漆酶基因的克隆 | 第59-62页 |
| 2.1.1 香菇菌的总RNA的提取 | 第59-60页 |
| 2.1.2 漆酶基因（Lac）cDNA序列的克隆 | 第60-61页 |
| 2.1.3 重组质粒pMD-19T/ Lac的双酶切 | 第61页 |
| 2.1.4 漆酶基因（Lac）的测序 | 第61-62页 |
| 2.2 酵母表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 2.2.1 重组表达质粒p KLAC2/Lac的线性化 | 第62-63页 |
| 2.2.2 重组表达质粒p KLAC2/Lac的转化和重组菌株的筛选 | 第63-64页 |
| 2.3 重组乳酸克鲁维酵母酶活性测定及筛选 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 第三部分 全文结论、创新之处及需进一步研究的问题 | 第66-67页 |
| 1 全文结论 | 第66页 |
| 2 本论文的创新点 | 第66页 |
| 3 需进一步研究的问题 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
