| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写名词表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 绪论 | 第9页 |
| 2 植物抗寒性机理的研究 | 第9-11页 |
| 2.1 脱落酸依赖冷信号途径 | 第10页 |
| 2.2 非脱落酸依赖冷信号途径 | 第10-11页 |
| 3 东乡野生稻的研究进展 | 第11-14页 |
| 3.1 基因水平探究耐冷性的研究 | 第12-13页 |
| 3.2 东乡野生稻杂交育种的研究 | 第13-14页 |
| 4 泛素蛋白酶体途径的研究 | 第14-17页 |
| 4.1 泛素蛋白酶体途径的组成及其功能特征 | 第14-15页 |
| 4.2 E3泛素连接酶 | 第15-16页 |
| 4.3 E3泛素连接酶在植物抗逆反应中的作用 | 第16-17页 |
| 5 本实验的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 东乡野生稻SRFP1的基因鉴定和生物信息学分析 | 第18-30页 |
| 1 试验材料、仪器、试剂 | 第18页 |
| 1.1 植物材料 | 第18页 |
| 1.2 试验仪器 | 第18页 |
| 1.3 试验试剂和配方 | 第18页 |
| 2 试验方法 | 第18-20页 |
| 2.1 SRFP1基因的克隆 | 第18-19页 |
| 2.2 东乡野生稻基因SRFP1生物信息学分析 | 第19-20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-29页 |
| 3.1 SRFP1的基因鉴定 | 第20-22页 |
| 3.2 东乡野生稻基因SRFP1的生物信息学分析 | 第22-29页 |
| 4 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 SRFP1基因的克隆与蛋白的原核表达 | 第30-42页 |
| 1 试验材料、仪器、试剂 | 第30-32页 |
| 1.1 植物材料 | 第30页 |
| 1.2 试验仪器 | 第30页 |
| 1.3 试验试剂和配方 | 第30-32页 |
| 1.4 菌株和载体材料 | 第32页 |
| 2 试验方法 | 第32-36页 |
| 2.1 目的片段PCR | 第32页 |
| 2.2 PCR产物纯化回收 | 第32-33页 |
| 2.3 质粒的碱裂抽提法 | 第33页 |
| 2.4 质粒的双酶切反应 | 第33-34页 |
| 2.5 DNA片段的割胶回收法 | 第34页 |
| 2.6 双酶切后DNA片段的连接反应 | 第34页 |
| 2.7 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.8 重组DNA的转化 | 第35页 |
| 2.9 SRFP1融合蛋白的原核表达 | 第35-36页 |
| 2.10 SRFP1融合蛋白的分离纯化 | 第36页 |
| 2.11 SRFP1融合蛋白的热稳定性检测 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.1 重组载体pET-28a(+)-SRFP1的构建 | 第36-38页 |
| 3.2 东乡野生稻SRFP1重组基因的原核表达 | 第38-39页 |
| 3.3 SRFP1融合蛋白的分离纯化 | 第39-40页 |
| 3.4 SRFP1融合蛋白的热稳定性研究 | 第40-41页 |
| 4 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 SRFP1基因在东乡野生稻中的表达量分析 | 第42-51页 |
| 1 试验材料、仪器、试剂 | 第42-44页 |
| 1.1 植物材料 | 第42页 |
| 1.2 试验仪器 | 第42页 |
| 1.3 试验试剂和配方 | 第42-43页 |
| 1.4 东乡野生稻不同生育期的根和叶的取材 | 第43页 |
| 1.5 东乡野生稻三叶期幼苗的非生物逆境胁迫处理与取材 | 第43-44页 |
| 2 试验方法 | 第44-46页 |
| 2.1 提取植株总RNA | 第44-45页 |
| 2.2 基因组DNA的清除 | 第45页 |
| 2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR | 第45-46页 |
| 3 结果与分析结论与分析 | 第46-51页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 3.2 东乡野生稻不同组织中SRFP1基因的表达分析 | 第47-48页 |
| 3.3 非生物逆境胁迫下SRFP1基因的表达分析 | 第48-50页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 总结与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
