| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 国内双峰驼研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 国外双峰驼研究现状 | 第13页 |
| 1.3 CYP酶研究现状 | 第13-17页 |
| 1.3.1 CYP酶概述 | 第13-14页 |
| 1.3.2 几种主要CYP酶 | 第14-16页 |
| 1.3.3 CYP2D_6酶概述 | 第16-17页 |
| 1.4 CYP酶活性研究方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 体内研究方法 | 第17页 |
| 1.4.2 体外研究方法 | 第17-18页 |
| 1.5 试验目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1 实验肝脏 | 第19页 |
| 2.2 实验仪器 | 第19页 |
| 2.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-26页 |
| 3.1 制备双峰驼肝微粒体 | 第20页 |
| 3.2 测定双峰驼肝微粒体蛋白浓度 | 第20-21页 |
| 3.2.1 绘制BCA蛋白标准曲线及测定样品蛋白浓度 | 第20页 |
| 3.2.2 考察BCA试剂盒精密度、标准蛋白样品稳定性及回收率 | 第20-21页 |
| 3.3 测定双峰驼肝微粒体CYP总酶含量及Cytb_5含量 | 第21页 |
| 3.3.1 测定双峰驼肝微粒体CYP总酶含量 | 第21页 |
| 3.3.2 测定双峰驼肝微粒体Cytb_5含量 | 第21页 |
| 3.4 建立CYP2D_6酶特异性底物及其产物的HPLC检测方法 | 第21-24页 |
| 3.4.1 确定色谱条件 | 第22页 |
| 3.4.2 配制标准品溶液 | 第22页 |
| 3.4.3 绘制产物去甲右美沙芬标准曲线 | 第22页 |
| 3.4.4 绘制底物氢溴酸右美沙芬标准曲线 | 第22-23页 |
| 3.4.5 建立双峰驼肝微粒体孵育体系 | 第23-24页 |
| 3.4.6 双峰驼CYP2D_6酶动力学特征研究 | 第24页 |
| 3.4.7 研究双峰驼CYP2D_6酶对底物氢溴酸右美沙芬的代谢率 | 第24页 |
| 3.5 考察奎尼丁对双峰驼CYP2D_6酶活性的影响 | 第24-26页 |
| 3.5.1 奎尼丁对双峰驼CYP2D6酶活性的抑制作用 | 第24-25页 |
| 3.5.2 奎尼丁对双峰驼CYP2D6酶抑制的时间依赖性 | 第25页 |
| 3.5.3 奎尼丁对双峰驼CYP2D6酶的IC50值 | 第25-26页 |
| 4 实验结果与分析 | 第26-42页 |
| 4.1 双峰驼肝微粒体蛋白浓度测定结果 | 第26-28页 |
| 4.1.1 绘制BCA标准曲线 | 第26页 |
| 4.1.2 双峰驼肝微粒体蛋白浓度测定结果 | 第26页 |
| 4.1.3 BCA试剂盒精密度考察结果 | 第26-27页 |
| 4.1.4 BCA稳定性及相对回收率考察结果 | 第27-28页 |
| 4.2 双峰驼CYP总酶含量测定结果 | 第28页 |
| 4.3 双峰驼Cytb_5含量测定结果 | 第28页 |
| 4.4 双峰驼CYP2D6酶对特异性底物代谢活性的研究结果 | 第28-39页 |
| 4.4.1 色谱条件专属性考察 | 第28-30页 |
| 4.4.2 去甲右美沙芬标准曲线的制作与方法学考察 | 第30-32页 |
| 4.4.3 氢溴酸右美沙芬标准曲线的制作 | 第32-33页 |
| 4.4.4 双峰驼肝微粒体孵育体系优化结果 | 第33-35页 |
| 4.4.5 双峰驼CYP2D_6酶活性测定结果 | 第35-38页 |
| 4.4.6 氢溴酸右美沙芬代谢率研究结果 | 第38-39页 |
| 4.5 奎尼丁对双峰驼CYP2D_6酶活性的抑制作用 | 第39-42页 |
| 4.5.1 奎尼丁抑制作用对时间依赖性的结果 | 第39-40页 |
| 4.5.2 计算奎尼丁对双峰驼CYP2D_6酶的IC_(50)值 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-46页 |
| 5.1 实验动物肝脏的采集 | 第42页 |
| 5.2 动物肝微粒体的制备 | 第42页 |
| 5.3 肝微粒体蛋白浓度及CYP总酶含量的测定 | 第42-43页 |
| 5.4 肝微粒体孵育体系的优化 | 第43页 |
| 5.5 高效液相色谱条件的确定 | 第43-44页 |
| 5.6 CYP2D_6酶动力学参数的考察 | 第44-45页 |
| 5.7 奎尼丁对双峰驼CYP2D_6酶的抑制作用 | 第45-46页 |
| 6 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
